談醫(yī)藥院校高效液相色譜管理

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摘要：本文從制度管理、規(guī)范化操作管理、維護管理等三個方面來闡述醫(yī)藥院校高效液相色譜的管理，通過規(guī)范的管理，提高儀器的使用率，保障化相關教學科研工作的順利進行。

關鍵詞：醫(yī)藥院校；高效液相色譜；管理

高效液相色譜法是儀器分析的一種重要方法[1]，是醫(yī)藥院校中醫(yī)學類、藥學類及其相關專業(yè)必需的實驗課內(nèi)容，是實踐性操作性專業(yè)性很強的一種分析方法，在教學和科研方面為培養(yǎng)技能型醫(yī)藥專才發(fā)揮著重要作用。高效液相色譜適用于分析受熱不穩(wěn)定易分解的、高沸點、不易揮發(fā)的、分子量較大、不同極性的天然和合成有機化合物，應用范圍十分廣泛，具有高效率、高分辨率、高靈敏度、高速度的特點。而且，儀器十分昂貴，并要經(jīng)常維護，因而，對于高效液相的管理提出了很高的要求。

1制度管理

建立和完善高效液相色譜相關管理制度，使管理制度科學化合理化規(guī)范化，在學校和學院層面建立《高效液相色譜使用、維護管理制度》，加強管理。由于使用人員較多，要實行提前預約制度，按照預約時間排隊。儀器使用前要熟悉儀器操作規(guī)程，不得做與實驗無關的參數(shù)設置；不得拆卸儀器，有問題要及時匯報。因實驗人員使用不當造成的儀器或軟件損壞由實驗者或其負責人負責盡快維修。實驗數(shù)據(jù)存放建立的文件夾，以實驗者名字命名，數(shù)據(jù)拷貝用專用U盤，不得擅自在電腦里安裝軟件，確實需要安裝需經(jīng)過管理者同意。使用者要經(jīng)過專業(yè)的操作培訓，合格后方可單獨操作儀器。通過規(guī)范化的制度管理，不但能提高儀器的使用率，還能延長儀器的壽命。

2規(guī)范化操作管理

進行高效液相色譜實驗時，每個環(huán)節(jié)的操作，直接影響實驗的成敗，有些失誤甚至會造成儀器不同零部件的損壞，因而每個操作都要嚴謹和細致，因此有必要規(guī)范化操作，制定標準的操作流程。以普通的高效液相色譜儀為例，具體步驟要有嚴格的先后操作順序：（1）過濾流動相，根據(jù)需要選擇不同的濾膜。（2）對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。（3）打開HPLC工作站（包括計算機軟件和色譜儀），連接好流動相管道，連接檢測系統(tǒng)。（4）進入HPLC控制界面主菜單，點擊manual，進入手動菜單。（5）有一段時間沒用，或者換了新的流動相，需要先沖洗泵和進樣閥。沖洗泵，直接在泵的出水口，用針頭抽取。沖洗進樣閥，需要在manual菜單下，先點擊purge，再點擊start，沖洗時速度不要超過10ml/min。（6）調(diào)節(jié)流量，初次使用新的流動相，可以先試一下壓力，流速越大，壓力越大，一般不要超過2000。點擊injure，選用合適的流速，點擊on，走基線，觀察基線的情況。（7）設計走樣方法。點擊file，選取selectusersandmethods，可以選取現(xiàn)有的各種走樣方法。若需建立一個新的方法，點擊newmethod。選取需要的配件，包括進樣閥，泵，檢測器等，根據(jù)需要而不同。選完后，點擊protocol。一個完整的走樣方法需要包括：a.進樣前的穩(wěn)流，一般2~5分鐘；b.基線歸零；c.進樣閥的loading-inject轉換；d.走樣時間，隨不同的樣品而不同。（8）進樣和進樣后操作。選定走樣方法，點擊start。進樣，所有的樣品均需過濾。方法走完后，點擊postrun，可記錄數(shù)據(jù)和做標記等。全部樣品走完后，再用上面的方法走一段基線，洗掉剩余物。（9）關機時，先關計算機，再關液相色譜。只有規(guī)范具體的操作流程，才能更好地進行分析實驗，獲得準確真實科學的實驗數(shù)據(jù)，才能更好地維護好高效液相色譜儀器。

3維護管理

在使用高效液相色譜色譜儀器后一定要做好維護管理，一般來說最好的維護就是經(jīng)常規(guī)范性使用，在操作使用時充分了解儀器的注意事項，做到科學分析合理使用。流動相需采用色譜純?nèi)軇殲槌兯?，準備所需的流動相，以滿足儀器要求，避免損壞色譜柱;超純水須當天配當天用；進樣或溶劑進入色譜柱前須經(jīng)徹底的排氣，嚴禁氣泡進入色譜柱;流動相進入色譜柱后要檢查流路有沒漏液，特別是色譜柱的接頭；嚴禁100%水進入反相色譜柱，需有一定的有機溶劑比例；嚴禁使用沒經(jīng)濾膜過濾的溶劑沖洗色譜柱，避免將互不相溶的溶劑一同進入泵內(nèi)；流動相需經(jīng)過濾、除氣后方可使用，用適合的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20~30min；待分析的樣品必須徹底溶解澄清、過濾，配制樣品和標準溶液，用合適的0.45μm濾膜過濾，以避免堵塞、損壞色譜柱，所有通過色譜柱的液體須經(jīng)嚴格過濾；流動相的比例須逐步過渡，不能跨度太大；流速不論是由慢到快還是由快到慢也須逐步過渡，最大流速一般不超過10ml/min；分析完成后，須及時清洗色譜柱和檢測器的比色池，原則上先用流動相沖洗30min，再逐步過渡到100%有機溶劑（甲醇或乙腈）沖洗30min，嚴禁由一種溶劑馬上變換另一種溶劑，酸堿鹽類須先由90%水:10%甲醇沖洗30~60min，再逐步過渡到100%甲醇沖洗。長時間不用色譜柱，要沖洗好后，用純甲醇或乙腈封存普通；C18柱盡量避免在40℃以上的溫度下分析，定期測柱效，有下降，可以用10％異丙醇甲醇沖洗色譜柱。每次實驗后要做好登記使用記錄，長時間不用時，管理人員應該定期檢查高效液相色譜各個部件的狀況，做好相關的維護措施。

4總結

高效液相色譜儀器在醫(yī)藥院校的教學和科研中使用率和利用率很高，本文通過儀器的制度化管理、操作規(guī)范化管理和維護管理，使其更好地服務于教學和科研，只有加強各方面的管理，提高使用率延長使用壽命[2]，才能更好地提高教學質量和科研水平，為學校和社會培養(yǎng)創(chuàng)新型技能型高素質醫(yī)藥人才，提高畢業(yè)生的就業(yè)競爭力。

參考文獻

[1]吳少敏，張雅芝，殷博昊.高效液相色譜的使用和維護[J].實驗室科學，2011，14（3）：183-186.

[2]周陸怡，李琴.高等院校高效液相色譜的管理與維護[J].廣州化工,2019，47(4)：149-150.

作者：何樹華 陳御珍 鄭明彬 陳銘祥 單位：廣東醫(yī)科大學