遙遠(yuǎn)的眼神精選(九篇)

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第1篇：遙遠(yuǎn)的眼神范文

一座橋梁，要有橋墩為之作柱，否則難以流通千車萬人；一枝紅玫瑰，要有根莖為之作柱，否則難以飄香于情人節(jié)；一座高樓，大家看（手指室內(nèi)三根大柱），同樣要有支柱，否則，難以拔地而起。而我們?nèi)?，具有社會屬性的人，其支柱是什么呢？是人的精神。魯迅說過，人是要有點(diǎn)精神的。在他的小說里，人是不能沒有靈魂的，一旦失去靈魂是要進(jìn)行“招魂”的?？梢?，一個(gè)人的精神是何等的重要。

與人交往，要有誠信精神，與人共事，要有協(xié)作精神；面對邪惡，要有斗爭的精神，面對失敗，要有東山再起的精神，面對我們的工作和我們的事業(yè)，我認(rèn)為首先要有敬業(yè)精神。說到這，我想談一下，我一個(gè)疑惑的最終答案。

以前從報(bào)紙、電視上，了解到中國有很多洋教堂，里面有外國的洋教徒。我當(dāng)時(shí)想，外國人信仰上帝，到中國干什么，不為政治目的，也不燒殺搶掠，而且對中國人還很友好。在座的各位，你們說為什么？去年冬天，在一本書上我找到了答案。這本書上說，這些洋教徒，也叫傳教士和牧師，他們來到中國的目的就是傳播宗教文化，傳播宗教文化是他們的工作，也是他們的使命。為了傳教，無論是中國最為邊遠(yuǎn)貧窮的廣西、貴州，還是非洲蒙昧的原始森林、南美洲的高山峻嶺，到處到有牧師的身影，他們前往幾乎與世隔絕的窮鄉(xiāng)僻壤、茹毛飲血的土著部落、衛(wèi)生條件極其惡劣的疫病許地區(qū)，他們一輩子在那里傳教，甚至老死在那里，不圖名不圖利，僅僅為了自己神圣的使命，而完全忘我的工作，直到離開人世的那一天。這不正是一種敬業(yè)精神嗎？可以說，當(dāng)今基督教在全球的蓬勃發(fā)展，與這種精神是密不可分的。同樣的，近年來，我國藥監(jiān)事業(yè)發(fā)展如此迅速，不正是全國藥監(jiān)人以敬業(yè)精神換來的嗎？

有的同志可能知道了我讀的那本書，就是由美國偉大的職業(yè)成功學(xué)家羅賓斯先生生前所著的一本名叫《敬業(yè)》的職業(yè)精神培訓(xùn)手冊。很幸運(yùn)，這本好書，我們市局機(jī)關(guān)人手一冊。截止去年，該書在全球銷售量已超過2億冊，受到了包括我國在內(nèi)的全世界著名的專家學(xué)者的一致認(rèn)可和高度贊譽(yù)，被美國《金融時(shí)代》雜志評為最佳暢銷書，之所以，該書有如此多的榮譽(yù)，我想最根本的原因就是，它所倡導(dǎo)的敬業(yè)精神是這個(gè)時(shí)代應(yīng)該持之以恒追求的精神。

古今中外，敬業(yè)被多少有志之士視為人生的左右銘，敬業(yè)也成就了多少偉業(yè)和功名?！盀槿诵云У⒓丫洌Z不驚人死不休?！斌w現(xiàn)是一代詩圣杜甫對寫作的敬業(yè)精神，做幾千次試驗(yàn)，甚至拿自己的胡須做試驗(yàn)品，體現(xiàn)的是一明家愛迪生對發(fā)明事業(yè)的敬業(yè)精神，那么，在我們的食品藥品監(jiān)管崗位上，如何來體現(xiàn)敬業(yè)精神呢？

我認(rèn)為，敬業(yè)首先要對工作充滿熱情，這是敬業(yè)前提。羅賓斯說，我們欣賞那些對工作充滿滿腔熱情的人，欣賞那些將工作中奮斗、拼搏看作人生的快樂和榮耀的人。如果你不能使自己全身心地投入到工作中去，你將可能淪為平庸之輩。沒有熱情，軍隊(duì)就不能打勝仗，公務(wù)員不能處理隨時(shí)發(fā)生的公共事務(wù)，商人不能到全世界做生意。羅賓斯甚至說，“成功與其說是取決于人的才能，不如說取決于人的熱情”。所以，唯有熱情，方可激發(fā)您的潛能，驅(qū)使你兢兢業(yè)業(yè)地去完成工作任務(wù)。

其次，敬業(yè)要追求完美，這是敬業(yè)的關(guān)鍵。完美雖然是一種理想主義狀態(tài)，但正是這種理想，會點(diǎn)燃你前進(jìn)道路上的燈塔。美國社會學(xué)家迪耿斯說，你有億萬財(cái)富的夢想，一個(gè)百萬富翁就會等待你。試想，沒有追求完美的理想，XX的食品安全工作怎能不斷的為全省創(chuàng)造試點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)，市局又怎能獲得全省先進(jìn)單位的稱號；沒有追求完美的理想，我們的藥品執(zhí)法工作怎能連年實(shí)現(xiàn)“零差錯(cuò)”；另外，諸如，三型機(jī)關(guān)建設(shè)、三G認(rèn)證、兩網(wǎng)建設(shè)、財(cái)務(wù)、黨務(wù)、人事等等工作又怎能在全省前列占有一席之位。追求完美，就是要做好每一件點(diǎn)滴之事，是所謂細(xì)節(jié)決定與成敗。我們每個(gè)人如果都發(fā)揚(yáng)敬業(yè)精神，讓每個(gè)崗位上的工作都閃亮發(fā)光，那么，這些光點(diǎn)聚集起來，XX的食品藥品監(jiān)管工作不就會在全省乃至全國熠熠生輝了嗎？

第2篇：遙遠(yuǎn)的眼神范文

[關(guān)鍵詞]公立醫(yī)院；內(nèi)部審計(jì)；必要性

[DOI]10.13939/ki.zgsc.2017.15.356

公立醫(yī)院是我國事業(yè)單位的主要組成部分，承擔(dān)著為人民群眾提供醫(yī)療服務(wù)的社會責(zé)任。伴隨我國市場經(jīng)濟(jì)的逐步深入發(fā)展，醫(yī)院行業(yè)逐步引入市場機(jī)制，私立民營醫(yī)院逐漸形成規(guī)模，發(fā)展較為迅猛，占據(jù)了一定的市場份額。一方面，緩解了公立醫(yī)院的接診壓力；另一方面，也加大了公立t院持續(xù)生存發(fā)展的壓力。因此，公立醫(yī)院需要加強(qiáng)內(nèi)部管理，發(fā)現(xiàn)問題，改進(jìn)提升。內(nèi)部審計(jì)是公立醫(yī)院實(shí)施監(jiān)督的重要工具，將為提升管理與創(chuàng)造效益發(fā)揮重要的推動(dòng)作用。

1 公立醫(yī)院面臨的宏觀改革與行業(yè)發(fā)展背景

1.1 公立醫(yī)院財(cái)務(wù)管理要求逐步提高

我國在2011年修訂下發(fā)了醫(yī)院會計(jì)制度，對公立醫(yī)院成本核算、財(cái)務(wù)報(bào)告、科目體系建設(shè)等做出了明確的規(guī)定與改進(jìn)，為醫(yī)院提高會計(jì)核算質(zhì)量提供了指引與依據(jù)。新會計(jì)制度實(shí)施5年來，公立醫(yī)院的財(cái)務(wù)核算基礎(chǔ)有了較大的改善，為公立醫(yī)院實(shí)施后續(xù)監(jiān)督建立了較為完善的數(shù)據(jù)體系。近年來，國家亦對公立醫(yī)院建立全面預(yù)算管理提出新的要求，旨在通過全面預(yù)算，提高公立醫(yī)院落實(shí)國家宏觀管理規(guī)劃的執(zhí)行力，使得醫(yī)院的各項(xiàng)工作處于可控狀態(tài)。

1.2 公立醫(yī)院綜合改革進(jìn)程逐步推進(jìn)

2015年，國家對公立醫(yī)院的綜合改革問題提升到正式日程，發(fā)文明確在城市公立醫(yī)院開始綜合改革試點(diǎn)工作。綜合改革賦予公立醫(yī)院獨(dú)立經(jīng)營權(quán)，將所有權(quán)與經(jīng)營權(quán)分離，通過完善治理結(jié)構(gòu)、制度體系，建立較為完善的責(zé)權(quán)利體系，為公立醫(yī)院的發(fā)展創(chuàng)造更為廣闊的空間。同時(shí)，也對公立醫(yī)院的管理提升提出了更高的要求。一旦醫(yī)院無法勝任自我管理提升，將被市場所淘汰，面臨的風(fēng)險(xiǎn)亦是較大的。

1.3 公立醫(yī)院行業(yè)競爭發(fā)展日益激烈

醫(yī)療體制改革是我國一直在推進(jìn)落實(shí)的重要工作。醫(yī)院行業(yè)的發(fā)展一直不是風(fēng)平浪靜的，我國自20世紀(jì)80年代即出現(xiàn)了民營醫(yī)院，但市場份額相對較小。21世紀(jì)以來，民營醫(yī)院大規(guī)模發(fā)展，國家逐步放寬民營醫(yī)院的準(zhǔn)入要求，民營醫(yī)院獲得了發(fā)展政策的紅利。一方面，改善了人民群眾的醫(yī)療服務(wù)水平，使得老百姓病有所醫(yī)。另一方面，也使得醫(yī)院行業(yè)逐步向市場化發(fā)展，公立醫(yī)院面臨著較為嚴(yán)峻的競爭態(tài)勢。

2 公立醫(yī)院內(nèi)部審計(jì)方面存在的主要問題

2.1 內(nèi)部審計(jì)組織機(jī)制尚不健全

受原有公立醫(yī)院體制影響，公立醫(yī)院內(nèi)部審計(jì)基礎(chǔ)較為薄弱。一是醫(yī)院領(lǐng)導(dǎo)多為醫(yī)療衛(wèi)生專業(yè)人才，對管理及財(cái)務(wù)了解甚少，缺乏內(nèi)部審計(jì)管理意識，難以在管理方面取得實(shí)效。二是醫(yī)院內(nèi)部往往不設(shè)立審計(jì)部門，審計(jì)職能部門的缺失，直接使得公立醫(yī)院對審計(jì)缺乏概念，審計(jì)工作難以找到落腳之點(diǎn)。三是審計(jì)人員嚴(yán)重不足，有的公立醫(yī)院沒有審計(jì)人員，有的公立醫(yī)院設(shè)立了審計(jì)崗位，但由于對審計(jì)工作缺乏管理機(jī)制，使得審計(jì)人員素質(zhì)停滯不前，較難發(fā)揮實(shí)際作用。

2.2 內(nèi)部審計(jì)制度流程尚不完善

內(nèi)部審計(jì)是一項(xiàng)對公立醫(yī)院實(shí)施全面審計(jì)管理的工作，但公立醫(yī)院在內(nèi)部審計(jì)制度流程方面往往存在很多需要完善的地方。一是內(nèi)部審計(jì)制度不完善，對內(nèi)部審計(jì)缺乏制度性的約束，使得內(nèi)部審計(jì)要么沒有，要么不知如何進(jìn)行，程序缺失。二是內(nèi)部審計(jì)范圍過窄，將內(nèi)部審計(jì)歸為財(cái)務(wù)審計(jì)，僅對財(cái)務(wù)核算進(jìn)行審計(jì)，而缺乏對公立醫(yī)院具體工作的專項(xiàng)審計(jì)，使得審計(jì)難以找到問題根源。三是審計(jì)方法單一，內(nèi)部審計(jì)是一項(xiàng)較為專業(yè)的工作，其方法亦在發(fā)展中積累了很多種，而部分公立醫(yī)院滿足于查查賬、聊聊天，對審計(jì)內(nèi)容缺乏提前研究，缺乏審計(jì)方法的勾稽使用，使得內(nèi)部審計(jì)效果不佳。

2.3 內(nèi)部審計(jì)評價(jià)提升需持續(xù)加強(qiáng)

內(nèi)部審計(jì)不僅是一項(xiàng)復(fù)雜的工作，更是一項(xiàng)需要不斷完善的工作。唯有建立審計(jì)評價(jià)機(jī)制，才能在內(nèi)部審計(jì)的改進(jìn)完善中，取得突破，不斷發(fā)揮重要作用。但在公立醫(yī)院內(nèi)部審計(jì)工作進(jìn)行中，一是對內(nèi)部審計(jì)工作沒有評價(jià)，長年安于現(xiàn)狀，使得審計(jì)工作權(quán)威性下降，各部門對審計(jì)的重視程度降低。二是對內(nèi)部審計(jì)的評價(jià)方法單一，不知如何評價(jià)，難以找到審計(jì)提升的方向。三是內(nèi)部審計(jì)評價(jià)缺乏機(jī)制建設(shè)，僅僅將內(nèi)部審計(jì)作為應(yīng)對國家政策的一項(xiàng)任務(wù)，而沒有發(fā)揮其應(yīng)有作用，促進(jìn)公立醫(yī)院的持續(xù)發(fā)展。

3 公立醫(yī)院加強(qiáng)內(nèi)部審計(jì)的重要意義

3.1 有利于持續(xù)提高公立醫(yī)院的抗風(fēng)險(xiǎn)能力

內(nèi)部審計(jì)是對公立醫(yī)院經(jīng)濟(jì)活動(dòng)進(jìn)行全面監(jiān)督的有效措施，可以，通過事中與事后分別建立審計(jì)機(jī)制，發(fā)現(xiàn)公立醫(yī)院經(jīng)營管理過程中存在的主要風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)及相關(guān)問題，通過披露問題，制定改進(jìn)措施，將公立醫(yī)院的風(fēng)險(xiǎn)管控能力逐步提升，發(fā)揮有效的改進(jìn)作用，促進(jìn)公立醫(yī)院風(fēng)險(xiǎn)抵御與應(yīng)對水平的改善。

3.2 有利于適應(yīng)國家日益提升的管理改革要求

伴隨我國新常態(tài)發(fā)展階段的到來，經(jīng)濟(jì)增速呈中高速增長，為保障國家持續(xù)發(fā)展，我國經(jīng)濟(jì)主要工作提出供給側(cè)改革的重要選擇。對于公立醫(yī)院管理，國家亦下發(fā)了多項(xiàng)政策與制度，促進(jìn)公立醫(yī)院的供給側(cè)改革。國家政策制度的執(zhí)行方面是否到位，是否取得了實(shí)效，這些都需要內(nèi)部審計(jì)發(fā)揮作用，通過內(nèi)部審計(jì)發(fā)現(xiàn)沒有執(zhí)行到位的地方，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生實(shí)效的多少，將其匯總總結(jié)，使得公立醫(yī)院對國家政策的貫徹落實(shí)做到心中有數(shù)，并能持續(xù)改進(jìn)。

3.3 有利于促進(jìn)公立醫(yī)院核心競爭優(yōu)勢的形成

公立醫(yī)院作為事業(yè)單位，在長期傳統(tǒng)管理體制的影響下，形成了一套大家習(xí)以為常的運(yùn)作體系。在我國經(jīng)濟(jì)乃至國際經(jīng)濟(jì)發(fā)生深刻變革的今天，公立醫(yī)院應(yīng)認(rèn)識到內(nèi)外部面臨的巨大市場競爭壓力，感受到發(fā)展的緊迫感與危機(jī)感，改進(jìn)管理，實(shí)現(xiàn)變革，內(nèi)部審計(jì)即是公立醫(yī)院實(shí)施發(fā)展變革的主要武器，通過完善內(nèi)部審計(jì)，將有效促進(jìn)公立醫(yī)院持續(xù)改進(jìn)，逐步形成自身的核心競爭優(yōu)勢。

4 加強(qiáng)公立醫(yī)院內(nèi)部審計(jì)的主要措施

4.1 加強(qiáng)組織機(jī)制保障

一是加強(qiáng)公立醫(yī)院領(lǐng)導(dǎo)班子配置，增加經(jīng)濟(jì)管理人才進(jìn)入班子，分管內(nèi)部審計(jì)工作，在醫(yī)院治理架構(gòu)設(shè)計(jì)中，亦可在公立醫(yī)院最頂層設(shè)立內(nèi)部審計(jì)委員會，加強(qiáng)內(nèi)審工作領(lǐng)導(dǎo)。二是建立審計(jì)部門，增加人員配置，明確內(nèi)部審計(jì)部門職責(zé)與各崗位要求。三是持續(xù)提升內(nèi)部審計(jì)部門人員的專業(yè)素質(zhì)，加強(qiáng)對公立醫(yī)院業(yè)務(wù)學(xué)習(xí)，將審計(jì)方法與醫(yī)院業(yè)務(wù)有效結(jié)合在一起。

4.2 加強(qiáng)制度流程建設(shè)

一是建立公立醫(yī)院內(nèi)部審計(jì)制度，明確被審計(jì)部門與審計(jì)部門在內(nèi)部審計(jì)工作中的具體職責(zé)，建立較為完善的內(nèi)部審計(jì)流程，使其具有可操作性。二是每年建立內(nèi)部審計(jì)計(jì)劃，將公立醫(yī)院全部業(yè)務(wù)事項(xiàng)納入內(nèi)部審計(jì)范疇，根據(jù)逐年內(nèi)部審計(jì)結(jié)果，區(qū)分不同事項(xiàng)的發(fā)展情況，評估審計(jì)事項(xiàng)存在的風(fēng)險(xiǎn)，建立重點(diǎn)審計(jì)與非重點(diǎn)審計(jì)事項(xiàng)。三是規(guī)范內(nèi)部審計(jì)報(bào)告檔案管理，由醫(yī)院檔案管理部門對內(nèi)部審計(jì)報(bào)告歸檔管理，實(shí)現(xiàn)審計(jì)留痕。

第3篇：遙遠(yuǎn)的眼神范文

關(guān)鍵詞：醫(yī)院感染；病原菌；耐藥性1資料與方法

1.1一般資料2011年1月~2013年12月腦神經(jīng)科所有住院患者，共4807例。

1.2醫(yī)院感染診斷標(biāo)準(zhǔn) 根據(jù)衛(wèi)生部衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2001]2號《醫(yī)院感染診斷標(biāo)準(zhǔn)》確診醫(yī)院感染病例。

1.3標(biāo)本采集 按規(guī)范常規(guī)采集住院患者血液、尿、便、痰、腦脊液、分泌物等標(biāo)本，進(jìn)行病原學(xué)檢查和藥敏試驗(yàn)，并去除重復(fù)分離株[1]。

1.4細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定 細(xì)菌分離培養(yǎng)按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第3版）》進(jìn)行，所有菌株均經(jīng)過法國生物梅里埃（Bio Merieux）公司的ATB EXPRESSION鑒定儀和API試驗(yàn)條鑒定到種。

1.5藥敏試驗(yàn) 采用CLSI推薦的Kirby-Bauer紙片擴(kuò)散法測定菌株對抗菌藥物的敏感性。按CLSI2013（M100-S23）判斷結(jié)果。以金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC27853為質(zhì)控菌。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 所有數(shù)據(jù)用WHONET5.6軟件及SPSS15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2結(jié)果

2.1臨床資料分析 2011年1月~2013年12月腦神經(jīng)科4807例住院患者中發(fā)生醫(yī)院感染263例，380例次；其中男145例，女118例，年齡12~94歲，平均年齡69.1歲，平均住院天數(shù)為49.3d。醫(yī)院感染發(fā)病率5.47%（263/4807），醫(yī)院感染例次率為7.91%(380/4807)。醫(yī)院感染部位以下呼吸道最多，其次為泌尿道和上呼吸道。見表1。

2.2 病原菌分布 發(fā)生醫(yī)院感染的263例患者中149例進(jìn)行了病原學(xué)檢查，送檢率為56.7%；檢出病原菌296株，其中G-桿菌197株（66.55%），G+球菌66株（22.30%），真菌33株（11.15%）。見表2。

2.3病原菌耐藥率 常見病原菌對抗菌藥物的耐藥率見表3、表4。

3討論

本研究結(jié)果顯示，腦神經(jīng)科住院患者醫(yī)院感染發(fā)病率為5.47%，例次感染率為7.91%。發(fā)生醫(yī)院感染的部位以下呼吸道最高，其次為泌尿道和上呼吸道，與國內(nèi)2009年CHINET監(jiān)測結(jié)果基本一致[2]。其原因：①由于腦神經(jīng)科多為危重患者，咳嗽和吞咽反射能力喪失，氣道分泌物排出困難；②氣管切開或氣管插管破壞了呼吸道屏障；③機(jī)械通氣時(shí)間過長；④老年患者居多，住院時(shí)間較長。機(jī)械通氣、泌尿道插管及深靜脈置管等侵入性操作特別是機(jī)械通氣是腦神經(jīng)科醫(yī)院感染發(fā)生率較高的主要原因[3]。

本研究的分離菌株中，G-桿菌占66.55%，G+球菌占22.30%，真菌占11.15%，與目前國內(nèi)外細(xì)菌流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果一致[4，5]。研究結(jié)果提示，對于我院腦神經(jīng)科一些危重感染患者以及難治性感染患者，可采用亞胺培南、美羅培南等碳青霉烯類抗菌藥物和哌拉西林/他唑巴坦等加酶抑制劑的復(fù)合抗菌藥物經(jīng)驗(yàn)治療G-桿菌感染，用萬古霉素等糖肽類抗菌藥物治療G+球菌感染。

β內(nèi)酰胺類抗菌藥物滅活酶的出現(xiàn)對臨床感染治療帶來了極大的威脅，特別是G-桿菌中流行的ESBLs、質(zhì)粒AmpC酶，已成為目前亟待解決的問題[6]。因此應(yīng)將特殊耐藥菌的監(jiān)控作為醫(yī)院感染控制的重點(diǎn)[7]。

目前我院雖未發(fā)現(xiàn)對亞胺培南、美羅培南耐藥的G-桿菌和對萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺耐藥的金黃色葡萄球菌，但仍然不可掉以輕心，應(yīng)加強(qiáng)對耐藥菌的監(jiān)測和控制。臨床醫(yī)師在診療過程中，也一定要慎重使用這些藥物，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果采用有效地抗菌藥物進(jìn)行治療。

參考文獻(xiàn)：

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第4篇：遙遠(yuǎn)的眼神范文

Yunpi prescription reduces excitability of VMN neurons in anorexic rats

【Abstract】 AIM: To explore the role of Yunpi， a traditional Chinese prescription， in reducing the sensitivity of the VMN neurons to the peripheral afferent signal in anorexia rats．METHODS: The anorexic rat model was established by feeding rats with specially prepared forage for 1 week followed by daily intragastric administration of liquid extract of Yunpi prescription for 3 weeks. The extracellular recording from rat VMN was then conducted to characterize the responses of stimulating gastric vagal nerve and intravenous injection of sulfated cholocystokinin octapeptide (CCK8) in the control， model and Yunpi treated groups. RESULTS: The duration of the VMN neuronal excitation to the gastric vagal nerve stimulation in model group was significantly longer than that in control group (P

【Keywords】 Yunpi complex prescription; anorexia; ventromedial hypothalamic nucleus; stomach; vagus nerve; cholecystokinin

【摘要】 目的： 證實(shí)運(yùn)脾中藥復(fù)方兒寶顆粒降低厭食大鼠下丘腦腹內(nèi)側(cè)核（VMN）神經(jīng)元對外周傳入信號的敏感性. 方法： 用特制飼料喂養(yǎng)大鼠1 wk制備厭食模型，再用運(yùn)脾復(fù)方灌胃治療3 wk，然后用細(xì)胞外記錄法，記錄大鼠VMN神經(jīng)元的自發(fā)放電，觀察其對電刺激胃迷走神經(jīng)、靜脈注射八肽膽囊收縮素（CCK8）的反應(yīng)，比較對照組、模型組和治療組3組間的差異. 結(jié)果： 模型組大鼠VMN神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)刺激的興奮性反應(yīng)時(shí)程延長（P

【關(guān)鍵詞】 運(yùn)脾復(fù)方；厭食；下丘腦腹內(nèi)側(cè)核；胃；迷走神經(jīng)；膽囊收縮素

0引言

近20年的臨床實(shí)踐證實(shí)運(yùn)脾復(fù)方兒寶顆粒治療嬰幼兒厭食有可靠療效［1］. 其機(jī)制研究表明，該復(fù)方能在外周水平上調(diào)節(jié)與攝食控制相關(guān)的多種因素［2］，如促進(jìn)胃腸道蠕動(dòng)、增強(qiáng)消化酶的活性、促進(jìn)小腸吸收功能、調(diào)節(jié)胃腸道激素水平等，而我們近年來的研究結(jié)果表明，兒寶顆粒還能在中樞水平上影響攝食行為的控制［3-4］. 我們通過觀察厭食大鼠下丘腦腹內(nèi)側(cè)核神經(jīng)元（ventromedial hypothalamic nuclear， VMN）對胃迷走神經(jīng)刺激和靜脈注射CCK的反應(yīng)，進(jìn)一步分析了運(yùn)脾復(fù)方對VMN神經(jīng)元興奮性的影響.

1材料和方法

1.1材料

日齡35～40d的SD大鼠45只，體質(zhì)量（60±10）g（第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供），隨機(jī)分為對照組、模型組和治療組，每組15只. 所有動(dòng)物均單籠飼養(yǎng)，自由進(jìn)食水.

1.2方法

1.2.1模型制備和藥物治療按文獻(xiàn)方法制做厭食大鼠模型［5］. 即用正常鼠飼料喂養(yǎng)對照組大鼠，用特制飼料喂養(yǎng)模型組和治療組大鼠，每日09:00記錄每只大鼠的日攝食量和體質(zhì)量. 1 wk后特制飼料喂養(yǎng)的大鼠日攝食量下降30%以上，體質(zhì)量下降15%以上，表明模型制備成功. 從實(shí)驗(yàn)第8日開始，治療組大鼠用運(yùn)脾復(fù)方兒寶顆粒浸膏（第四軍醫(yī)大學(xué)科研藥廠提供，藥物組成蒼術(shù)、陳皮、山

楂、白芍，每毫升含生藥1.5 g）灌胃，1次/d，劑量為37.6 g/kg(為臨床2倍等效量)，同時(shí)給予對照組和模型組大鼠等容積生理鹽水灌胃，連續(xù)3 wk.

1.3胃迷走神經(jīng)刺激和VMN神經(jīng)元自發(fā)放電的記錄實(shí)驗(yàn)第28日晚禁食，次日用細(xì)胞外記錄法觀察大鼠VMN神經(jīng)元對刺激胃迷走神經(jīng)和靜脈注射CCK8的反應(yīng). 手術(shù)步驟：經(jīng)大鼠腹腔注射烏拉坦（0.8 g/kg）和α氯醛糖（65 mg/kg）混合麻醉劑，麻醉后施行頸外靜脈插管術(shù)，以備追加麻醉劑、注射CCK8（10 g/kg，美國Sigma公司產(chǎn)品）和生理鹽水. 沿左肋弓切開腹腔，分離胃迷走神經(jīng)前干與后干，掛于鉤狀雙極刺激電極以備刺激. 縫合腹腔，用電熱板維持動(dòng)物體溫于(37.0±0.5)℃. 然后，將動(dòng)物固定于腦立體定位儀上，施第4腦室腦脊液引流. 依據(jù)Paxinos和Waston鼠腦立體定位圖譜［6］，于VMN（A -2.3~-2.8 mm， L 0.5~1 mm， H 8~9 mm）上方開顱（直徑約1.5 mm）.

以負(fù)相矩形雙脈沖（100~500 μA， 0.5 ms，100 Hz）刺激胃迷走神經(jīng)干，用充以含10 g/L滂胺天藍(lán)的0.5mol/L醋酸鈉溶液的玻璃微電極（直流阻抗5~10 MΩ）細(xì)胞外記錄VMN神經(jīng)元單位放電. 神經(jīng)元的放電信號經(jīng)放大器放大后輸入窗口甄別器，觸發(fā)窗口甄別器輸出的標(biāo)準(zhǔn)矩形脈沖（5 V， 1.0 ms），通過模/數(shù)轉(zhuǎn)換器輸入計(jì)算機(jī)進(jìn)行實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)分析. 由計(jì)算機(jī)采集的神經(jīng)元放電信號自動(dòng)生成刺激前后時(shí)間直方圖，分析細(xì)胞對刺激胃迷走神經(jīng)（采樣間隔2 ms，每次采樣800點(diǎn)，重復(fù)采樣100次）和靜脈注射CCK（采樣間隔1 s，每次采樣900點(diǎn)，采樣1次）的反應(yīng). 比較刺激后反應(yīng)時(shí)間段內(nèi)（刺激后窗口）神經(jīng)元的放電頻率與刺激前相同時(shí)間段內(nèi)（刺激前窗口）神經(jīng)元的基礎(chǔ)放電頻率，如果刺激后窗口內(nèi)的放電頻率降低到刺激前窗口內(nèi)基礎(chǔ)放電頻率的30%以下，或增加到200%以上，則認(rèn)為該細(xì)胞對刺激產(chǎn)生了抑制或興奮反應(yīng).

1.4組織學(xué)定位每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，用陰極電流（20 μA， 10 min）將玻璃微電極內(nèi)的滂胺天藍(lán)染料微量滲析到電極尖端的記錄點(diǎn)，然后取腦固定. 1 wk后用冰凍切片機(jī)制備80 mm厚的腦切片，檢查記錄點(diǎn)位置（圖1），凡實(shí)際記錄點(diǎn)偏離VMN者，所獲數(shù)據(jù)棄之不用. SD大鼠前囟后

2.56 mm橫切面，上方箭頭指示電極尾部痕跡，下方箭頭指示電極記錄位置處于VMN區(qū)域.

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理: 計(jì)量資料用x±s描述，計(jì)數(shù)資料用構(gòu)成比描述. 用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理. 圖2資料用重復(fù)測量單因素方差分析，計(jì)數(shù)資料的組間比較用χ2檢驗(yàn)，P

2結(jié)果

2.13組大鼠日攝食量在實(shí)驗(yàn)過程中（28 d），3組大鼠日平均攝食量變化趨勢不同（P

2.23組大鼠VMN神經(jīng)元對刺激胃迷走神經(jīng)的反應(yīng)3組大鼠共記錄328個(gè)VMN神經(jīng)元，其中對照組106個(gè)，模型組110個(gè)，治療組112個(gè). 胃迷走神經(jīng)刺激引起的VMN神經(jīng)元反應(yīng)類型有興奮性和抑制性反應(yīng)兩種，即抑制性反應(yīng)（圖3A）和興奮性反應(yīng)（圖3B），但以興奮性反應(yīng)為主. 對照組、模型組和治療組的VMN神經(jīng)元對刺激胃迷走神經(jīng)的反應(yīng)性無顯著性差異（P>0.05，表1）. 3組大鼠抑制性反應(yīng)的VMN神經(jīng)元反應(yīng)潛伏期、反應(yīng)時(shí)程和刺激強(qiáng)度亦無顯著性差異（表2）. 但是，模型組VMN神經(jīng)元的興奮性反應(yīng)時(shí)程明顯高于對照組（ P

2.23組大鼠VMN神經(jīng)元對靜脈注射CCK的反應(yīng)我們對自發(fā)放電比較穩(wěn)定的VMN神經(jīng)元（包括對胃迷走神經(jīng)刺激有反應(yīng)和沒有反應(yīng)的細(xì)胞）做了CCK敏感性測試，如果被檢測細(xì)胞對靜脈注射CCK呈現(xiàn)出特異且顯著的興奮性反應(yīng)，而對生理鹽水不出現(xiàn)反應(yīng)，則認(rèn)為該細(xì)胞為CCK敏感神經(jīng)元. 在對胃迷走神經(jīng)刺激無反應(yīng)的VMN細(xì)胞中，各組間CCK敏感神經(jīng)元比例無顯著性差異（表3）. 而在對胃迷走神經(jīng)刺激有反應(yīng)的VMN神經(jīng)元中，模型組CCK敏感神經(jīng)元明顯高于對照組(P

我們在7只大鼠上（正常組2個(gè)，模型組2個(gè)，治療組3個(gè)）發(fā)現(xiàn)切斷胃迷走神經(jīng)顯著衰減靜脈注射CCK引起的VMN神經(jīng)元興奮性反應(yīng)（圖2CD）.

2.4組織學(xué)經(jīng)組織學(xué)檢查，對胃迷走神經(jīng)刺激有反應(yīng)的神經(jīng)元以及對靜脈注射CCK敏感的神經(jīng)元記錄位點(diǎn)散在分布于VMN中.

3討論

運(yùn)脾復(fù)方兒寶顆粒選用輕清之劑調(diào)和脾胃，既不用克削通導(dǎo)之藥，也不用呆補(bǔ)滋膩之品，關(guān)鍵在“調(diào)和”，其促進(jìn)食欲的作用機(jī)制應(yīng)是協(xié)調(diào)機(jī)體各系統(tǒng)間的功能平衡，而不僅僅是對外周或中樞個(gè)別因素的孤立影響. 本研究著眼于攝食中樞神經(jīng)元活動(dòng)與外周攝食因素間的信息聯(lián)系，觀察了厭食大鼠VMN神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)刺激和血中CCK濃度這兩個(gè)重要的外周抑食因素的反應(yīng)，從而探討運(yùn)脾法促進(jìn)食欲的整體作用機(jī)制.

VMN是攝食控制環(huán)路中的一個(gè)重要核團(tuán)，因其顯著的抑食作用被稱為飽中樞［7］. 胃腸道迷走神經(jīng)是外周攝食信息傳遞入腦的主要通路. 胃迷走神經(jīng)傳入纖維可將攝食負(fù)反饋信號傳入VMN，VMN再通過胃迷走神經(jīng)傳出纖維抑制胃腸運(yùn)動(dòng)，終止攝食行為［8-9］.

本研究發(fā)現(xiàn)模型組大鼠VMN神經(jīng)元興奮性反應(yīng)的反應(yīng)時(shí)程顯著大于對照組和治療組，而所需刺激強(qiáng)度卻顯著低于后兩者. 這一結(jié)果表明模型組大鼠VMN神經(jīng)元更容易被胃迷走神經(jīng)傳入信號所激活，提示其接受到的攝食負(fù)反饋信號比另外兩組強(qiáng)烈. 這可能是模型組大鼠攝食量下降的主要原因，同時(shí)也提示運(yùn)脾治療有效地減弱了模型大鼠VMN神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)刺激的興奮性反應(yīng)，使神經(jīng)元產(chǎn)生興奮性反應(yīng)的閾值增高，反應(yīng)時(shí)程縮短.

CCK是一種生理性飽因子，在進(jìn)食過程中由小腸內(nèi)分泌細(xì)胞釋放入血，其血濃度在開始進(jìn)食后20 min內(nèi)達(dá)高峰，產(chǎn)生顯著的抑食作用［8］. 本研究顯示靜脈注射CCK能激活部分VMN神經(jīng)元，大部分CCK敏感神經(jīng)元也對胃迷走神經(jīng)刺激敏感，而切斷胃迷走神經(jīng)能顯著減弱CCK引起的VMN神經(jīng)元反應(yīng). 這一結(jié)果提示CCK血濃度升高產(chǎn)生的飽效應(yīng)大部分是由胃迷走神經(jīng)介導(dǎo)的. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示模型組大鼠對胃迷走神經(jīng)刺激敏感的VMN神經(jīng)元中的CCK敏感細(xì)胞數(shù)明顯增多，提示厭食大鼠胃迷走神經(jīng)介導(dǎo)的CCK飽信號較對照組和治療組強(qiáng)烈.

雖然VMN神經(jīng)元接受胃迷走神經(jīng)傳入信息后主要通過其興奮性反應(yīng)發(fā)出飽信號，但本研究顯示仍有約20%VMN神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)傳入信號表現(xiàn)出抑制性反應(yīng)，這些抑制性反應(yīng)的神經(jīng)元與興奮性反應(yīng)神經(jīng)元的反應(yīng)潛伏期、反應(yīng)時(shí)程和刺激強(qiáng)度均無顯著性差異. 我們推測，這一小部分抑制性反應(yīng)的神經(jīng)元，可能對興奮性神經(jīng)元的活動(dòng)起拮抗作用，以便VMN能發(fā)出適度的飽信號，不致于過快和過分強(qiáng)烈地抑制進(jìn)食. 但在模型組，這種平衡嚴(yán)重失調(diào)：模型大鼠VMN神經(jīng)元興奮性反應(yīng)的時(shí)程顯著高于抑制性反應(yīng)的時(shí)程，而刺激強(qiáng)度顯著低于后者. 這一現(xiàn)象同樣提示厭食大鼠VMN發(fā)出的飽信號比正常大鼠強(qiáng)烈，而運(yùn)脾治療可能通過降低厭食大鼠VMN神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)刺激的興奮性反應(yīng)，從而協(xié)調(diào)VMN的整體活動(dòng)，發(fā)出適度的飽信號.

我們研究結(jié)果表明，運(yùn)脾復(fù)方兒寶顆粒通過降低厭食大鼠VMN神經(jīng)元對胃迷走神經(jīng)傳入信息的敏感性，抑制厭食大鼠胃迷走神經(jīng)傳入信息對外周CCK飽信號的介導(dǎo)，同時(shí)也協(xié)調(diào)了VMN興奮性神經(jīng)元和抑制性神經(jīng)元的活動(dòng)，這種直接針對機(jī)體自身調(diào)節(jié)規(guī)律的研究，可能更有利于揭示中醫(yī)藥療效的整體機(jī)制.

參考文獻(xiàn)

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第5篇：遙遠(yuǎn)的眼神范文

［關(guān)鍵詞］ 青光眼；鞏膜咬切術(shù)；療效觀察

Forward of Glaucoma Deep?seated Sclera Resecton's Size Curative Effect Clinic Be Observed

Abstract:The late result of subscleral sclerectomy of 130 eyes(100 cases) was studied．As the sclerectomy of larger size(1.5 mm × 1.5 mm)was compared with that of smaller size(1.5 mm×1.5 mm)，the two groups being strictly matched in stratum，the 1.5×3.0 group had higher success rate (96.2％vs 85.5％，P＜0.05)，more functioning filtration blebs(91.7％vs68.6％,P<0.01)，and less eyes with visual acuity reduced after operation (21.7%vs48.1%,P＜0.05).There was no statistically significant difference in the incidence of complications between these two groups.Accordingly 1.5 mm ×3.0 mm was recommended as the size of subscleral sclerelfctomy instead of 1.5 mm ×1.5 mm,so as to improve the success rate.

Key words:Glaucoma ;Sclera resecton;Curative effect

目前鞏膜咬切器普遍應(yīng)用到臨床，但咬切孔的大小影響臨床療效觀察很少報(bào)道。因此我們對1992年5月至2001年5月青光眼鞏膜深層咬切術(shù)的住院患者進(jìn)行隨診，對不同咬切孔的遠(yuǎn)期效果進(jìn)行分析比較，報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 原發(fā)性青光眼患者共100例130只眼，其中咬切孔1個(gè)大小為1.5 mm×1.5 mm者50例70眼，咬切2孔即孔大1.5 mm ×3 mm者50例60眼，見表1。

表1 不同大小的咬切孔結(jié)果比較(略)

1.2 方法 結(jié)膜瓣以穹隆部為基底，板層鞏膜瓣5 mm×5 mm,用鞏膜咬切器咬除深層角鞏膜緣組織1次或平行咬切2次使切口在與角膜緣平行的方向上長達(dá)1.5 mm或3 mm作周邊虹膜切除，鞏膜瓣用10／0尼龍線間斷縫合2針，結(jié)膜瓣帶淺層鞏膜固定2針，完成手術(shù)時(shí)球結(jié)膜下注射慶大霉素2萬 U及地塞米松2 mg對比的兩組除咬切孔大小不等以外其余手術(shù)操作相同。隨診時(shí)檢查：視力、眼壓、杯盤比、濾過泡及晶體、濾過泡參考Kronfeld分型［1］，以明顯隆起、壁薄、貧血為Ⅰ型；輕度隆起壁略厚，輕度貧血為Ⅱ型；以毫無隆起及貧血為Ⅲ型；以隆起壁厚呈硬結(jié)狀，充滿血管者為Ⅳ型(包裹型)。Ⅰ型、Ⅱ型為有功能濾過泡，Ⅲ型、Ⅳ型缺乏功能。

2 結(jié)果

2.1 成功率 將兩組中加用藥物者(咬切1孔者6例8只眼；咬切2孔者5例7只眼)剔除不計(jì)，以不用藥眼壓<3.1 kPa(23 mmHg)(schiotz眼壓計(jì))為成功，咬切1孔者占85.48％,咬切2孔者96.23％,χ2=3.89,P<0.05,兩組差異有顯著性,見表2。

表2 兩組成功率對比(略)

2.2 平均眼壓 患者術(shù)前眼壓以2孔組稍高，隨診時(shí)眼壓以2孔組稍低。但統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，差異無顯著性(表3)。

表3 兩組術(shù)前與隨診時(shí)平均眼壓比較(略)

2.3 濾過泡 兩組Ⅰ型濾過泡的比例差異有顯著性(P<0.01)，功能性濾過泡(Ⅰ型、Ⅱ型2型合計(jì))所占比例在兩組中差異也有顯著性(P<0.01)(表4)。

表4 兩組遠(yuǎn)期濾過泡對比(略)

2.4 視力 術(shù)前視力>0.1者，提高或降低Ⅱ型以上者為增加或減退；<0.1者分為光感～手動(dòng)，指數(shù)～0.04，0.05級～0.13級，提高或降低1級者為增加或減退，否則為不變。咬切1孔組視力減退之眼數(shù)明顯多于咬切2孔組。(χ2檢驗(yàn)，P<0.01)(表5)。

表5 兩組遠(yuǎn)期視力對比(略)

2.5 眼底 130只眼中視杯盤比值>0.6×0.6，比術(shù)前擴(kuò)大0.2以上者1.5 mm×1.5 mm術(shù)式有14只眼(20.0％)，1.5 mm×3 mm術(shù)式有6只眼(9.4％)，其差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.6 并發(fā)癥 由表6可見咬切2孔者前房出血，Ⅰ度淺前房及眼壓偏低者稍多，晶體混濁咬切2孔稍少，但其差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表6 兩組并發(fā)癥對比(略)

3 討論

根據(jù)本文兩組病例遠(yuǎn)期隨訪結(jié)果對比，發(fā)現(xiàn)深層鞏膜咬切術(shù)咬切孔的大小對手術(shù)效果有明顯影響。咬切孔者1.5 mm×3 mm與1.5 mm×1.5 mm者相比較，其成功率明顯較高，與此相應(yīng)的Ⅰ型濾過泡及功能性濾過泡所占比率也明顯提高；因之在術(shù)后遠(yuǎn)期隨訪時(shí)視力退步者也較少；兩組平均眼壓差異無顯著性，咬切孔1.5 mm×3 mm者并未使低眼壓及淺前房明顯加多，這在理論上不難理解，因?yàn)橐话阈×呵谐g(shù)的造孔常為3 mm×2 mm或1 mm×4 mm，咬切2孔其缺損也并未超過小梁切除術(shù)；本文對比兩組的病種、年齡、隨訪時(shí)間、是否用藥等進(jìn)行了分層匹配，所以兩組的差別沒有其他因素的影響。綜上所述，作者認(rèn)為：深層鞏膜咬切術(shù)最好常規(guī)咬切2孔，以提高手術(shù)的成功率。

第6篇：遙遠(yuǎn)的眼神范文

【關(guān)鍵詞】 內(nèi)質(zhì)網(wǎng); 衣霉素; 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78; 凋亡促進(jìn)因子CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白; 小鼠

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（endoplasmic reticulum， ER）廣泛存在于真核細(xì)胞中，是蛋白質(zhì)合成、折疊、運(yùn)輸以及細(xì)胞內(nèi)鈣離子儲存的主要場所。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中鈣離子紊亂和未折疊蛋白質(zhì)蓄積可引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress， ERS），發(fā)生具有保護(hù)作用的未折疊蛋白反應(yīng)（unfolded protein response， UPR）。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激直接影響應(yīng)激細(xì)胞的轉(zhuǎn)歸，如修復(fù)、損傷或凋亡。神經(jīng)系統(tǒng)許多疾病與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)。最近的研究表明，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)的凋亡信號傳導(dǎo)途徑可能與阿爾茨海默病（Alzheimer disease， AD）的發(fā)病有關(guān)。本研究觀察滋補(bǔ)脾陰方藥（Zibu Piyin Recipe， ZBPYR）含藥血清對由N糖鏈抑制劑衣霉素（tunicamycin， Tm）引起的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響，以探討其神經(jīng)保護(hù)機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物 滋補(bǔ)脾陰方藥由清代吳澄《不居集》中資成湯加味而成，由紅參30 g，山藥15 g，茯苓15 g，白芍15 g，丹參12 g，白扁豆15 g，蓮肉20 g，石菖蒲10 g，遠(yuǎn)志10 g，檀香4.5 g，橘紅9 g，甘草9 g組成，均購自大連醫(yī)藥集團(tuán)藥材公司。中藥常規(guī)水煎，每毫升中藥液含生藥3.29 g，4 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 主要試劑和儀器 達(dá)爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基（Dulbecco's modified eagle's medium， DMEM)和胎牛血清，Gibco公司產(chǎn)品；胰蛋白酶和TRIReagent，Sigma公司產(chǎn)品；Tm，星形孢菌素（staurosporine， STS），日本W(wǎng)ako公司產(chǎn)品；細(xì)胞毒性檢測試劑盒，Roche公司產(chǎn)品；RNase OUT和Oligo (dt)，Invitrogen公司產(chǎn)品。二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱，Thermo Forma公司產(chǎn)品；臺式高速冷凍離心機(jī)，Sigma公司產(chǎn)品；UV754紫外分光光度計(jì)，上海分析儀器總廠產(chǎn)品；溫度梯度PCR擴(kuò)增儀，Thermo Hybaid公司產(chǎn)品；酶標(biāo)儀，美國BIOTEKTM公司產(chǎn)品；凝膠成像分析系統(tǒng)，UVP公司產(chǎn)品。

1.3 中藥血清制備 取健康雄性SD大鼠（220～250 g）12只，隨機(jī)分為對照組和ZBPYR組，每組6只。適應(yīng)飼養(yǎng)3 d后，ZBPYR組給予滋補(bǔ)脾陰方藥灌胃，10 ml/kg體質(zhì)量，此劑量灌胃2次/d，連續(xù)3 d；對照組給予等體積生理鹽水灌胃。于末次給藥后1 h腹主動(dòng)脈取血，靜置2 h，2 000 r/min，4 ℃離心15 min分離血清，離心半徑為16.1 cm，56 ℃，30 min滅活。0.22 μm濾膜過濾除菌，－20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 Neuro2a細(xì)胞的培養(yǎng) 小鼠神經(jīng)瘤母細(xì)胞Neuro2a細(xì)胞株由日本北海道大學(xué)藥學(xué)部野村靖幸教授惠贈(zèng)。細(xì)胞常規(guī)復(fù)蘇后加入培養(yǎng)液于5% CO2、37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)。細(xì)胞單層長滿后用終濃度為0.25%胰蛋白酶37 ℃條件下消化3 min，以1∶3傳代。培養(yǎng)液含90% DMEM、10%胎牛血清和1％雙抗。細(xì)胞長至第三代可以使用。

1.5 乳酸脫氫酶釋放試驗(yàn) Neuro2a細(xì)胞接種后分為對照組、10％空白血清組、5％ZBPYR組、10％ZBPYR組、15％ZBPYR組、Tm（5 μg/ml）組、10％空白血清＋Tm（5 μg/ml）組、5％ ZBPYR＋Tm（5 μg/ml）組、10％ ZBPYR＋Tm（5 μg/ml）組、15％ ZBPYR＋Tm（5 μg/ml）組。細(xì)胞單層長至70％時(shí)按以上分組給予相應(yīng)刺激。刺激后細(xì)胞放入5％CO2、37℃培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)48 h后用乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase， LDH）釋放試驗(yàn)檢測LDH泄漏率。LDH實(shí)驗(yàn)步驟按試劑盒說明執(zhí)行。LDH泄漏率為細(xì)胞上清中LDH活性與細(xì)胞總的LDH活性比值。LDH活性測定用酶標(biāo)儀于490 nm處檢測。另外Neuro2a細(xì)胞接種后分為對照組、STS（0.1 μmol/L）組、10％空白血清＋STS（0.1 μmol/L）組、15％ ZBPYR＋STS（0.1 μmol/L）組，待細(xì)胞單層長至70％時(shí)按以上分組給予相應(yīng)刺激。刺激后細(xì)胞放入5％ CO2、37 ℃培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)48 h后檢測LDH泄漏率。

1.6 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 實(shí)驗(yàn)分組同前。細(xì)胞單層長至90％時(shí)按以上分組給予相應(yīng)刺激。細(xì)胞放入5％ CO2、37 ℃培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)6 h。總RNA的提取和逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。（1）收集細(xì)胞用TRIReagent提取總RNA。用紫外分光光度計(jì)測定A260/A280，計(jì)算RNA濃度。（2）逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。反應(yīng)體系為20 μl。取2 μg總RNA，加二乙基焦磷酰胺（diethyl pyrocarbonate， DEPC）水至總體積為9 μl，加0.5 μl Oligo (dt) 1218引物混合后，置70 ℃變性10 min。然后加入下列成分：5×第一鏈緩沖液5.875 μl、10 mmol/L dNTP 2 μl、0.1 mol/L DTT 2 μl、RNase抑制劑0.5 μl和逆轉(zhuǎn)錄酶0.125 μl，混合使反應(yīng)總體系為20 μl。放入46 ℃反應(yīng)1.5 h，70 ℃變性15 min，冰上5 min后進(jìn)行擴(kuò)增。（3）PCR反應(yīng)。在0.2 ml PCR管中加入1.2 μl逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、sd H2O 9 μl、10 mmol/L dNTP 0.24 μl、10×PCR緩沖液1.2 μl、聚合酶0.12 μl、上游引物（20 μmol/L）0.12 μl、下游引物（20 μmol/L）0.12 μl，總反應(yīng)體系為12 μl。（4）PCR產(chǎn)物觀察。PCR產(chǎn)物經(jīng)40％丙烯酰胺凝膠電泳后，EB染色15 min，用凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行拍照及圖像分析，然后計(jì)算待測基因與內(nèi)標(biāo)磷酸甘油醛脫氫酶（glyceraldehyde phosphate dehydrogenase， GAPDH)吸光度的比值。PCR反應(yīng)擴(kuò)增參數(shù)如下：葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78（glucose regulated protein 78， GRP78），94 ℃ 5 min，94 ℃ 1 min，55 ℃ 1 min，72 ℃ 1 min，循環(huán)22圈，72 ℃ 5 min；凋亡促進(jìn)因子CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白（CCAAT/EBP homologous protein， CHOP），94 ℃ 5 min，94 ℃ 1 min，60 ℃ 1 min，72 ℃ 1 min，循環(huán)25圈，72 ℃ 5 min；GAPDH，94 ℃ 5 min，94 ℃ 40 s，58 ℃ 30 s，72 ℃ 40 s，循環(huán)28圈，72 ℃ 5 min。引物序列見表1。

表1 引物序列（略）

Table 1 Sequence of the primers

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)4次，圖像分析采用LabWorks 4.6專業(yè)圖像分析軟件。數(shù)據(jù)用SPSS 13.0軟件進(jìn)行分析，兩組間差異比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 LDH釋放試驗(yàn)檢測ZBPYR含藥血清對Tm刺激Neuro2a后LDH泄漏率的影響 各濃度含藥血清和10%空白血清組與對照組相比，LDH泄漏率差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明血清對Neuro2a細(xì)胞沒有毒性作用；Tm（5 μg/ml）組與對照組相比，LDH泄漏率明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；10％空白血清預(yù)處理組LDH泄漏率與Tm組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而各濃度ZBPYR含藥血清預(yù)處理組與Tm組相比，LDH泄漏率下降明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。10％藥物血清預(yù)處理組與10％空白血清預(yù)處理組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1。

2.2 RTPCR方法觀察ZBPYR含藥血清對Tm刺激Neuro2a后GRP78 mRNA表達(dá)的影響 各濃度含藥血清和10%空白血清組與對照組相比，GRP78 mRNA表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明血清對Neuro2a細(xì)胞GRP78 mRNA表達(dá)沒有影響；Tm（5 μg/ml）組與對照組相比，GRP78 mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng)(P＜0.05)；而加入血清預(yù)處理1 h后再加入濃度為5 μg/ml Tm各組與Tm（5 μg/ml）組相比，GRP78 mRNA表達(dá)明顯下降(P＜0.05)，其中ZBPYR含藥血清預(yù)處理組GRP78 mRNA表達(dá)較空白血清預(yù)處理組GRP78 mRNA表達(dá)下降更加明顯(P＜0.05)。見圖2。

2.3 RTPCR方法觀察ZBPYR含藥血清對Tm刺激Neuro2a后CHOP mRNA表達(dá)的影響 各濃度含藥血清組與對照組相比，CHOP mRNA表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明血清對Neuro2a細(xì)胞CHOP mRNA表達(dá)沒有影響；Tm（5 μg/ml）組與對照組相比，CHOP mRNA表達(dá)增強(qiáng)（P＜0.05）；10％空白血清預(yù)處理組與Tm（5 μg/ml）組相比，CHOP mRNA表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；而各濃度ZBPYR含藥血清預(yù)處理組CHOP mRNA表達(dá)與Tm（5 μg/ml）組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；10％藥物血清預(yù)處理組與10％空白血清預(yù)處理組相比，CHOP mRNA表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見圖2。

圖1 LDH檢測Tm刺激細(xì)胞后各組細(xì)胞LDH泄漏率（略）

Figure 1 LDH leakage from each group treated by Tm

**P＜0.01， vs normal control group; P＜0.05， P＜0.01， vs Tmtreated group; P＜0.05， vs 10％ control serumtreated group (n=4 for each group).

圖2 RTPCR法觀察Tm刺激各組細(xì)胞后GRP78和CHOP mRNA表達(dá)（略）

Figure 2 Expressions of GRP78 and CHOP mRNAs in different groups treated by Tm (RTPCR)

Results of RTPCR electrophoresis from each group and values of IOD from each group (n=4 for each group). *P＜0.05， vs normal control group; P＜0.05， vs Tmtreated group; P＜0.05， vs 10％ control serumtreated group.

2.4 LDH釋放試驗(yàn)檢測STS刺激Neuro2a后LDH泄漏率的變化 STS 0.1 μmol/L組與對照組比，LDH泄漏率升高（P＜0.01）；而加入15％空白血清預(yù)處理組與STS組相比，LDH泄漏率下降（P＜0.05）；15％ ZBPYR含藥血清預(yù)處理組與STS組相比，LDH泄漏率下降（P＜0.01）；15％ ZBPYR含藥血清預(yù)處理組與15％空白血清預(yù)處理組相比LDH泄漏率下降更加明顯（P＜0.05）。見圖3。

圖3 LDH檢測STS刺激細(xì)胞后各組細(xì)胞LDH泄漏率（略）

Figure 3 LDH leakage from each group treated by STS

**P＜0.01， vs normal control group; P＜0.05， P＜0.01， vs STStreated group; P＜0.05， vs 15％ control serumtreated group (n=4 for each group).

3 討論

ERS是細(xì)胞的一種應(yīng)激反應(yīng)過程，糖饑餓、鈣平衡紊亂、糖基化抑制和二硫鍵合成減少等情況下，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的微環(huán)境發(fā)生改變，蛋白質(zhì)的折疊受到影響，導(dǎo)致大量未折疊或錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)堆積于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)，由此引起一系列以分子伴侶和折疊酶表達(dá)上調(diào)為標(biāo)志的應(yīng)答反應(yīng)，稱為未折疊蛋白反應(yīng)（unfolded protein response， UPR）。通過UPR細(xì)胞才能在應(yīng)激情況下存活。分子伴侶GRP78與凋亡促進(jìn)因子CHOP是ERS時(shí)表達(dá)增多的兩種分子，被看作是ERS的標(biāo)志，在ERS中起著不同的作用。其中GRP78能保護(hù)細(xì)胞，而CHOP則是促進(jìn)細(xì)胞凋亡。因此通過藥物干預(yù)后研究它們的表達(dá)情況可以進(jìn)一步了解藥物對ERS的作用。AD是一種常見的神經(jīng)退行性疾病，病理特征為淀粉樣蛋白的沉積、神經(jīng)原纖維纏結(jié)、tau蛋白異常磷酸化和區(qū)域選擇性神經(jīng)元死亡［1］。AD與基因突變有關(guān)，主要有編碼淀粉樣蛋白前體基因（amyloid protein precursor， APP）和早老素（presenilin， PS）基因，這些基因都與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)有關(guān)。AD相關(guān)的早老素突變，誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)并且通過改變APP的蛋白水解加工作用而部分地增強(qiáng)對應(yīng)激誘導(dǎo)的凋亡的易損性。PS1突變通過細(xì)胞表面有活性的鈣離子流入的直接減少，不依賴APP，并間接地通過APP處理作用和淀粉樣肽的產(chǎn)生增加內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣離子釋放來解除對神經(jīng)元鈣離子穩(wěn)態(tài)的控制。這種鈣離子穩(wěn)態(tài)的干擾將改變APP的加工，過量生成β淀粉樣蛋白142(amyloid βprotein 142， Aβ142)，同時(shí)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣失衡，激活鈣蛋白激酶，切割內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的caspase12，從而激活caspase12介導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)特異性凋亡路徑，最終形成AD的病理變化［2］。除了鈣離子失調(diào)，PS突變下調(diào)UPR并增強(qiáng)對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的易損性［3］。PS1突變還誘導(dǎo)了一個(gè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中與應(yīng)激介導(dǎo)的凋亡途徑有關(guān)的凋亡前因子CHOP的表達(dá)［4］。PS是γ分泌酶復(fù)合物的一部分，與β分泌酶一起，裂解APP產(chǎn)生Aβ，并且PS突變增加總Aβ和Aβ142的產(chǎn)生。Aβ能直接引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的鈣離子釋放并且誘導(dǎo)了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和神經(jīng)毒性［5］。因而，在AD中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是引發(fā)和調(diào)節(jié)神經(jīng)元死亡的一個(gè)主要事件?，F(xiàn)有研究顯示在AD神經(jīng)元死亡中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡途徑和線粒體損傷的凋亡途徑相互影響，起著調(diào)控凋亡級聯(lián)反應(yīng)的作用［6］。中醫(yī)認(rèn)為人體的生長、發(fā)育和衰老與“腎”密切相關(guān)?！澳I精虛衰”是衰老的主要原因。同時(shí)又認(rèn)為“脾胃為血?dú)怅庩栔佟?，“脾胃既和，其人壽；脾胃不和，其人夭”，因此也重視奉養(yǎng)脾胃精氣在延年中的作用［7］。老年癡呆發(fā)病于老年期。老年期脾胃氣衰，飲食減少，脾虛則化源不足，腦髓失養(yǎng)，神機(jī)失調(diào)而發(fā)為本病。因此脾虛是老年性癡呆的基本病機(jī)，脾的功能衰退在老年性癡呆發(fā)病過程中起著主導(dǎo)作用，并貫穿于全過程［8］。脾的生理功能是脾之陰陽共同作用的結(jié)果。脾陰是指存在于脾臟的陰液（包括血、津液和水谷精微等）和脾的物質(zhì)形態(tài)及其滋潤濡養(yǎng)功能。由于脾與大腦關(guān)系密切，脾陰虧虛嚴(yán)重影響大腦的意識、學(xué)習(xí)、思維、記憶和情緒等功能，導(dǎo)致一系列與腦相關(guān)的精神意識病證如意識不清、學(xué)習(xí)記憶能力下降和情緒失常等。因此，滋補(bǔ)脾陰應(yīng)當(dāng)是防治老年癡呆的一個(gè)重要措施。滋補(bǔ)脾陰方藥由清代吳澄《不居集》中資成湯加味而成，以人參補(bǔ)脾益氣生津，山藥益胃補(bǔ)脾養(yǎng)陰，白芍養(yǎng)陰緩急，丹參活血養(yǎng)血益陰，茯苓健脾安神益智等，共奏健脾益陰之效。本組以往的研究顯示，滋補(bǔ)脾陰方藥能通過改善老齡大鼠腦細(xì)胞線粒體膜Na+K+ATP酶、Ca2+Mg2+ATP酶活性，調(diào)節(jié)膜磷脂代謝障礙和修飾膜的作用［9］，以及延緩興奮性氨基酸受體N甲基D門冬氨酸（NmethylDaspartic acid， NMDA）受體、γ氨基丁酸（gammaaminobutyric acid， GABA）受體染色陽性神經(jīng)元在衰老過程中喪失，同時(shí)抑制神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein， GFAP）的表達(dá)，起到神經(jīng)保護(hù)、延緩腦衰老的作用［10］。本實(shí)驗(yàn)中Tm刺激Neuro2a細(xì)胞LDH釋放試驗(yàn)結(jié)果表明，在加入滋補(bǔ)脾陰方藥含藥血清預(yù)保護(hù)后，可以明顯降低Tm刺激細(xì)胞后的LDH泄漏率，結(jié)合RTPCR觀察到滋補(bǔ)脾陰方藥含藥血清預(yù)處理后，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激標(biāo)志物GRP78及CHOP mRNA的表達(dá)受到抑制，兩種實(shí)驗(yàn)結(jié)果的同步性可以推斷滋補(bǔ)脾陰方藥具有抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的作用。STS刺激Neuro2a細(xì)胞LDH釋放試驗(yàn)結(jié)果表明，加入滋補(bǔ)脾陰方藥含藥血清預(yù)處理后，可以明顯降低STS刺激細(xì)胞后的LDH泄漏率（STS是線粒體凋亡途徑誘導(dǎo)劑）。因而表明滋補(bǔ)脾陰方藥同時(shí)具有保護(hù)線粒體損傷的作用。以上的研究結(jié)果為滋補(bǔ)脾陰方藥應(yīng)用于臨床防治AD提供了依據(jù)。AD是一種常見的神經(jīng)退行性病變，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前尚無有效的治療手段，對社會和人們的生活造成嚴(yán)重的負(fù)擔(dān)?，F(xiàn)有的研究表明，神經(jīng)元的凋亡在AD的發(fā)病過程中起著重要的作用。而內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡途徑和線粒體損傷的凋亡途徑已被證明在AD的發(fā)病過程中起著協(xié)同作用。我們的實(shí)驗(yàn)證明，滋補(bǔ)脾陰方藥對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡途徑和線粒體損傷的凋亡途徑具有雙重作用，因而有助于AD的防治，加之中藥治療有著毒副作用低、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的優(yōu)點(diǎn)，更易于為人們所接受。

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第7篇：遙遠(yuǎn)的眼神范文

歌詞：

1、昨天所有的榮譽(yù)；已變成遙遠(yuǎn)的回憶；辛辛苦苦已度過半生；今夜重又走進(jìn)風(fēng)雨；我不能隨波浮沉；為了我摯愛的親人；再苦再難也要堅(jiān)強(qiáng)；只為那些期待眼神；心若在夢就在；天地之間還有真愛；看成敗人生豪邁；只不過是從頭再來；昨天所有的榮譽(yù)；已變成遙遠(yuǎn)的回憶；

2、辛辛苦苦已度過半生；今夜重又走進(jìn)風(fēng)雨；我不能隨波浮沉；為了我摯愛的親人；再苦再難也要堅(jiān)強(qiáng)；只為那些期待眼神；心若在夢就在；天地之間還有真愛；看成敗人生豪邁；只不過是從頭再來；心若在夢就在；天地之間還有真愛；

3、看成敗人生豪邁；只不過是從頭再來；心若在夢就在；天地之間還有真愛；看成敗人生豪邁；只不過是從頭再來；心若在夢就在；天地之間還有真愛；看成敗人生豪邁；只不過是從頭再來。

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第8篇：遙遠(yuǎn)的眼神范文

帶著那一抹燦爛的心思，將我的溫柔與激情播種在陽光下的街道上，體會著和你一同走過的路程，享受著那種幻覺中的日日夜夜，仿佛把你的微笑當(dāng)做了愛情的天使的箭，將我的心牽引在你的身上，渴望中的未來，能是這樣子的嗎！

漫漫的長夜，妖嬈的樹容，將白天的羞澀完全包裹在暗色的景致里，月色里的我只能僅僅地裹緊衣服，將微笑隱藏在月光的陰影下，偷偷地看著窗子里甜蜜成雙的你們的身影。

你能知道嗎？我的感覺已經(jīng)飄然在你的身邊，我?guī)缀跬浟四闵磉呌幸粋€(gè)如你心愿的她，而我卻真實(shí)地就站在你的窗前，那片曾經(jīng)屬于我們的綠地，陽光和月光里都依戀的綠地，雖然沒有鮮花和溪水，沒有音樂和歌聲，卻有無數(shù)的說不盡的濃情和甜蜜的話語，有我們說不完的樂趣和喜悅。

可是，生活里的節(jié)奏和韻律改變了你的追求和習(xí)性。

原來的興致，興奮中的一切都無端地恢復(fù)了平靜，那一抹輕飄而濃重的眼神，也在夜色的闌珊中成為了另一片世界的海市蜃樓，距離將你從我的世界里分開，冷漠卻集結(jié)了我的渴望，你卻成為了另一個(gè)身影的姿容。

我卻在寂寞里無端地猜想著你生活的并不快樂，只是用一種外在的因素來模擬著虛榮的幸福，仿佛就像變色龍的皮膚為了迎合環(huán)境的變化來改變著自身的顏色，一種假定的包裝，真的很難為你這樣的生活，而我卻在你的假定中更加地虛浮不定，因?yàn)槲业哪欠N微妙的感覺給了你，沒有任何的剩余。

第9篇：遙遠(yuǎn)的眼神范文

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??她沉默了,這是她第一次沉默,也是她對自己眼中這個(gè)男孩的最后一次,沉默了。他離開后，她看著他的背影說了聲，謝謝。眼神已不再是她以前的冷漠了，心也一點(diǎn)一點(diǎn)的往下沉了，沉不到底的心，就如

??就如她對他的情一樣，很深很深。

??大家好，我叫....。時(shí)間仿佛又回到了他們剛見面的時(shí)候,第一眼看到他,她似乎就喜歡上了他,因?yàn)樗樕蠋е蠲赖奈⑿?。只是自己一直掩藏的很好。她對自己笑了一下，心理已?jīng)開始了哭泣，她知道

??是愛他的，就如他愛她一樣，再見了男孩子，你一定會遇到一個(gè)值得你用一生去愛的人的，祝你幸福。她在心里默默的說著但是他們都不覺得遺憾，因?yàn)榱粼谒麄冃睦锏氖亲罴儩嵉拿馈?/p>

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??世界上最遙遠(yuǎn)的距離不是生與死別，不是站在你面前，你卻不世界上最遙遠(yuǎn)的距離不明明知道彼此想愛，卻不能在一起而是明明無法抵擋這一股氣息，卻還得故意裝作毫不在意，世界上最遙遠(yuǎn)的距離不

??是明明無法抵擋這一股氣息.而是對你愛的人筑起一道鴻溝。