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夢(mèng)想是渴望,是探索!
像鳥兒一樣在天空翱翔,自古以來(lái)就是人類的夢(mèng)想。萊特兄弟的飛翔之夢(mèng)就是來(lái)自一群從他們頭上飛過的大雁。為了這一飛翔之夢(mèng)能夠?qū)崿F(xiàn),他們付出很多年堅(jiān)持不懈的努力;終于在1903年12月17日,世界第一架載人飛機(jī)“飛行者一號(hào)”飛上了藍(lán)天。萊特兄弟圓了全世界一個(gè)共同的愿望。
夢(mèng)想是不甘,是奮斗!
北京殘奧會(huì)緩緩拉開帷幕,在全世界的目光下,11歲的北川女孩李月在輪椅上靈活地舒展自己的舞姿,一段“永不停跳的舞步”讓無(wú)數(shù)人潸然淚下。這位在汶川特大地震中永遠(yuǎn)失去左腿的女孩堅(jiān)信:災(zāi)難可以摧毀肢體,但摧毀不了生命的意志。只要夢(mèng)想還在,追求夢(mèng)想的腳步就永遠(yuǎn)不會(huì)停。
夢(mèng)想是期望,是堅(jiān)持!
著名作曲家貝多芬喪失了聽力,這對(duì)于一名音樂家來(lái)說是人生中莫大的挫折,但對(duì)于貝多芬來(lái)說僅僅只是一部插曲。貝多芬用他百折不饒的精神繼續(xù)他的音樂道路。最后貝多芬戰(zhàn)勝了失聰帶來(lái)的重重阻礙,從痛苦的堅(jiān)巖中發(fā)掘出無(wú)盡的靈感,引導(dǎo)出快樂的甘泉;貝多芬抗擊的決心在旋律中躍動(dòng),貝多芬沉迷音樂的快樂,在音符間流淌。
他們?cè)谙耄翰饺牖橐錾畹臅r(shí)間還不算長(zhǎng),初為人父也還沒有體會(huì)到太多育兒的辛苦,身體也還算強(qiáng)壯,但已開始感受,太多的競(jìng)爭(zhēng)壓力、升遷壓力、經(jīng)濟(jì)壓力以及來(lái)自家庭和社會(huì)的各種義務(wù),真的有些累,能回到單身的時(shí)光那該多好,哪怕只有一天也好??!不過這都只是想想而已,畢竟看到那溫馨的小家、美麗的妻子、可愛的孩子還是感到是幸福的。
【三十到四十歲的未婚男人】
他們?cè)谙耄赫幵谑聵I(yè)得意的時(shí)候,工作起來(lái)都廢寢忘食,不過心里真的想結(jié)婚,有個(gè)溫馨的家庭、美麗的妻子、可愛的寶寶那該多好啊!不過,還是光想想吧,緣分要順其自然,既然單身都這么長(zhǎng)的時(shí)間了,也習(xí)慣了,但相信一切都會(huì)有的,事業(yè)是最重要的,沒有了這些基礎(chǔ)再好的夢(mèng)想都是空的。當(dāng)然啦,自由的感覺是最舒服的了,無(wú)拘無(wú)束悠然自得,爭(zhēng)取做個(gè)有錢有閑的家伙!
網(wǎng)友心聲——
孩子學(xué)習(xí)好,老人身體好,老婆還年輕,事業(yè)還算穩(wěn)定,再有次外遇就完美了……
——SOLO
眼看就快奔50了……很煩惱……
——LUCY
老人送走了,孩子可算養(yǎng)大了,這個(gè)過程可把自己累壞了,現(xiàn)在終于是沒有這份壓力了,得好好為自己活了??纯醋约旱睦掀?,身材變形,容顏盡褪,去外面風(fēng)流快活一下也算是無(wú)可厚非;不過玩歸玩,想讓我放棄糟糠還是有一定難度的。
——匿名
不惑之年,快知天命了,好多都已經(jīng)習(xí)慣了,沒有了以前的激情。更加理智的看問題,而不是感覺用事。處理問題比較現(xiàn)實(shí)就一點(diǎn)閱歷夠,很現(xiàn)實(shí)。想什么也有自己的原則。
——大汪巡山
如果自己現(xiàn)在還是二十五歲或是三十歲就好了,青春是多么美好呀!
——LZ04
老人、小孩、家庭、事業(yè)。
——zhang
半生都過完了,還是一事無(wú)成,眼看黃土都要埋上來(lái)了,我可怎么辦才好呢?
——VICO
回想過去的青蔥歲月,回想當(dāng)年跟那群狐朋狗友一起追過的?;āH嗽嚼?,越容易懷舊了。
——阿潘
調(diào)查:40歲男人都在想什么做什么
Q1:安分生活(多選)
(1) 養(yǎng)家、養(yǎng)房、養(yǎng)車、養(yǎng)妻小235 (31.17%)
(2) 鍛煉、強(qiáng)身199 (26.39%)
(3) 擦地、洗碗、做家務(wù)129 (17.11%)
(4) 安分守己、早回家191 (25.33%)
Q2:任其自然(多選)
(1) 如果還沒有結(jié)婚,就別結(jié)了203 (31.52%)
(2) 如果還沒去過K房或者桑拿,
最好去一次235 (36.49%)
“多少人曾愛慕你年輕時(shí)的容顏,可知誰(shuí)愿承受歲月無(wú)情的變遷?多少人曾在你生命中來(lái)了又還,可知一生有你我都陪在你身邊。”
這首《一生有你》成為了很多人青春的記憶,水木年華也成了校園民謠的代言人。近日,水木年華應(yīng)邀擔(dān)任了2015中國(guó)大學(xué)生音樂節(jié)形象大使。水木年華表示好的音樂不僅是流行,更應(yīng)是流傳,他們希望能夠多出一些以前他們喜愛的羅大佑、齊秦、鄭智化、黃舒駿這樣的人文歌手,有更好的音樂可以流傳。希望年輕人可以更加關(guān)注人文內(nèi)涵,心有夢(mèng)想,而不要被世俗所束縛。
近年來(lái),音樂類電視選秀涌現(xiàn)出很多實(shí)力新人,但專屬于大學(xué)生的音樂項(xiàng)目卻少之又少,“校園音樂”本體也并未受到足夠的重視,然而這并未限制校園音樂的多樣性發(fā)展。校園是一個(gè)他們有諸多記憶的地方,也希望能有更多熱愛的音樂的學(xué)弟學(xué)妹通過“大學(xué)生音樂”這個(gè)平臺(tái)能更加接近自己的夢(mèng)想。 音樂是校園愛情的沃土
因?yàn)榇髮W(xué)生音樂節(jié),水木年華再次回到了大學(xué)??娊苄φf:“其實(shí)我感覺我從沒離開過學(xué)校,現(xiàn)在有叫我老師的,我就覺得稍微有點(diǎn)不好意思,我還是喜歡大家叫我學(xué)長(zhǎng)?!北R庚戌在一旁打趣道:“我覺得被叫老師挺好的哈,有一種幸福和滿足感。關(guān)于校園,我還記得我入學(xué)第一天,拿著行李往宿舍走的時(shí)候,在水房中廳傳來(lái)很好聽的歌聲。我當(dāng)時(shí)以為是放錄音機(jī)。然后我就看了一眼,看到里面有一個(gè)男生拿著一把吉他在唱齊秦的一首歌,非常好聽,因?yàn)槲夷菚r(shí)非常喜歡齊秦。我內(nèi)心一陣狂喜,原來(lái)大學(xué)跟中學(xué)不一樣??赡芪覐拇艘_始我人生的新天地,這是我進(jìn)大學(xué)后的第一次感受?!?/p>
對(duì)于校園音樂如今的疲態(tài),繆杰感到十分無(wú)奈:“真正好的音樂就應(yīng)該來(lái)自于校園,它不是一種另類,而是應(yīng)該成為一種引領(lǐng)流行音樂的主流。實(shí)際上,真正的主流音樂就是一代又一代從校園走出來(lái)最有原創(chuàng)性和創(chuàng)造力的這幫人。所以真正的流行樂壇在哪里,未來(lái)在哪里?未來(lái)就在這里,就應(yīng)該是從一批又一批的校園領(lǐng)軍人物中走出來(lái)的?!?/p>
“那時(shí)候我們經(jīng)常來(lái)北大,坐在草坪上一唱就是一晚上?!北R庚戌表示現(xiàn)在的學(xué)生更加務(wù)實(shí),而他們的學(xué)生時(shí)期,沒有CEO,沒有網(wǎng)絡(luò),大家在一起經(jīng)常會(huì)探討虛無(wú)的精神上的東西,不會(huì)有太多的關(guān)于進(jìn)入社會(huì)的種種設(shè)想,此種對(duì)比,也使現(xiàn)在年輕人的歌曲顯得更加像“快餐”:“他們做音樂的技術(shù)上比我們當(dāng)時(shí)好很多,但歌詞的人文感覺要比我們差很多,他們看的書少了,思考的時(shí)間也少了,考慮的都是很現(xiàn)實(shí)的問題,所以才會(huì)有快餐文化的流行,包括現(xiàn)在很火的網(wǎng)絡(luò)音樂,其實(shí)都是快餐文化的體現(xiàn),而這些會(huì)轉(zhuǎn)瞬即逝的。希望大家以后的生活能給現(xiàn)在喜歡音樂的學(xué)弟學(xué)妹們?cè)黾痈嗟膭?chuàng)作底蘊(yùn)?!北R庚戌說。
盧庚戌聊起自己大學(xué)時(shí)的軼事,“能上清華不容易,在清華里也不容易,在清華的男生就更不容易,能有一位女朋友是非常令人羨慕的事情,后來(lái)發(fā)現(xiàn)認(rèn)識(shí)的那些校園歌手都有不錯(cuò)的女朋友,而且還能換。所以為了提高競(jìng)爭(zhēng)力,我開始學(xué)吉他?!闭f起理工院校的校園愛情,繆杰也很有感觸:“據(jù)我的經(jīng)驗(yàn),高校之間宿舍聯(lián)誼的成功率比較低。我們上學(xué)都是社團(tuán),有公辦的社團(tuán),也有私人的社團(tuán)。我們都在清華大學(xué)的合唱隊(duì),私下我們自己組織了校園音樂會(huì),不管是公辦的社團(tuán),還是因?yàn)榕d趣自己組織的社團(tuán),都是愛情的沃土。大家因?yàn)橄嗤膼鄄艜?huì)湊到一塊兒。一個(gè)班的同學(xué)只是因?yàn)閷I(yè)被動(dòng)地分在一起,但社團(tuán)是因共同的愛好聚在一起,這形成了一個(gè)很重要的愛的氣場(chǎng),這樣的環(huán)境成功率非常高。” 校園是個(gè)真誠(chéng)的地方,拒絕“功利”
可以想象,1999年開始實(shí)行的大學(xué)擴(kuò)招政策,實(shí)際上也對(duì)校園民謠產(chǎn)生了不小的影響。以前被認(rèn)為是未來(lái)精英的大學(xué)學(xué)子,從此開始變得參差不齊,這種情況也反過來(lái)影響了校園民謠生存的土壤。當(dāng)曾經(jīng)的風(fēng)花雪月以及兩耳不聞窗外事的象牙塔生涯,慢慢與現(xiàn)實(shí)社會(huì)接軌,學(xué)子們勢(shì)必會(huì)因?yàn)檫@樣的開放,很難唱出校園民謠那種純粹甚至封閉小世界才有的理想主義與情懷。
擔(dān)任了形象大使的繆杰積極鼓勵(lì)學(xué)弟學(xué)妹們說:“畢竟這個(gè)活動(dòng)跟過去我所看到的選秀節(jié)目是不一樣的,因?yàn)樗v究文化的內(nèi)容,而且它里頭有創(chuàng)作,所有的學(xué)生可以把心里話說出來(lái),而且最重要的是它有文化,有內(nèi)容,用音樂的形態(tài)表現(xiàn)。有些選秀節(jié)目已經(jīng)到了比做秀還過分的一種方式,它超過了綜藝節(jié)目?jī)?nèi)容的起伏性,相對(duì)你會(huì)覺得這個(gè)地方太平淡了。但是大學(xué)生本來(lái)就該是這個(gè)樣子,他本來(lái)就是一個(gè)讀書的孩子?!?/p>
盧庚戌則以自己以前的“窘態(tài)”來(lái)鼓勵(lì)選手:“大學(xué)生其實(shí)是很呆。你看我們到現(xiàn)在,表演上還是有一些木訥。再看我們當(dāng)時(shí)在學(xué)校表演的時(shí)候,上臺(tái)手都不知道往哪兒放,腦子一片空白。這點(diǎn)恰恰證明我們這些孩子是很真誠(chéng)的?!?/p>
關(guān)于校園,人們大多會(huì)想到“青春”“夢(mèng)想”這樣的主題。水木年華也談到了自己對(duì)夢(mèng)想的看法。盧庚戌認(rèn)為夢(mèng)想很簡(jiǎn)單,只是自己心心念念想去完成的某件事情,他反對(duì)把夢(mèng)想崇高化,也開玩笑表示當(dāng)初在學(xué)生時(shí)代會(huì)去唱歌彈吉他的初衷就是為了追女孩而已??娊軇t笑言自己堅(jiān)決拒絕這種“功利”的夢(mèng)想,表示自己當(dāng)初放棄高薪職業(yè)加入水木年華組合,只是單純地想唱歌而已。校園音樂跟流行音樂的本質(zhì)區(qū)別是主動(dòng)的,非商業(yè)目的的,只是因?yàn)槟阕约合矚g才會(huì)這么做,不是以盈利為目的,而是因?yàn)槟銗鬯艜?huì)做,愛的力量是偉大的。我希望有一天,音樂不會(huì)跟流行音樂的風(fēng),因?yàn)橛袗鄣牧α亢椭饔^能動(dòng)性去引領(lǐng)流行音樂的步伐。因?yàn)橹挥凶顔渭兊臇|西才是最有創(chuàng)造力,而不會(huì)被現(xiàn)實(shí)的很多東西所改變。學(xué)生社團(tuán)也一樣,你的沖動(dòng)、思考、創(chuàng)造力,希望能引領(lǐng)社會(huì)發(fā)展的方向?!?現(xiàn)實(shí)是別人的,夢(mèng)想是自己的
水木年華組合幾度換員,留下了盧庚戌和繆杰二人。盧庚戌笑稱“我倆待在一起的時(shí)間比跟各自的老婆還多”。兩人偶有矛盾,卻從未想過解散。歷經(jīng)多年,在同一個(gè)舞臺(tái)上歌唱的他們沒有有如偶像組合般的“粉紅互動(dòng)”,也沒有如搖滾組合那樣的轟烈分合,但他們卻是最忠實(shí)的音樂戰(zhàn)友。
如果說私下的生活,盧庚戌是杠杠的文藝青年,他愛電影、愛穿文藝青年喜歡的白襯衫。相比之下,繆杰的生活卻更“宅”一些,沒事上上網(wǎng)、愛穿無(wú)拘無(wú)束的休閑裝。兩個(gè)生活習(xí)慣不盡相同的人,為了音樂邊磨合邊前進(jìn)。
繆杰說:“兩人的默契不是一天兩天能有的,更不是天生的,多半來(lái)源于生活、工作中的相互磨合了解。我們偶爾會(huì)有爭(zhēng)執(zhí),我覺得這樣好他覺得那樣好,各有各的想法,一般的話就是中和兩人的意見,或者其他音樂人投票決定。”
盧庚戌也表示:“我倆可能更多的是方式是不一樣,比如我喜歡有話直說,希望有人能直接指出來(lái);而我搭檔是不能直接說他,否則他會(huì)跟你頂。比如我往前走,別人如果說我走錯(cuò)了,我會(huì)聽進(jìn)去;要是他的話,你跟他說走錯(cuò)了,他會(huì)問你:“我怎么錯(cuò)了?”呵呵。就是處理事情的方式不一樣。但是也沒有辦法,組合就跟夫妻一樣,你只能去包容對(duì)方的缺點(diǎn),因?yàn)閷?duì)方是很難改變的。因?yàn)樽铋_始都是因?yàn)閷?duì)方的優(yōu)點(diǎn)才走到了一起,所以也不可能找一個(gè)沒有優(yōu)點(diǎn)的人做搭檔?!?/p>
近年來(lái),盧庚戌一直在嘗試改變,當(dāng)年他以理科狀元的身份考入了清華大學(xué)建筑系,結(jié)果沒當(dāng)建筑師,而是成了一名歌手。不久前,盧庚戌也如愿完成了自己的新夢(mèng)想,那就是當(dāng)電影導(dǎo)演?!氨R導(dǎo)”覺得,有愿望是美好的,恰好自己又實(shí)現(xiàn)了,覺得幸福感爆棚了。
全班同學(xué)折磨可憐女生
可愛的小茹(化名)是個(gè)混血兒,她的父親是中國(guó)人,母親是日本人。入學(xué)前,小茹生活得很快樂,然而自從1998年進(jìn)入日本川崎市多摩區(qū)市立南菅小學(xué)后,她就開始了噩夢(mèng)般的生活。剛?cè)雽W(xué)時(shí),小茹在班上年齡最小,外班有一個(gè)名叫赤樹(化名)的日本男孩總是看小茹不順眼,因?yàn)樾∪闳×藗€(gè)中國(guó)人的名字。他每次看見小茹的時(shí)候,總要大聲喊叫:“你是個(gè)混血兒!”面對(duì)強(qiáng)壯的赤樹,小茹只好忍氣吞聲。
到了2000年4月,小茹升入了3年級(jí),剛好和赤樹分到了一個(gè)班。從此,赤樹更加肆無(wú)忌憚地欺負(fù)她了。在赤樹的帶動(dòng)下,全班以組成了一個(gè)欺負(fù)小茹的小集團(tuán)。這3個(gè)男同學(xué)每天必有一個(gè)跳出來(lái),或打小茹的頭,或用腳踢她,有時(shí)把小茹打得鼻青臉腫。而且,他們還罵小茹是“笨?!?、“大糞”。每當(dāng)小茹從他們身邊經(jīng)過時(shí),他們就以手掩鼻,表示小茹“很臭”。
8歲女孩竟說“想去死”
到了第二學(xué)期,他們開始有意識(shí)地孤立小茹。在吃飯時(shí),他們故意把桌子和小茹的桌子分開,不給小茹分飯,或者把飯最后一個(gè)分給小茹。而那3名女生還在一張紙條上寫上“大家都討厭小茹,都不要和她一起玩”的字樣,然后將紙條在班上傳來(lái)傳去。這樣,從第三學(xué)期開始,班上幾乎沒有同學(xué)同小茹玩了。小茹因此遭受了巨大的心理創(chuàng)傷,只好輟學(xué)在家,接受治療。年僅8歲的她甚至說出了“想去死”這樣的話。有一次,她真的走到了一處較高的地方,想跳下去結(jié)束自己幼小的生命,結(jié)果被人發(fā)現(xiàn)及時(shí)阻止,悲劇才沒發(fā)生。
按理說,小茹受到了班上同學(xué)的集體欺負(fù),老師應(yīng)該站出來(lái)主持公道才對(duì),然而,她的班主任不僅沒有阻止學(xué)生以強(qiáng)凌弱的行為,反而公開表現(xiàn)出對(duì)小茹的輕視。有時(shí),這名女教師甚至當(dāng)著同學(xué)的面嘲笑小茹,致使赤樹等人感到有恃無(wú)恐,從而變本加厲地折磨無(wú)辜的小茹。
學(xué)校瀆職遭到調(diào)查
女兒的遭遇讓父母極為痛心。小茹的家長(zhǎng)曾多次向校方反映情況,但得不到有力支持。后來(lái),在他們的強(qiáng)烈要求下,南菅小學(xué)被迫召開了一次家長(zhǎng)會(huì)。沒想到一名欺負(fù)小茹的學(xué)生的家長(zhǎng)冷笑著說:“被欺負(fù)總是有原因的……誰(shuí)都不幫你的孩子,說明你的孩子自身有問題?!备钊藷o(wú)法容忍的是,南菅小學(xué)的副校長(zhǎng)竟然贊同這名家長(zhǎng)的說法,并把如此嚴(yán)重的欺凌行為輕描淡寫地說成是“開玩笑”。
萬(wàn)般無(wú)奈之下,小茹的父母向川崎市教育委員會(huì)反映了有關(guān)情況,這一次,他們終于得到了支持。川崎市教育委員會(huì)沖破層層阻力,對(duì)這起校園暴力事件做了深入細(xì)致的調(diào)查。2003年1月27日,川崎市教育委員會(huì)學(xué)校教育部在南菅小學(xué)召開的家長(zhǎng)會(huì)上宣布:“這是一起基于種族歧視的惡意欺辱事件,情節(jié)十分嚴(yán)重,校方采取的應(yīng)對(duì)措施是完全不恰當(dāng)?shù)??!睍?huì)上,川崎市教育委員會(huì)學(xué)校教育部指導(dǎo)課的竹田課長(zhǎng)代表市教委,向小茹及其父母道歉。而南菅小學(xué)校長(zhǎng)及相關(guān)管理人員也將受到處分。
小茹的遭遇見報(bào)后,在日本華人社會(huì)激起了極大反響。當(dāng)?shù)厝A文媒體紛紛呼吁華人要勇于斗爭(zhēng)。有的華人說,在日本,欺負(fù)人是社會(huì)的一大弊病。一些日本人不僅這樣對(duì)待外國(guó)人,也同樣對(duì)待本國(guó)人。而在日本的一些小學(xué)校里,欺負(fù)人的事件也并不少見,這種病態(tài)現(xiàn)象反映了日本社會(huì)和教育本身都存在問題。
【摘要】 目的:探索人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)增殖的影響. 方法:采用經(jīng)典的全骨髓貼壁法培養(yǎng)MSC, 通過成骨、成脂肪等多向誘導(dǎo)分化以及流式細(xì)胞儀分析其表面標(biāo)記(CD133,CD34,CD90,CD105)等鑒定MSC特征;以P3MSC為實(shí)驗(yàn)材料,采用H3TdR參入法分析SDF1對(duì)MSC增殖的影響. 以50 nmol/L渥曼青霉素,10 mmol/L LY294002,50 mmol/L PD98059,0.1g/L AMD3100等分別處理P3MSC, 觀察SDF1影響MSC增殖的信號(hào)機(jī)制. 結(jié)果:培養(yǎng)的MSC呈現(xiàn)出CXCR4,CD90和CD105強(qiáng)陽(yáng)性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;含有100 mg/L SDF1的20 mL/L促進(jìn)了MSC增殖,而含有100 mg/L SDF1的150 mL/L FBS抑制了MSC增殖. SDF1抑制MSC增殖的效應(yīng)與其使MSC停滯在G1/S期有關(guān). 促分裂原活化蛋白激酶P38MAPK阻斷劑SB203580和CXCR4阻斷劑AMD3100取消了SDF1抑制MSC增殖的效應(yīng),而細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶阻斷劑PD98059加強(qiáng)了SDF1抑制MSC增殖的效應(yīng). 結(jié)論:SDF1/CXCR4介導(dǎo)的抑制MSC增殖的效應(yīng)與促分裂原活化蛋白激酶和細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶等信號(hào)分子有關(guān).
【關(guān)鍵詞】 人基質(zhì)細(xì)胞源衍生因子1; 間充質(zhì)干細(xì)胞;增殖;促分裂原活化蛋白激酶
【Abstract】 AIM: To explore the effect of stromal cellderived factor1 alpha (SDF-1α) on mesenchymal stem cell (MSC) proliferation. METHODS: MSC culture was performed with the classical whole bone marrow adhering method; MSC was identified through multidifferentiation and surface marker assay (CXCR4, CD133, CD34, CD90,CD105); After MSCs were treated with 100 mg/L SDF1a, 50 nmol/L wortmannin, 10 mmol/L LY294002, 50 mmol/L PD98059 and 0.1 g/L AMD3100 inhibitors, the proliferation rates were measured by [3H]thymidine incorporation assay. RESULTS: Cultured MSCs had the ability of multidifferentiation and highly expressed CXCR4, CD105 and CD90. 20 mL/L FBS including 100 mg/L SDF1a promoted MSC proliferation, however exposure of MSCs to 150 mL/L FBS including 100 mg/L SDF1a could induce marked inhibition of MSC proliferation through the arrest in the G1/S checkpoint. And its inhibitory effect on MSC proliferation was partly reversed by p38 mitogenactivated protein kinase (MAPK) inhibitor SB203580 and CXCR4 inhibitor AMD3100. However its inhibition effect on MSC proliferation was obviously enhanced by extracellular signalregulated kinase (ERK1/2) inhibitor PD98059.CONCLUSION: The effect of SDF1a on MSC proliferation is related to ERK1/2 and p38 MAPK.
【Keywords】 hSDF1α; mesenchymal stem cell; proliferation; MAPK
0 引言
骨髓來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cell, MSC)在一定條件下可以分化為心肌、成骨、軟骨、脂肪、胰島、肌腱等多種類型的細(xì)胞[1]. 在心肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、冠脈內(nèi)等不同途徑移植MSC或粒系集落刺激因子動(dòng)員骨髓發(fā)現(xiàn)其可以遷移到心肌梗死部位,通過參與血管新生、心肌再生等改善修復(fù)受損的心臟[1]. 有研究[2]發(fā)現(xiàn),SDF1/CXCR4軸不僅調(diào)控造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cell,HSC)的遷移,而且也影響HSC的增殖和分化. 新近研究發(fā)現(xiàn)MSC表達(dá)CXCR4[3],顯示SDF1/CXCR4軸可介導(dǎo)MSC的遷移[4]. 但是就SDF1/CXCR4軸是否影響MSC的增殖分化,目前仍不清楚. 我們利用H3TdR參入法檢測(cè)SDF1α對(duì)MSC增殖的影響,并初步探索SDF1α影響MSC增殖的信號(hào)機(jī)制.
1 材料和方法
1.1 材料 SPF級(jí)WISTAR大鼠3只,體質(zhì)量(230±20) g. 動(dòng)物在屏障系統(tǒng)環(huán)境下,用專用飼料和滅菌水分籠飼養(yǎng). 動(dòng)物合格證號(hào)為SCXK(鄂)2003005,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)為SYXK(鄂)2004021(均由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供). DMEM培養(yǎng)基(美國(guó)Gibcol公司);胎牛血清(fetal bovine serum,F(xiàn)BS,杭州四季青生物工程有限公司);胰酶(美國(guó)Sangon公司);CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱(美國(guó)科學(xué)儀器公司);倒置熒光顯微鏡(日本Nikon公司);恒低溫切片機(jī)(德國(guó)Leica公司);圖像分析系統(tǒng)(美國(guó)Media Cybernetics公司);hSDF1α(美國(guó)upstate公司);CD105, CD90, CD133和CD34(美國(guó)eBioscience公司);地塞米松、β磷酸甘油、維生素C、胰島素、4,6聯(lián)脒2苯基吲哚(4,6diamidino2phenylindolediacetate,DAPI)、SDF1特異性受體CXCR4阻斷劑AMD3100, 0.1 g/L(美國(guó)Sigma公司);hSDF1a(美國(guó)Upstate公司);磷酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3kinase, PI3K)阻斷劑, 渥曼青霉素(50 nmol,美國(guó)Alexis biochemicals公司);絲裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase, MAPK)阻斷劑PD98059(50 mmol,美國(guó)eBioscience公司).
1.2 方法
1.2.1 MSC的培養(yǎng)[1] 采用全骨髓法. 給予大鼠腹腔注射肝素5000 U,15 min后斷頸處死, 收集雙側(cè)脛股骨中全骨髓. 按1×109細(xì)胞/L接種于75 cm2培養(yǎng)瓶,24 h后換液,去除未貼壁的細(xì)胞. 以后3~4 d 完全換液1次,12~14 d 后細(xì)胞密度達(dá)80%~90%,用2.5 g/L的胰酶消化后1∶3傳代, 記為P1代MSC(P1MSC). 隨后按上述方法傳代培養(yǎng). 培養(yǎng)的P3MSC中加入終濃度為50 mg/L的DAPI溫育1 h,熒光顯微鏡下觀察其DAPI標(biāo)記的效率為100%[1]. 消化收集P3代的MSC(P3MSC),制成1×109/L細(xì)胞懸液,以備遷移實(shí)驗(yàn). 細(xì)胞培養(yǎng)條件:含150 mL/L的FBS以及1×105/L青霉素、100 mg/L鏈霉素和0.25 mg/L兩性霉素B的DMEM培養(yǎng)基,37℃ 50 mL/L CO2飽和濕度.
1.2.2 MSC的鑒定
1.2.2.1 成骨誘導(dǎo) P3MSC培養(yǎng)至90%融合后6孔板加入成骨誘導(dǎo)液(150 mL/L FBSDMEM,含地塞米松4×10-6 g/L, β磷酸甘油1 g/L, 維生素C 0.5 g/L),每72 h換液,誘導(dǎo)2 wk. Von Kossas染色鑒定礦化結(jié)節(jié).
1.2.2.2 成脂肪誘導(dǎo) P3MSC培養(yǎng)至90%融合后6孔加入成脂肪誘導(dǎo)液(10 mg/L胰島素), 每72 h換液. 蘇丹Ⅲ染色鑒定脂肪細(xì)胞.
1.2.2.3 流式細(xì)胞術(shù)鑒定MSC表面標(biāo)記特征 用1 mL注射器將MSC(密度為1010/L)吹打混勻后,取600 μL(至少含有2×106個(gè)細(xì)胞),等分為4份,分別加入4個(gè)Eppendorf管中. a管為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,加入4 μL大鼠IgG1FITC及4 μL大鼠IgG1PE mAB(熒光二抗);b管加入4 μL CD34FITC和4 μL CD133PE mAB(一抗);c管加入4 μL CD90 mAb(一抗);d管加入4 μL CD105 mAB(一抗),4℃下避光孵育40 min,洗滌液1000 r/min離心5 min,用PBS洗1~2 次. 在c, d管中加入8 μL大鼠IgG1FITC(熒光二抗),4℃下避光孵育20 min. 洗滌液洗2次. 加入固定液1 mL,上流式細(xì)胞儀(Beckman Coulter)檢測(cè)表面標(biāo)志,應(yīng)用Cotfit軟件分析結(jié)果.
1.2.2.4 免疫組化鑒定MSC表面標(biāo)記特 于24孔板中培養(yǎng)P3MSC至90%融合后,PBS洗3次,40 g/L多聚甲醛固定15 min. 羊血清封閉2 h,加小鼠抗大鼠CD105,小鼠抗大鼠CD90和兔抗大鼠CXCR4等一抗4℃孵育過夜. PBS洗3次,分別加羊抗小鼠和羊抗兔綠色熒光二抗室溫孵育2 h. PBS洗3次,PBS甘油(50%∶50%,封片). 熒光顯微鏡下觀察成像分析.
1.2.3 H3TdR參入法分析MSC增殖 取24孔培養(yǎng)板,向每孔內(nèi)加入2.5×104 P3MSC培養(yǎng)(150 mL/L FBS)24 h,20 mL/L FBS培養(yǎng)24 h. 隨后分別給予不同處理即:150 mL/L FBS+100 mg/L SDF1,20 mL/L FBS+100 mg/L SDF1和150 mL/L FBS. 分別濃度為3.7×1010 Bq/L (1×103 uCi/L)的3HTdR 0.1 mL,混勻后分別培養(yǎng)0.5, 1, 12, 24和48 h. PBS漂洗細(xì)胞3次,甲醛固定10 min. 于4℃ 50 mL/L三氯醋酸漂洗3次. 每孔加入0.5 mL 0.3 mol/L NaOH 60℃水浴處理30 min,冷卻至室溫. 收集上述裂解液移入閃爍瓶中,加入5 mL閃爍液,用液體閃爍計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)每分鐘的閃爍次數(shù)(cpm), 測(cè)定DPM值,反映細(xì)胞DNA合成速率. 每組重復(fù)3次. 在上述基礎(chǔ)上,分別給予P3MSC不同處理即:PI3K抑制劑渥曼青霉素、ERK1/2阻斷劑PD98059(50 mmol/L), p38MAPK阻斷劑SB230580(30 mmol/L)和CXCR4阻斷劑AMD3100(0.1 g/L). 其它按上述方法執(zhí)行.
1.2.4 細(xì)胞周期的測(cè)定 取24孔培養(yǎng)板,向每孔內(nèi)加入2.5×104 P3MSC培養(yǎng)(150 mL/L FBS)24 h,20 mL/L培養(yǎng)24 h. 隨后分別給予不同處理即:150 mL/L FBS+100 mg/L SDF1,20 mL/L FBS+100 mg/L SDF1和150 mL/L FBS. 分別于處理后培養(yǎng)0.5, 1, 12, 24和48 h胰酶消化收集細(xì)胞,制成單細(xì)胞懸液. 700 mL/L乙醇固定細(xì)胞過夜,5 g/L的RNA酶常溫消化細(xì)胞15 min. 25 mg/L的PI染料4℃避光處理細(xì)胞15 min. 隨后流式細(xì)胞儀檢測(cè)分析細(xì)胞周期,記錄靜止期與DNA合成前期(G0/G1)細(xì)胞比例.
2 結(jié)果
2.1 MSC的培養(yǎng) 由于造血干細(xì)胞不貼壁生長(zhǎng), 經(jīng)過數(shù)次換液, 懸浮的造血干細(xì)胞逐漸被清除, 貼壁MSC呈勻一梭形成纖維細(xì)胞樣形態(tài). 呈集落生長(zhǎng),增殖迅速. 原代MSC潛伏期約2~4 d,對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期3~5 d,此后進(jìn)入平臺(tái)期. 傳代MSC潛伏期較短,約1~2 d, 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)約3~4 d,可連續(xù)傳4~6代. 一般原代細(xì)胞4~5 d可傳代,傳代細(xì)胞2~3 d可再次傳代.
2.2 MSC的鑒定 MSC具有成骨成脂肪等多向分化潛能(圖1). 流式分析表明MSC低表達(dá)CD34(1.5%), CD133(1.8%);高表達(dá)CD90(96.0%), CD105(97.0%). 免疫組化分析結(jié)果顯示,MSC可高表達(dá)CD90, CD105和高表達(dá)SDF1受體CXCR4(圖2).
A: MSCs誘導(dǎo)分化為脂肪細(xì)胞 ×200; B: MSCs誘導(dǎo)分化骨細(xì)胞 ×100.
圖1 MSCs成骨成脂肪誘導(dǎo)分化(略)
A: MSC表達(dá)CXCR4; B: MSC表達(dá)CD105; C: MSC表達(dá)CD90.
圖2 MSC表面特征免疫組化檢測(cè)結(jié)果 SP ×200(略)
2.3 SDF1對(duì)MSC增殖的影響 在SDF1α處理后不同時(shí)間點(diǎn),100 mg/L SDF1對(duì)MSC增殖的影響與血清濃度密切有關(guān),其中含100 mg/L SDF1的20 mL/L FBS促進(jìn)MSC增殖,而含100 mg/L hSDF1的150 mL/L FBS抑制MSC增殖(圖3).
A: MSC表達(dá)CXCR4; B: MSC表達(dá)CD105. aP
圖3 SDF1對(duì)MSC增殖的影響(略)
2.4 SDF1影響MSC增殖的信號(hào)機(jī)制 在不同阻斷劑處理后不同時(shí)間點(diǎn),PI3K阻斷劑渥曼青霉素和LY294002, ERK1/2阻斷劑PD98059加強(qiáng)了SDF1對(duì)MSC增殖的抑制作用,而SDF1特異性受體CXCR4阻斷劑AMD3100, p38MAPK阻斷劑SB230580部分取消了SDF1對(duì)MSC增殖的抑制作用(圖4).
aP
圖4 SDF1影響MSC增殖的信號(hào)機(jī)制(略)
2.5 SDF1對(duì)MSC細(xì)胞周期的影響 100 mg/L SDF1處理MSC后不同時(shí)間點(diǎn),G0/G1期的MSC明顯增多, 且呈現(xiàn)出時(shí)間依賴的關(guān)系(圖5).
3 討論
近年來(lái),許多學(xué)者研究SDF1/CXCR4軸介導(dǎo)HSC動(dòng)員遷移的信號(hào)分子機(jī)制發(fā)現(xiàn):利用PI3KAKT途徑抑制劑Ly290042或渥漫青霉素等時(shí)可明顯抑制HSC的遷移 [5-9]. 同時(shí)從SDF1/CXCR4軸對(duì)HSC增殖分化的研究認(rèn)識(shí)到,SDF1對(duì)HSC的幸存能力、增殖的調(diào)節(jié)主要與PI3KAKT, ERK1/2等信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路有關(guān)[6-7]. SDF1/CXCR4軸介導(dǎo)MSC遷移的機(jī)制與HSC非常相似.
aP
圖5 SDF1對(duì)MSC細(xì)胞周期的影響(略)
本研究選用具有多向分化潛能的MSC作為實(shí)驗(yàn)材料,并采用最新的鑒定MSC的標(biāo)準(zhǔn)[10]. 同時(shí)利用免疫細(xì)胞化學(xué)的方法進(jìn)一步確認(rèn)MSC表達(dá)SDF1受體CXCR4. 采用H3TdR參入法分析SDF1對(duì)MSC增殖的影響. 研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)2% FBS和SDF1處理后促進(jìn)了MSC的增殖,15% FBS和SDF1處理后抑制了MSC的增殖. 前者與Kortesidis等[11]報(bào)道的一致,后者存在差異,主要與MSC培養(yǎng)體系不同有關(guān). 其原因在于: ① 實(shí)驗(yàn)體系不同. 即Kortesidis等采用的是無(wú)血清的多種細(xì)胞因子組合誘導(dǎo)MSC增殖的培養(yǎng)體系,而我們?yōu)橛醒宓呐囵B(yǎng)體系;② 評(píng)價(jià)增殖的方法不同. 即Kortesidis等[11]采用的是MSC克隆形成法(CFUF)評(píng)價(jià),而我們采用的是H3TdR參入法分析MSC增殖;③ 實(shí)驗(yàn)材料不同. 即Kortesidis等[11]采用的人MSC,而我們采用的是大鼠MSC. 這些結(jié)果一方面提示血清中復(fù)雜的成分在MSC增殖過程發(fā)揮著重要作用,另一方面提示當(dāng)加入外源性誘導(dǎo)因子如SDF1后,與血清中的誘導(dǎo)因子交互作用而導(dǎo)致MSC增殖呈現(xiàn)出不同的效應(yīng).
在此基礎(chǔ)上,我們進(jìn)一步分析SDF1對(duì)MSC增殖影響的信號(hào)機(jī)制發(fā)現(xiàn):CXCR4阻斷劑阻斷SDF1/CXCR4對(duì)MSC的作用后,其抑制增殖的效應(yīng)幾乎被取消,表明SDF1具有抑制MSC增殖的作用,并且這種作用與其受體CXCR4有關(guān). 已知SDF1與其受體CXCR4結(jié)合后,將激活CXCR4偶聯(lián)的G蛋白下游信號(hào)分子. 本研究還發(fā)現(xiàn)ERK1/2途徑阻斷后進(jìn)一步加劇了MSC增殖的抑制,而p38MAPK途徑阻斷后反而使SDF1/CXCR4介導(dǎo)的MSC增殖抑制緩解甚至導(dǎo)致MSC表現(xiàn)為增殖加強(qiáng). 同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞周期發(fā)現(xiàn)SDF1處理的MSC更多的處于G0/G1期,進(jìn)一步說明SDF1具有抑制MSC增殖的作用. 這些與研究報(bào)道的SDF1/CXCR4通過ERK1/2途徑促進(jìn)HSC增殖的作用相反[6]. 提示SDF1/CXCR4介導(dǎo)的增殖反應(yīng)與其作用的細(xì)胞類型有關(guān).
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一、卡夫卡人生經(jīng)歷對(duì)于《城堡》“獨(dú)特的感覺”的塑造
1883年,卡夫卡出生在奧匈帝國(guó)布拉格的一戶猶太人家中,他的父母是當(dāng)時(shí)的商人。因此,卡夫卡生活在一個(gè)物質(zhì)生活相對(duì)富裕的家庭中,但由于家庭的原因讓卡夫卡一直覺得自己是世界上最可憐的人??ǚ蚩ǖ母赣H是一個(gè)極其暴躁的人,對(duì)于卡夫卡的童年教育一直是十分嚴(yán)厲與蠻橫的,這使得卡夫卡的童年一直生活在父親的打壓下。再加上卡夫卡的母親在性格上有較多缺陷,如:母親一直生活在憂郁的情感中。母親與父親兩種截然不同的性格使卡夫卡害怕這個(gè)“家庭”,也導(dǎo)致了卡夫卡在自己的感情及家庭生活極其不順,在感情上漂泊不定,以致于到死也沒有成家。足以可見原有家庭生活給卡夫卡帶來(lái)巨大壓力。也正是因?yàn)榭ǚ蚩ǖ募彝ソ?jīng)歷帶給他的傷害,讓卡夫卡的思想與別人的思想存在著較大的差距。
曾經(jīng)有學(xué)者說卡夫卡是一個(gè)完全不屬于這個(gè)世界的人,他的世界只屬于他自己。他的血液里流動(dòng)的是猶太人的血,但是他絕對(duì)沒有猶太人的品行特點(diǎn);他生活在基督教下,但也沒有基督教徒的思想;同樣,他是一個(gè)商人的兒子,但是他卻完全沒有商人的意志??ǚ蚩ㄖ皇且粋€(gè)生活在多重壓力下的文字工作者,但是卡夫卡在世的時(shí)候并沒有過多的去發(fā)表自己的作品,直到他死后其作品才被我們所看到。并不是一個(gè)文字的炫耀者,他一直生活在自己的“城堡”中,他的生活是完全被包圍的,他沒有自由。正是因?yàn)樗?ldquo;城堡”的生活經(jīng)歷才使我們品讀到偉大的小說著作《城堡》。
卡夫卡所經(jīng)歷的世界和我們所有的人的經(jīng)歷有著很大的差距,他家庭的矛盾性,讓他的性格與價(jià)值觀和我們常人有所不同??ǚ蚩ㄓ盟囊庵疽恢鄙钤谶@個(gè)和他想象不一樣的世界,正是因?yàn)楝F(xiàn)實(shí)世界與所想不同,才促使了卡夫卡給我們留下了《城堡》中“獨(dú)特的感覺”。
二、《城堡》中“獨(dú)特的感覺”體現(xiàn)
1、對(duì)話模式
卡夫卡《城堡》中主人公K的經(jīng)歷是這部作品的主要表現(xiàn)形式,小說中主要圍繞主人公K與諸多人們的對(duì)話而展開,文章的二分之一內(nèi)容都是在表現(xiàn)主人公與不同人們的對(duì)話。這種對(duì)話形式的小說讓讀者從人們的對(duì)話中得到思考及感悟。盡管一個(gè)人說話的語(yǔ)調(diào)是形式,但是給人們卻帶來(lái)不同的感覺。不同的人們對(duì)于不同的人物形象更是有很多不同的感受,因此對(duì)話形式的文章注定給我們廣大讀者帶來(lái)的情感是不同的。
首先,對(duì)話模式從小說的具體內(nèi)容上帶給讀者的“獨(dú)特的感覺”。因?yàn)樾≌f以主人公對(duì)話的形式展開的,因而在小說的故事情節(jié)上相對(duì)較簡(jiǎn)單,并不像其他小說一樣較繁瑣,也沒有大范圍敘述帶給我們單調(diào)的情感色彩。因?yàn)槿宋镄愿聍攘ι系牟煌⒍ńo我們的閱讀增加很多趣味性,也只有這樣才能夠無(wú)限擴(kuò)展讀者思維。
其次,從對(duì)話模式的美學(xué)境界上帶給讀者的“獨(dú)特的感覺”。這種獨(dú)特的感覺主要表現(xiàn)在對(duì)話模式的美學(xué)藝術(shù)上,小說的主人公K是一個(gè)漂泊在異鄉(xiāng)的流浪者,主人公身份的特殊性就注定了他將與這里的人們之間出現(xiàn)不協(xié)調(diào)性。對(duì)話美學(xué)藝術(shù)通過深層、表層將文章的內(nèi)容、情感藝術(shù)展現(xiàn)在讀者面前,當(dāng)然對(duì)于這種對(duì)話模式美學(xué)的運(yùn)用也是文章的藝術(shù)境界得以提升的主要原因之一。
再次,就是從對(duì)話模式的經(jīng)典性帶給讀者的“獨(dú)特的感覺”。對(duì)話的模式在小說的表現(xiàn)形式上是較為常見且經(jīng)典的形式,卡夫卡《城堡》中的對(duì)話模式運(yùn)用是對(duì)整體文章結(jié)構(gòu)的概括,但卡夫卡文章中的對(duì)話模式打破了以前傳統(tǒng)對(duì)話模式。采用對(duì)話模式是為了增加小說內(nèi)容的真實(shí)性,讓讀者感覺到這個(gè)人物真實(shí)存在??ǚ蚩ǖ膶?duì)話模式在小說中的運(yùn)用主要的是為了體現(xiàn)一種新型的文學(xué)模式,卡夫卡這種新型的文學(xué)模式成為了現(xiàn)階段文學(xué)史上的經(jīng)典,在整個(gè)外國(guó)文學(xué)史上具有重要意義。
最后,“對(duì)話”有著“非對(duì)話性”的特征,即對(duì)話的不可能性。從主人公K的境遇來(lái)看,他是一個(gè)“無(wú)家可歸的異鄉(xiāng)人”,就像在這個(gè)村莊里,每個(gè)人物原來(lái)都只是孤獨(dú)的個(gè)體。“非對(duì)話性”表現(xiàn)在:一方面,人物“對(duì)話”間存在著表層或深層的沖突,使得內(nèi)容充滿了悖謬。例如主人公K力圖成為城堡認(rèn)可的土地測(cè)量員。然而,K與其他人物交談得越多,他的人生目標(biāo)和價(jià)值就越顯得可疑和縹緲。這是對(duì)話的困境,對(duì)話雙方從表面上來(lái)看是在交流,但從深層次上來(lái)看一方并沒有對(duì)另一方所接受和認(rèn)同。或者說,這種“對(duì)話”從一開始就不是以溝通和交流為目的的。另一方面,正是人物之間的這種相互隔絕、孤獨(dú)的狀態(tài),對(duì)話在功能上往往具有了“獨(dú)白”的性質(zhì)。通過K與不同人物的長(zhǎng)篇“對(duì)話”,我們看到了小說中像K一樣的孤獨(dú)者,他們各自懷揣著人生的信念和理想,卻艱辛地生活在這個(gè)不可理喻的“城堡”中。每個(gè)人的人生之路上,任何情況都可能發(fā)生,際遇毫無(wú)理性可言。而誰(shuí)也不知道這種人生煎熬何時(shí)結(jié)束。
2、象征意義
卡夫卡這部著名的小說《城堡》所代表的象征意義主要是源于小說意境中與現(xiàn)實(shí)生活中對(duì)“城堡”的理解。一方面,不同的人對(duì)“城堡”的理解有所不同。一個(gè)平凡的自然人對(duì)于城堡一定是向往的;而若是公主或王子對(duì)“城堡”則是厭煩的,希望逃出城堡,追求自由人生。由此可看出,不同階層的人對(duì)“城堡 ”的理解所有不同。若從神學(xué)角度來(lái)看,城堡所體現(xiàn)的是世界客觀性與主觀性間的矛盾。但無(wú)論是哪一種理解都是現(xiàn)實(shí)與夢(mèng)幻的矛盾,同時(shí)這種理解是建立在個(gè)人體會(huì)之上的??ǚ蚩ā冻潜ぁ分械闹魅斯獽身上所體現(xiàn)的不同性使得文章中關(guān)于“城堡”的象征意義也存在很大的不確定性,從某一角度上來(lái)說,正是由于這種確定性而帶給我們很多“獨(dú)特的感覺”。與此同時(shí),主人公K的整個(gè)形象上的不確定性,讓他對(duì)于生活向往與別人相比有著較大的不同,這是一種關(guān)乎于多方面的現(xiàn)實(shí)與理想間的差距,這種差距讓我們對(duì)于現(xiàn)實(shí)的生活有了更多的猜測(cè)與追求。也正是這種真與假間的相互轉(zhuǎn)化讓小說的象征意義與其他小說相比,存在較大差異性。這種在一般的意識(shí)流小說中體現(xiàn)上并不是那么的多樣化,但是在卡夫卡的《城堡》卻因?yàn)檫@種不同性帶給了我們更多的現(xiàn)實(shí)思考。另一方面,小說中存在不同的象征意義給讀者也帶來(lái)了不同的感覺,主人公K對(duì)于城堡外的生活與城堡內(nèi)的生活的感受,讓我們體會(huì)到所有的困難中人類最大的敵人就是我們自己,我們走不出自己的內(nèi)心,我們將永遠(yuǎn)被困境在內(nèi)心的那座城堡中。而那種華麗的死亡是我們?nèi)祟愖约涸斐傻?,因此,我們要不斷的去?zhàn)勝自己。正是這種象征意義上的情感使讀者產(chǎn)生了“獨(dú)特的感覺”。
三、《城堡》中“獨(dú)特的感覺”給我們的隨想
這部著名作品《城堡》所帶給我們的隨想是十分深刻的,我們從小說的情感中也得到了很多的思考。關(guān)于卡夫卡的這部作品從發(fā)表以來(lái)一直受到了不同階級(jí)人們的關(guān)注,小說所帶給我們的思考也是多方面的。雖然現(xiàn)在我們很多人一直在說我們要生活在簡(jiǎn)單的世界中,我們的思想簡(jiǎn)單了,我們就不會(huì)被太多的東西所困擾。但是卡夫卡的世界卻是那樣的復(fù)雜,像他的《城堡》一樣,他的思想中有太多的不確定性與復(fù)雜性,也正是因?yàn)檫@一點(diǎn)我們才能夠從多方面思考卡夫卡的人生。
一方面,進(jìn)不去城堡的K自此踏上了去往城堡的路,并沒有聯(lián)系上城堡里面的官員,城堡與村里的聯(lián)系人帶給他的信早已失去了時(shí)效性。當(dāng)K找不到與城堡聯(lián)系的方式時(shí),進(jìn)入到城堡的每一種努力都能夠像城里的路一樣通往別處。當(dāng)K滯留于村子里時(shí),城堡也沒有向他開門,對(duì)其因素進(jìn)行分析,可歸納為來(lái)自土地測(cè)量員的K自身,仍有部分K聲稱自己是城堡中的伯爵,但并沒有一個(gè)人認(rèn)識(shí)到他,也就不能夠確定所說的話是真還是假。此外,還有可能由于語(yǔ)言交流上的困難進(jìn)而導(dǎo)致K難以進(jìn)入到城堡。在城堡中K與村里的人接觸較頻繁,但都能夠較好的溝通,似乎都能夠生活在不同的世界中。來(lái)自城堡及村里自上而下的人群是阻擾K進(jìn)入到城堡的外在因素。
另一方面,進(jìn)不去城堡的卡夫卡與K一樣,卡夫卡有著自身身份與故土尷尬及其困惑,但并沒有一方屬于自己作為猶太人的堅(jiān)實(shí)故土,有一種不安全的感覺。此外,有一部分地區(qū)也制定了猶太人的格托區(qū),并在該區(qū)域生活的猶太人為了能夠?qū)ふ野踩M(jìn)而本能的與他人疏遠(yuǎn)。尤其隨著社會(huì)的不斷發(fā)展,各地有形的格托區(qū)也消失了,但在他們的心里:自覺及不自覺的與猶太傳統(tǒng)保持著一種天然的聯(lián)系,進(jìn)而構(gòu)建出精神格托這一文化結(jié)構(gòu)??ǚ蚩ㄅcK一樣,都存在與周圍世界交流困難,各種文化的相互碰撞,進(jìn)而引發(fā)了較為激烈的民族沖突。正是由于這種原因,才使得他成為了陌生環(huán)境下的異鄉(xiāng)人,也就不可能在陌生的環(huán)境中扎根。對(duì)于卡夫卡進(jìn)不去城堡的另一重要原因在于激烈的宗教沖突,阻礙了卡夫卡的進(jìn)入。
當(dāng)然,除了以上《城堡》所帶來(lái)的隨想之外還有很多的獨(dú)特的隨想,例如主人公的最終成功是因?yàn)樗麑?duì)于人際關(guān)系的恰當(dāng)運(yùn)用、文章中的女人的形象帶給主人公的不同的感受等等……我們從中感受到的是我們要想去生存我們就要學(xué)會(huì)很多,我們不僅僅是要妥協(xié)于生活,更要妥協(xié)于自己。我們要學(xué)會(huì)去面對(duì)很多東西,同時(shí)這些都是卡夫卡的生活經(jīng)歷所帶給我們的隨想,我們要從這種境界中去感悟我們的生活。
結(jié)束語(yǔ):
卡夫卡的《城堡》帶給讀者情感上的沖擊是巨大的,我們也從中學(xué)會(huì)了太多的思考與認(rèn)識(shí)我們?nèi)祟愖约?,小說中的主人公身上的太多的不確定因素讓我們對(duì)于未知的世界有了太多的向往。我們從卡夫卡人生經(jīng)歷中又感悟了一遍城堡的精神,無(wú)論是從哪一方面,我們對(duì)于城堡所帶給我們的“獨(dú)特的感覺”卻是最深刻的,對(duì)于小說的隨想才是支撐我們?nèi)ゲ粩嘧非蟮恼嬲α俊?/p>
參考文獻(xiàn):
[1]趙楠.敘事時(shí)間的藝術(shù)魅力——解析卡夫卡的《城堡》[J].名作欣賞:文學(xué)研究(下旬).2013,(3):12-13
[2]張宗子.關(guān)于《城堡》的25個(gè)隨想[J].社會(huì)學(xué)家茶座.2012,(4):34-35
【積累前言】
敢于反思、善于反思是人類的大智慧。曾子曰:“吾日三省吾身:為人謀而不忠乎?與朋友交而不信乎?傳不習(xí)乎?”人要認(rèn)清自己。金無(wú)足赤人無(wú)完人,反思是為了更好地完善自我。反思昨天為了明天;反思失敗為了成功。反思是一種品質(zhì),使我們清醒。不斷地反思,我們會(huì)拒絕重復(fù)性錯(cuò)誤。反思,讓我們走在時(shí)代的前列,不會(huì)錯(cuò)過即將到來(lái)的機(jī)遇。沒有反思就沒有新的發(fā)現(xiàn)。在痛苦中反思,我們不再孤獨(dú);在閑適中反思,我們不再空虛;在奮進(jìn)中反思,我們不會(huì)偏離目標(biāo);在安逸中反思,我們不會(huì)沉淪;在失敗中反思,我們不會(huì)氣餒;在成功后反思,我們不會(huì)止步不前。
TCL的反思大會(huì)
去年,“速度經(jīng)濟(jì)與變革創(chuàng)新―――TCL集團(tuán)20年成長(zhǎng)反思研討會(huì)”舉行。在大會(huì)上,TCL集團(tuán)總裁李東生坦陳了TCL在成長(zhǎng)過程中的兩大戰(zhàn)略失誤。利用中國(guó)經(jīng)濟(jì)高速增長(zhǎng)的環(huán)境和建立市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)體系的機(jī)遇,TCL集團(tuán)20年來(lái)實(shí)現(xiàn)了高速增長(zhǎng),規(guī)模迅速擴(kuò)大,有很多經(jīng)驗(yàn)要總結(jié),但也有一些失誤需要反思。其中有兩個(gè)戰(zhàn)略性的失誤值得人們認(rèn)真反思:一是沒有抓住國(guó)內(nèi)通信產(chǎn)業(yè)發(fā)展的機(jī)遇;二是實(shí)行多元化準(zhǔn)備不足。
90年代國(guó)內(nèi)發(fā)展最快的企業(yè)就是通信類企業(yè),而TCL進(jìn)入通信行業(yè)很早,在1989年就成為中國(guó)的電話機(jī)大王,有發(fā)展通信產(chǎn)業(yè)很好的基礎(chǔ),特別是1993年TCL通訊股份公司股票上市后,在資金方面也有優(yōu)勢(shì),但沒有把握住這一機(jī)遇。
另一個(gè)失誤是多元化的問題。TCL在實(shí)行多元化戰(zhàn)略時(shí)準(zhǔn)備不夠充分、資源分散,戰(zhàn)線拉得過長(zhǎng),真正形成有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品不多?!艾F(xiàn)在你們看到的一些TCL產(chǎn)品,是我們已經(jīng)形成競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)的產(chǎn)品。還有很多我們進(jìn)入的行業(yè)、多元化的產(chǎn)品,你們沒有看到,它們沒有達(dá)到目標(biāo),有的項(xiàng)目還失敗破產(chǎn)了?!?/p>
一個(gè)企業(yè)要在市場(chǎng)上求得生存,就必須像TCL一樣不斷反思自己的發(fā)展歷程。
【素材解讀】
只有不斷反思,才能不斷進(jìn)步。反思是一個(gè)伴隨著我們?nèi)松_步前進(jìn)的長(zhǎng)期過程。一次反思就是對(duì)我們靈魂和行為的剖析和檢閱。不斷地反思是對(duì)我們自身陋習(xí)和人性中痼疾的不斷拋棄。及時(shí)反思,會(huì)使我們的人生及時(shí)受益。垂暮之年的反思,可以對(duì)后來(lái)者教化啟迪。生命的價(jià)值在于追求和超越。如果沒有反思,超越無(wú)疑只是空談。因?yàn)闆]有認(rèn)真總結(jié)自己的過去,自然無(wú)從評(píng)價(jià)自己的得失。反思是一種審視,更是一種調(diào)節(jié)。低沉的時(shí)候,不要悲觀,你會(huì)看到光明;昂揚(yáng)的時(shí)候,不要狂妄,你會(huì)認(rèn)識(shí)到自己還有不足。把握合適的尺度,調(diào)整合理的心態(tài),你才會(huì)左右逢源,審時(shí)度勢(shì),不斷前進(jìn)。
【運(yùn)用技法】
1.可以論證不斷總結(jié)的意義,激勵(lì)自己奮發(fā)圖強(qiáng);反省自己應(yīng)該怎樣才能夠再一次成為王者。
2.可以突出表現(xiàn)反思過程,強(qiáng)調(diào)反思是糾正錯(cuò)誤的第一步。
3.可以論證反思有助于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),有利于改正錯(cuò)誤,使我們積極進(jìn)步。
巴金晚年的痛與夢(mèng)
1978年12月,歷經(jīng)“”苦難的巴金老人開始執(zhí)筆晚年最為重要的作品―――《隨想錄》。1979年春天,巴金重返巴黎。剛剛經(jīng)歷過“”浩劫的巴金,思想正處在一個(gè)關(guān)鍵的轉(zhuǎn)折點(diǎn)上。舊地重游帶給他的不只是興奮、親切,還有對(duì)歷史的反思。在《隨想錄》中,巴金一再提到他在“”初期被迫不停地寫交代的經(jīng)歷。
巴金這樣說過:“我怎么忘記了當(dāng)年的承諾?我怎么遠(yuǎn)離了自己曾經(jīng)贊美的人格?我怎么失去了自己的頭腦,失去了自己的思維,甚至自己的語(yǔ)言?”這是可以想象到的巴金的內(nèi)心。一次又一次的精神自責(zé),在開始寫作《隨想錄》時(shí)不住地折磨著巴金。正是這種精神的痛苦,成了巴金晚年寫作的動(dòng)力,這與當(dāng)年在巴黎寫下《滅亡》中的片段時(shí)的精神狀態(tài)頗為相似。用他自己的話說,“仿佛我又遇到五十年前的事情”。
他直面“”對(duì)民族帶來(lái)的浩劫,直面自己人格曾經(jīng)出現(xiàn)的扭曲。他愿意用真實(shí)的寫作,填補(bǔ)一度出現(xiàn)的精神空白。他終于寫出了在當(dāng)代中國(guó)產(chǎn)生巨大影響的《隨想錄》,以此來(lái)履行一個(gè)知識(shí)分子應(yīng)盡的歷史責(zé)任,從而達(dá)到了文學(xué)和思想的最后高峰。
【素材解讀】
我們不僅對(duì)工作反思,對(duì)學(xué)習(xí)反思,還要對(duì)自己反思。反思可以使人認(rèn)清目標(biāo);當(dāng)你看到那梅花還在風(fēng)雪中綻開時(shí),你是否會(huì)反思你所走過的路是無(wú)悔的嗎?反思可以使人更加謙虛;當(dāng)你看到那一望無(wú)際的白雪時(shí),你是否會(huì)反思你以后將怎樣走向成功?反思可以使人展望未來(lái)。在春日里反思,暖洋洋;在夏日里反思,涼爽爽;在秋日里反思,碩果累累;在冬日里反思,展望前方。反思可以使我們?cè)鎏碜孕牛靼讓?duì)與錯(cuò),成功與失敗,目標(biāo)與結(jié)果,過程與成果……那么,朋友,請(qǐng)自覺反思,做自我反思的主人吧!就像巴金那樣。相信輝煌的勝利一定會(huì)向你敞開懷抱。
【運(yùn)用技法】
1.可以論證能夠反思是有理性的表現(xiàn)的觀點(diǎn)。
2.可以論證不斷反思,才能不斷完善,在反思中尋求進(jìn)步的觀點(diǎn)。
3.可以告訴、提醒人們反思不能怕痛苦。
【相關(guān)名言素材】
要留心,即使當(dāng)你獨(dú)自一人時(shí),也不要說壞話或做壞事,而要學(xué)會(huì)在你自己面前比在別人面前更加知恥。 ―――德謨克利特
自重、自覺、自制,此三者可以引至生命的崇高境域。
―――丁尼生
要讓我寫自己的歷史,我就寫我的錯(cuò)誤。
―――
我們走過了很多彎路,企業(yè)的創(chuàng)業(yè)者和經(jīng)營(yíng)者對(duì)此都要深刻反思。 ―――王選
人不能沒有批評(píng)和自我批評(píng),那樣一個(gè)人就不能進(jìn)步。
―――
被人揭下面具是一種失敗,自己揭下面具是一種勝利。
―――雨果
自滿、自高自大和輕信,是人生的三大暗礁。
―――巴爾扎克
1、《雅舍小品》中的作品,是名副其實(shí)的小品,雖是“隨想隨寫”,但寫來(lái)清新雋永。內(nèi)容涉及的題材都是平凡不過,普通人不大注意的,但在作者的筆下卻別饒趣味,令人讀後有深得我心之感??梢娮髡擢?dú)有的智慧和過人的洞察力。
2、《雅舍小品》所寫的題材雖屬于生活瑣事,但寫來(lái)卻不會(huì)淡如白開水,也不會(huì)板滯如流水賬。梁實(shí)秋的散文,能在平凡中顯真誠(chéng),于小節(jié)處蘊(yùn)含哲理,是智慧之作。他的文章最合乎知識(shí)分子的品味和格調(diào),既博且雅,一派從容,篇幅雖不長(zhǎng),但卻令人在最短時(shí)間內(nèi)去體會(huì)人生,參悟智慧。他的文章,親切易讀,任何年齡的讀者,都會(huì)在他那圓熟,幽默和趣味的文字功力上獲益。
3、梁實(shí)秋具有深厚的中國(guó)文學(xué)基礎(chǔ),又精研西洋文學(xué),在作品中往往流露出西方隨筆式的從容與優(yōu)雅,雖然生活點(diǎn)滴都可入文,但下筆卻是最道地的中文,在溫柔敦厚中又能力求儒雅簡(jiǎn)潔,絕無(wú)生硬歐化的痕跡。
(來(lái)源:文章屋網(wǎng) )
臺(tái)灣的“忘樂小集”藝術(shù)團(tuán)就是以這樣豐富的茶藝展示,讓品茗者于觀賞茶器、聞茶香、品茶味、聽茶聲中進(jìn)入茶藝世界。
“忘樂小集”:充滿禪意的演出
1993年創(chuàng)辦的“忘樂小集”,主要由音樂家、書畫家、茶師、戲曲家與花藝家組成,他們以充滿禪意的演出形式,已在海內(nèi)外演出200多場(chǎng),均受好評(píng)。2000年在紐約戶外演出,觀眾有1300多人,90%是洋人,許多人有一種相見恨晚的感覺。
“茶與樂的對(duì)話”是“忘樂小集”最為人熟知的表演節(jié)目,依不同茶種的特性配合不同樂曲詮釋生命情懷。以深厚的中華文化傳統(tǒng)為基礎(chǔ),用現(xiàn)代的形貌展現(xiàn)。
“忘樂小集”的創(chuàng)辦人林谷芳目前任職臺(tái)灣佛光大學(xué)藝術(shù)研究所所長(zhǎng),是知名的文化評(píng)鑒家。他介紹說,茶文化已成為臺(tái)灣文化中極具特質(zhì)的一環(huán),在世界上堪稱標(biāo)桿水準(zhǔn)?!安枧c樂的對(duì)話”是借音樂與茶之內(nèi)含屬性,如生命階段、四時(shí)節(jié)氣、山水傾向、陰陽(yáng)風(fēng)格等為坐標(biāo),將相同性格的茶與音樂結(jié)合,配以插花藝術(shù)來(lái)體驗(yàn)生命禪境。以茶顯樂,以樂映茶,讓參與者由聽覺、味覺及視覺的結(jié)合觀賞進(jìn)入藝術(shù)世界。
“茶與樂的對(duì)話”讓觀眾可以沉浸在樂曲營(yíng)造的意境里品佳茗,領(lǐng)略臺(tái)灣茶文化。林谷芳指出,整合性的藝術(shù)形式在東方是由來(lái)已久的傳統(tǒng),例如中國(guó)古代文人的文會(huì)雅集,賦詩(shī)吟唱的同時(shí)也品茗賞藝。臺(tái)灣著名戲曲說唱藝術(shù)家林文彬現(xiàn)為臺(tái)北曲藝團(tuán)藝術(shù)總監(jiān),他曾赴北京、天津研習(xí)說唱藝術(shù),遍訪名師,是目前臺(tái)灣中生代說唱藝術(shù)家中的翹楚。演出的曲目還包括“鳥投林”、“牧民新歌”、“少年行”、“漁歌”、“姑蘇行”、“餞別”、“霸王卸甲”及“秦腔主題隨想曲”,樂器有粵胡、笛、箏、揚(yáng)琴、琵琶、高胡、二胡等。
“茶與樂的對(duì)話”:琴棋書畫詩(shī)酒花
2006年?!巴鼧沸〖痹鴳?yīng)邀在紐約演出,演出以國(guó)樂小合奏“松青夜游”拉開了序幕,“忘樂小集”創(chuàng)辦人林谷芳教授介紹說,臺(tái)灣的茶藝起源于明朝,有著豐富的內(nèi)涵,其茶器、茶種、茶湯、泡茶手法都非常講究。茶人希望品茶者能在賞茶器、聞茶香、品茶味、聽茶聲中,進(jìn)入茶的心靈世界。茶客來(lái)時(shí),茶人以禮相待,捧上一杯泉水,讓客人飲水凈口,順應(yīng)了老子的“至善若水”的人生觀。
舞臺(tái)的左邊的一角,擺著示范茶桌。茶桌上擺著精致的小花瓶。插著鮮花。呈現(xiàn)茶人插花藝術(shù)及茶室高雅氣氛。在廣東音樂“鳥投林”粵胡聲中,茶桌邊坐著一位茶客,一位茶人。茶人向茶客展示茶種,讓茶客聞茶香,以表示對(duì)客人的尊重。林谷芳說上半場(chǎng)介紹的是文山包種茶,此茶色澤翠綠,香氣幽雅,給人以青葉綠意之感,使人想到明媚的春天,想到年華正茂的青年時(shí)代,又感到身在山澗泉水中,又似面對(duì)溫柔豆蔻少女。他說,這是年輕人喜歡飲的茶,常常是很多人在一起時(shí)喝的茶,所以演奏了歡快的國(guó)樂“鳥投林”、“牧民新歌”、“漁歌”及吟唱了著名詩(shī)人李白的詩(shī)作“少年行”。