動物免疫的方法精選(九篇)

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第1篇：動物免疫的方法范文

[關(guān)鍵詞]免疫血清；免疫；免疫學(xué)試驗；效價

[中圖分類號]R392.7

[文獻標識碼]B

[文章編號]1674-4721(2009)12(b)-139-02

動物免疫血清的制備是一項常用的免疫學(xué)實驗技術(shù)，廣泛用于臨床診斷、治療和預(yù)防中，為教學(xué)、科研、檢驗之常用。在醫(yī)學(xué)免疫學(xué)教學(xué)中，形象、直觀、簡易的直接凝集反應(yīng)有助于學(xué)生了解抗原、抗體及抗原抗體間的免疫反應(yīng)等抽象的概念，免疫血清的質(zhì)量直接影響實驗的特異性和敏感性。因此，制備高質(zhì)量的免疫血清是建立高水平檢測方法的前提條件。但免疫血清的制備較復(fù)雜，且需學(xué)生動手操作，用量較大，為達到這一目的，除了具備理想的免疫原外，還需要選擇適宜的動物和設(shè)計有效可行的免疫程序或方案。通過多年的工作實踐，筆者制備了高效價、高特異性、高親和性的動物免疫血清，既經(jīng)濟又方便，供教學(xué)、科研所用，提高了實驗的開出率。

1　方法與結(jié)果

1.1　動物的選擇及飼養(yǎng)

制備抗血清的動物主要是哺乳類和禽類。羊、馬、豚鼠、兔都是常用的動物，在實驗中，選擇動物時應(yīng)考慮抗原與動物的種屬關(guān)系、抗原性質(zhì)與動物種類、免疫血清的需要量、要求以及動物個體等因素。因不同動物對同一抗原的敏感性不同，免疫時至少取用2只以上動物。選擇制備免疫血清的動物必須是適齡、健壯、無感染的正常動物，體重最好在2～3 kg，年齡6個月以上，因雌性動物在性周期的不同階段和懷孕、授乳時機體對抗原的敏感性有較大改變，所以一般挑取雄性動物。動物免疫后要認真做好動物的編號、標記、管理和記錄，本實驗用的動物是健康家兔。

1.2　抗原的制備

1.2.1　抗原稀釋

用滅菌生理鹽水將抗原稀釋為2mg／ml，放置4℃過夜，次日取出，與佐劑混合制成乳劑后用于動物免疫。免疫原的注射劑量隨抗原的性質(zhì)有較大差異。一般考慮抗原的免疫原性的強弱、分子量大小、抗原的純度、有無毒性及動物個體狀態(tài)、免疫途徑和時間、佐劑的使用與否等。對于純的可溶性抗原，免疫時需與等量的弗氏完全佐劑混合，其免疫劑量以動物體重計算，一次注入的總劑量以0.5 mg／kg為宜。通常免為100～1000μg／次。另外免疫周期長者可少量多次注射，免疫周期短者可大量少次注射制備高度特異性的抗血清，選用低劑量抗原短程免疫法。

免疫周期隨抗原和免疫方法的不同以及是否使用佐劑而變化。單次注射抗體產(chǎn)生緩慢，效價低，維持時間短，但抗體特異性高；多次注射無以上缺點，但抗體特異性有所降低，一般以3～4次較合適。注射間隔時間一般以1～2周為宜。間隔時間短，起不到再次免疫的作用；太長，則免疫過程延長，從而影響血清的特異性，如無佐劑時間隔2～4d，加用佐劑時可間隔10～30d。初次免疫與第二次免疫的間隔時間多為2～4周，此后，每次加強免疫的間隔時間為2～3周。

1.2.2　佐劑和抗原乳劑的配制

1.2.2.1　佐劑的配制。弗氏完全佐劑，各實驗室的配方不盡相同，我室采用的配方如下：醫(yī)用液體石臘20 ml與羊毛脂12g混勻加熱溶化，分裝于青霉素小瓶，用紗布、線繩扎緊瓶塞。高壓滅菌，4℃保存?zhèn)溆谩Ｓ诿庖咔皽蕚淇乖閯┲苽鋾r，以活卡介苗代替死結(jié)核菌，每毫升試劑中加入10mg活卡介苗，即為弗氏完全佐劑。

1.2.2.2　抗原乳劑的制備。本實驗選用注射器推注法：將抗原溶液和等量的完全佐劑(注意佐劑必須先加熱融化。不超過50℃)分別吸入兩個5 ml注射器內(nèi)，在兩個注射器的12號針頭間用一根長約8-12 cm的醫(yī)用無毒塑料管。將兩個注射器連接在一起(塑料管必須浸泡消毒與注射器針頭相連接)。針頭塑料管1～2 cm然后兩人相對而坐。緩緩?fù)苿俞標?，使管?nèi)溶液進入塑料管道至對側(cè)注射器內(nèi)，每次必須把管內(nèi)容物全部推出，另一側(cè)同樣操作，使管內(nèi)液體往返混合直至形成油包水乳劑為止。

制成的乳劑是否形成油包水乳劑直接影響免疫效果，因此，必須進行質(zhì)量檢查。檢查的方法：將制成的乳劑滴在涼的自來水表面，質(zhì)量合格的乳劑滴入水面保持乳滴珠完整而不分散；如進入水面后立即擴散，水面油花逐漸擴大即不合格，應(yīng)繼續(xù)乳化至合格為止。

1.3　免疫途徑、注射時間、部位及劑量

不同的免疫途徑，抗原在體內(nèi)的的代謝速度不同，對免疫系統(tǒng)的刺激強弱也就不同，因而產(chǎn)生抗體的水平也就不同?？乖淖⑸渫緩娇筛鶕?jù)免疫動物個體的大小、抗原及抗體制備目的或要求不同，選用皮內(nèi)、皮下、肌肉、靜脈或腹腔等不同途徑免疫。本實驗對家兔使用皮內(nèi)和皮下多點注射。第1周在足、掌皮內(nèi)注射含佐劑抗原0.1ml，第2周在腹部皮下注射含佐劑抗原0.5 ml，第3周在腹部皮下注射不含佐劑抗原0.5 ml，第4周在腹部皮下注射不含佐劑抗原0.5 ml。

1.4　試血及測定抗體效價

末次注射10 d后于耳靜脈采血2 ml，分離血清進行試血。筆者選用免疫雙擴散法在56℃條件下加熱30 min滅活補體。在瓊脂板中間孔加稀釋的抗原10μl( mg／ml)，周圍孔依順時針方向，分別加入用生理鹽水或PBS按1：2，1：4，1：8，1：16，1：32和1：64的比例稀釋的動物免疫血清。經(jīng)37℃保溫24 h后觀察結(jié)果，效價在1：16以上即可決定采血。選用環(huán)狀沉淀試驗將一定濃度的抗原200μl加入到環(huán)狀沉淀管中，然后在抗原液面上加入稀釋的免疫血清，如在20 min內(nèi)，抗原與血清的交界面能出現(xiàn)“++”的沉淀環(huán)，以沉淀環(huán)的直徑、大小來判斷效價的高低。一般效價高達1：2040以上才可放血。

1.5　取血、分離、分裝及保存

免疫動物經(jīng)效價檢測合格后即可考慮取血。為減少血清中的脂肪含量，放血前可考慮停食12 h。本實驗采用心臟穿刺取血，無菌技術(shù)進行操作，動物于仰臥位固定，用食指探明心臟博動量高部位，剪去少許毛。用2.5％碘酒和75％酒精消毒后，以9號針頭在預(yù)定位置與胸部呈45。角刺入心臟，微微上下移動針頭，待血液進入針筒后，即將注射器位置固定取血。2.5kg體重的家兔一次可取血20～30ml。取血后由靜脈緩緩注入等量5％葡萄糖液以補足失血量。取血的兔子經(jīng)2～3個月休息?？稍俅渭訌娒庖吆笕⊙?/p>

1.6　分離血清及免疫血清的保存

無菌條件下將平皿或三角瓶內(nèi)的血液凝固血塊收縮后，用無菌滴管吸取血清，于3 000 rpm離心15 min。取上清液。合格后的抗血清以1：100比例加入1％的硫柳汞或5％的疊氮鈉，最后濃度分別為0.01％或0.05％，用無菌滴管將抗血清分裝小管，每管裝1ml左右。-20℃以下保存，可保存2年以上。如有條件可將血清冷凍干燥保存于4℃以下冰箱。保存時間更久。

第2篇：動物免疫的方法范文

（兵團第六師五家渠市畜牧獸醫(yī)工作站，新疆五家渠831300）

收稿日期：2014—11—24

摘要：實施動物強制免疫是國家預(yù)防控制重大動物疫病的有效手段之一。本文對六師轄區(qū)內(nèi)畜禽實施口蹄疫、高致病性禽流感、豬瘟、高致病性豬藍耳病和小反芻獸疫強制免疫抗體檢測不合格單位進行了走訪調(diào)查，查找并分析了影響動物免疫水平的相關(guān)因素，為今后進一步做好重大動物疫病防控工作提供參考。

關(guān)鍵詞 ：動物疫病；免疫；調(diào)查

近年來，隨著畜牧業(yè)的快速發(fā)展，新的動物疫病不斷發(fā)現(xiàn)、傳入，高致病性禽流感、小反芻獸疫、高致病性豬藍耳病、口蹄疫A型等傳染病先后發(fā)生流行。嚴重影響了畜牧產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，給我國養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大經(jīng)濟損失[1]。我國高度重視動物疫病防控工作，動物疫病實行預(yù)防為主的方針，有計劃的實施動物疫病控制、消滅和凈化工作。

六師對轄區(qū)內(nèi)畜禽實施口蹄疫、高致病性禽流感、豬瘟、高致病性豬藍耳病和小反芻獸疫按照重大動物疫病強制免疫的要求，在3月、7月、11月開展集中免疫，月月補免，新生畜、補欄畜禽及時實施初免和加強免疫，應(yīng)免畜禽100%免疫，常年免疫密度達90%以上。并對口蹄疫、高致病性禽流感等免疫情況進行抗體檢測，評價免疫效果，要求口蹄疫、高致病性禽流感等免疫抗體合格率達70%以上。通過檢測，口蹄疫、高致病性禽流感等個體免疫合格率基本上達到了70%以上，但是部分檢測場點合格率低于70%。對此，我們對免疫抗體檢測不合格單位進行了走訪調(diào)查，查找并分析了影響動物免疫抗體產(chǎn)生的相關(guān)因素，現(xiàn)總結(jié)如下。

1漏免

動物流動性大，調(diào)運頻繁，導(dǎo)致部分動物沒能及時免疫。尤其是一些專門從事活畜買賣的活動者，他們根據(jù)活畜交易價格進行靈活交易，其飼養(yǎng)活畜的時間長短不一，而動物防疫采取的是定期免疫，易導(dǎo)致漏免。而且，受養(yǎng)殖場舍建設(shè)條件限制，已免動物和未免動物混群飼養(yǎng)。隨機采樣時，未免動物的樣品占到一定比例，從而導(dǎo)致免疫群體免疫合格率低，還有一部分動物在免疫過程中由于保定不徹底，逃脫免疫，采樣時采集到該動物樣品，也降低了免疫合格率。

2實際免疫情況不詳

《動物防疫法》規(guī)定，飼養(yǎng)動物的單位和個人應(yīng)該履行動物防疫義務(wù)，即畜主作為防疫主體，有義務(wù)做好動物防疫工作。獸醫(yī)機構(gòu)對其進行技術(shù)指導(dǎo)、培訓(xùn)、宣傳教育和監(jiān)督。而當前的現(xiàn)狀是，大型的、公司化運作的養(yǎng)殖企業(yè)，有專職的防疫人員開展免疫工作，中、小規(guī)模養(yǎng)殖場、散養(yǎng)戶仍然依賴獸醫(yī)站人員為其實施免疫。防疫人員在任務(wù)量大時，把疫苗交給養(yǎng)殖戶，由養(yǎng)殖戶自己免疫。在監(jiān)管不力時，不管養(yǎng)殖企業(yè)，還是中、小規(guī)模養(yǎng)殖場、散養(yǎng)戶，其免疫是否實施，免疫時間、免疫數(shù)量、免疫劑量等不得而知。另外，由于工作待遇較低，防疫任務(wù)繁重，防疫員工作積極性受到影響，個別防疫員免疫工作不到位。

3疫苗質(zhì)量問題

目前市售疫苗廠家多，疫苗品種、類型繁多，有單苗、雙價苗、聯(lián)苗，有滅活苗、弱毒苗，也有合成肽疫苗、基因工程疫苗等，可能部分批次的疫苗質(zhì)量存在問題。筆者曾遇到一起疫苗質(zhì)量事件，某口蹄疫A型疫苗，外觀、包裝完好，且按照要求保存，在第一次吸取液體后，剩余液體出現(xiàn)分層現(xiàn)象。近年來，牛、羊口蹄疫O型和亞I型免疫抗體檢測出現(xiàn)以下情況：牛、羊口蹄疫O型免疫抗體檢測均合格的單位，其亞I型免疫抗體檢測卻不合格；或者出現(xiàn)牛、羊口蹄疫O型、亞I型免疫抗體檢測均合格的單位，其口蹄疫O型免疫抗體檢測合格的數(shù)量要比亞I型多，二者免疫合格率相差較大，認為也可能是疫苗的質(zhì)量問題。

另外，未按照疫苗保存溫度要求保存，滅活疫苗緊貼冰箱內(nèi)壁結(jié)冰；或冷凍疫苗未用疫苗專用車輛運送，造成疫苗有效成分下降、失活，都會影響免疫質(zhì)量。

4免疫操作不當

常用疫苗免疫方法有注射免疫、飲水免疫、滴鼻和點眼等方法。不管使用那種免疫方法進行免疫，如果操作不當，就會造成疫苗污染、免疫劑量不足等問題，導(dǎo)致機體產(chǎn)生的抗體水平低下。另外，如果免疫器械受損，未能及時進行檢查和更換，將直接導(dǎo)致免疫劑量不足，影響免疫抗體水平。

5免疫期過長

動物在免疫后免疫抗體水平呈上升趨勢，當達到一定水平后會維持一段時間，之后逐漸下降[1]。因此，免疫期長，免疫抗體效價也越低，免疫合格率就會越低。以小反芻獸疫為例，2014年1月份實施緊急免疫接種，3月份檢測，免疫合格率達到70%以上，8月份檢測，免疫合格率僅為60%。免疫合格率下降了10%，如果不進行加強免疫，在以后的檢測中，小反芻獸疫免疫抗體水平還會下降。

6個體差異

部分牲畜體質(zhì)虛弱，免疫后不能很好的產(chǎn)生免疫抗體。部分牲畜有免疫耐受性，疫苗免疫不敏感，導(dǎo)致免疫抗體處于低水平狀態(tài)。

7未加強免疫

按照免疫程序，新生畜禽在初免后，間隔1個月時間應(yīng)實施加強免疫，且劑量加倍。但是調(diào)查發(fā)現(xiàn)，部分畜禽沒有很好地實施加強免疫。尤其是在小規(guī)模肉雞飼養(yǎng)場，由于飼養(yǎng)周期短，受其它疫苗免疫程序影響，禽流感H5N1亞型滅活疫苗只免疫1次。與加強免疫的群體抗體效價和免疫合格率相比，其免疫效價和免疫合格率均低于加強免疫的樣品。

8應(yīng)激反應(yīng)

在實施免疫時，畜禽很容易受到高溫天氣、驚嚇、保定、劇烈運動等因素的影響，發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)。另外，疫苗免疫也是一種應(yīng)激因素。發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)會影響機體免疫系統(tǒng)和功能，降低機體防衛(wèi)能力，造成免疫抑制。同時，防衛(wèi)機能減弱，容易引發(fā)其它疾病發(fā)生，也可造成免疫抑制。

9免疫抑制性疾病

免疫抑制性疾病不僅引起原發(fā)感染和繼發(fā)感染，而且損害機體免疫功能，導(dǎo)致免疫耐受、免疫麻痹，降低疫苗免疫應(yīng)答能力，甚至不產(chǎn)生免疫應(yīng)答，致免疫失敗。如豬病有繁殖障礙和呼吸障礙綜合征、豬圓環(huán)病毒II型、豬瘟、偽狂犬病、豬氣喘病等，雞病有傳染性法氏囊病、馬立克氏病、雞傳染性貧血病、禽白血病等。

參考文獻

[1]胡輝忠.湟中縣重大動物疫病防控現(xiàn)狀調(diào)查與思考[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊， 2012（2）： 69-70.

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第3篇：動物免疫的方法范文

【關(guān)鍵詞】 ，，重癥肌無力;受體，膽堿能;小鼠，轉(zhuǎn)基因

［摘要］ ［目的］ 探討電鰩乙酰膽堿受體誘導(dǎo)人免疫球蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠實驗性自身免疫性重癥肌無力的機制. ［方法］ 將電鰩電器官分離并純化的乙酰膽堿受體作為免疫原，免疫人免疫球蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠，以放射免疫方法測定小鼠血清中抗乙酰膽堿受體抗體滴度，以免疫熒光技術(shù)觀察小鼠骨骼肌中抗乙酰膽堿受體抗體的結(jié)合性. ［結(jié)果］ 小鼠血清中的抗乙酰膽堿受體抗體滴度為155～539pmol，小鼠肌肉中具有人抗乙酰膽堿受體抗體. ［結(jié)論］ 電鰩乙酰膽堿受體刺激人免疫球蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠產(chǎn)生的人抗乙酰膽堿受體抗體，可與肌肉組織中的乙酰膽堿受體結(jié)合，導(dǎo)致肌肉收縮無力，可誘導(dǎo)重癥肌無力.

［關(guān)鍵詞］ 重癥肌無力;受體，膽堿能;小鼠，轉(zhuǎn)基因

ABSTRACT:OBJECTIVE To investigate the pathogenesis of experimental autoimmune myasthenia gravis（EAMG），induced with Torpedo acetylcholine receptor（AChR），in mice transgenic for human immunoglobulin（Ig）loci.METHODS Mice transgenic for human Ig loci were immunized with Torpedo AChR，isolated and purified from electronic organs of Torpedo.The titers of anti-mouse AChR antibody in the sera of mice were determined by radioimmunoassay.The binding of human anti-AChR antibodies to the AChR in the muscle of mice was measured by immunofluorescence technique.RESULTS The titers of anti-mouse AChR antibodies in the sera ranged from155to539pmol.The human anti-AChR antibodies were found to bind to the muscle section.CONCLUSION The human anti-AChR antibodies，secreted from the mice transgenic for human Ig loci，induced with Torpedo AChR，are able to bind to AChR in the mouse muscles，which leads to the damages of AChR，resulting in the animal EAMG.

Key words:myasthenia gravis;receptors，cholinergic;mice，transgenic

抗乙酰膽堿受體抗體與神經(jīng)肌肉接頭處的乙酰膽堿受體結(jié)合，可激活補體而使突觸后膜乙酰膽堿受體遭到破壞，導(dǎo)致肌肉收縮無力，出現(xiàn)重癥肌無力癥狀.引起重癥肌無力的病因目前尚不清楚，但若給動物免疫乙酰膽堿受體或注射抗乙酰膽堿受體抗體，可引發(fā)實驗性自身免疫性重癥肌無力 ［1，2］ .在以乙酰膽堿受體作為免疫原建立重癥肌無力動物模型中，常用由電鰩電器官制備的乙酰膽堿受體，是因為電鰩的乙酰膽堿受體含量及與哺乳類動物骨骼肌乙酰膽堿受體的同源性均較高 ［3］ .電鰩乙酰膽堿受體刺激動物產(chǎn)生的抗電鰩乙酰膽堿受體抗體可與動物本身骨骼肌的乙酰膽堿受體進行交叉反應(yīng).本實驗室曾報道了以電鰩乙酰膽堿受體免疫人免疫球蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠建立重癥肌無力動物模型 ［4］ ，其中發(fā)現(xiàn)實驗動物出現(xiàn)重癥肌無力的關(guān)鍵癥狀，即肌肉收縮無力，血清中亦檢測到了抗電鰩乙酰膽堿受體抗體.本文探討了電鰩乙酰膽堿受體誘導(dǎo)人免疫球蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠實驗性自身免疫性重癥肌無力的機制.

1 材料與方法

1.1 材料 含人免疫球蛋白μ，γ1，κ胚系基因的轉(zhuǎn)基因小鼠由荷蘭馬斯特里赫特大學(xué)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)學(xué)系神經(jīng)免疫學(xué)實驗室根據(jù)文獻［5，6］介紹的方法建立.電鰩乙酰膽堿受體由本實驗室從電鰩電器官（Pacific Biomarine，California，USA）中分離，并經(jīng)眼鏡蛇毒素親和層析純化獲得 ［7］ ; 125 I-α-銀環(huán)蛇毒素為英國Amersham Pharmacia Biotech公司產(chǎn)品;小鼠乙酰膽堿受體粗提液由本實驗室從小鼠骨骼肌中提取;羊抗人免疫球蛋白血清為本實驗室自制;羊抗人免疫球蛋白G購自美國Cappel，ICN Pharma-ceuticals公司，用時以1∶100稀釋;異硫氰酸熒光素標記的兔抗羊免疫球蛋白抗體購自德國Cappel，ICN Biochemicals公司，用時以1∶50稀釋.

1.2 動物的免疫 15μg純化的電鰩乙酰膽堿受體中加入完全弗氏佐劑，注射于9只小鼠尾根部皮下，3，5周后分別以15μg純化的電鰩乙酰膽堿受體加入不完全弗氏佐劑行加強免疫;對照組3只小鼠只注射完全弗氏佐劑或不完全弗氏佐劑.

1.3 抗乙酰膽堿受體抗體的測定 應(yīng)用放射免疫方法測定小鼠血清中抗乙酰膽堿受體抗體的滴度. 將2nmol25 I-α-銀環(huán)蛇毒素混合入200μL小鼠乙 酰膽堿受體粗提液內(nèi)，在4℃條件下標記4h，加入5μL動物血清，4℃過夜，以過量的羊抗人免疫球蛋白血清沉淀小鼠乙酰膽堿受體-抗體復(fù)合物，用磷酸鹽緩沖液洗滌后，在γ計數(shù)儀上測定放射比活性.抗體滴度用每升α-銀環(huán)蛇毒素結(jié)合摩爾數(shù)表示.

轉(zhuǎn)貼于

1.4 骨骼肌抗乙酰膽堿受體抗體結(jié)合性測定 應(yīng)用免疫熒光技術(shù)觀察小鼠骨骼肌中抗乙酰膽堿受體抗體的結(jié)合性.將小鼠骨骼肌冰凍切片并以丙酮固定后，用20g/L牛血清白蛋白封閉15min，加入羊抗人免疫球蛋白G，作用45min，洗滌，加入異硫氰酸熒光素標記的兔抗羊免疫球蛋白抗體，繼續(xù)作用45min，觀察結(jié)果.

2 結(jié)果

2.1 小鼠血清抗乙酰膽堿受體抗體滴度 在行第2次加強免疫注射電鰩乙酰膽堿受體3d后，心臟穿刺采血，檢查血清中抗體滴度.9只實驗小鼠的抗乙酰膽堿受體抗體滴度為155～539pmol（Fig1）.

2.2 骨骼肌抗乙酰膽堿受體抗體的結(jié)合 免疫熒光觀察結(jié)果表明，小鼠肌肉冰凍切片中可見抗乙酰膽堿受體抗體（Fig2略）.

3 討論

自從1973年P(guān)atrick和Lindstrom ［8］ 應(yīng)用電鰻乙酰膽堿受體免疫家兔建立第一個重癥肌無力動物模型以來，已經(jīng)在小鼠、大鼠、豚鼠、猴及豬等多種動物中成功地建立了重癥肌無力模型，為研究重癥肌無力的發(fā)病機制和免疫治療提供了有效途徑.制作出與人重癥肌無力更為接近的實驗性自身免疫性重癥肌無力動物模型已成為緊迫的研究課題.較為理想的動物模型應(yīng)含有人免疫球蛋白、主要組織相容性抗原和乙酰膽堿受體基因.1994年Lonberg等 ［5］

建立了表達人免疫球蛋白的轉(zhuǎn)基因小鼠，這使制作 這種新的重癥肌無力動物模型成為可能.人免疫球蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠無論接受何種乙酰膽堿受體的免疫刺激，均將產(chǎn)生人免疫球蛋白，得到的重癥肌無力動物模型在免疫學(xué)方面更接近人重癥肌無力.本研究結(jié)果表明，人免疫球蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠在接受電鰩乙酰膽堿受體刺激后，小鼠血清中抗乙酰膽堿受體抗體滴度在155～539pmol范圍內(nèi)，僅為抗電鰩乙酰膽堿受體（免疫原）抗體滴度（6～296nmol） ［4］ 的0.2%，與Berman等 ［9］ 研究結(jié)果相一致.免疫熒光觀察證實，小鼠肌肉中存在人抗乙酰膽堿受體抗體.上述結(jié)果表明，電鰩乙酰膽堿受體作為免疫原，可刺激人免疫球蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠產(chǎn)生人抗乙酰膽堿受體抗體，它可與肌肉組織中乙酰膽堿受體結(jié)合，導(dǎo)致乙酰膽堿受體功能失調(diào)，最終誘導(dǎo)實驗性自身免疫性重癥肌無力.人免疫球蛋白轉(zhuǎn)基因小鼠實驗性自身免疫性重癥肌無力動物模型的建立及其機制的闡明，為研究制作理想的重癥肌無力動物模型奠定基礎(chǔ)，亦為獲得人源性抗乙酰膽堿受體單克隆抗體及基因工程抗體提供了新的途徑.

［參 考 文 獻］

［1］ Meng F，Stassen M，Schillberg S，et al..Constructionand characterization of a single chain antibody fragment derived from thymus of a patient with myasthenia gravis ［J］.Autoimmunity，2002，35:125.

［2］ De Baets M，Stassen M.The role of antibodies in myas- thenia gravis［J］.J Neurol Sci，2002，202:5.

［3］ Lennon VA，Lindstrom JM，Seybold ME.Experimental autoimmune myasthenia:a model of myasthenia gravis in rats and guinea pigs［J］.J Exp Med，1975，141:1365.

［4］ 李紅花，金桂花，孟繁平，等.重癥肌無力轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立［J］. 延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報 ，2006，29（2）:79.

［5］ Lonberg N，Taylor LD，Harding FA，et al..Antigen- specific human antibodies from mice compressing four distinct genetic modifications［J］.Nature，1994，368:856.

［6］ Fishwild DM，O'Donnell SL，Bengoechea T，et al.. High-avidity IgGκmonoclonal antibodies from a novel strain of minilocus transgenic mice［J］.Nat Biotechnol， 1996，14:845.

［7］ 楊康鵑，孟繁平，de Baets M.電鰩乙酰膽堿受體的分離 和純化［J］. 延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報 ，2004，27（1）:5.

第4篇：動物免疫的方法范文

【關(guān)鍵詞】動物吸傷;傷口處理;注射狂犬疫苗;免疫球蛋白血清

動物咬傷是門診常見疾病，而寵物、家畜等溫血動物咬傷或抓傷可以引起人畜共患的疾病，如狂犬病，鑒于狂犬病的100%致死性和暴露后處置的安全性，傷口的處理尤為重要，現(xiàn)報告如下：

1臨床資料

1.1 一般資料:全部傷者來自2008.3.13-2011.5.30本院門診病人，男142例，女89例，年齡1-5歲20人，6-14歲64人，15-60歲138人，60歲以上9人。致傷動物：貓20例，狗196例，鼠1例，猴1例，兔1例。處理時間：1小時處理198例，4小時處理23例，8小時處理25例，≥24小時處理：2例。傷勢程度：II期228例，III期3例，縫合2例，全部狗咬，1例肌注免疫球蛋白，肌注破傷風(fēng)112例，肌注狂犬疫苗231例:其中1小時內(nèi)肌注113例，1-8小時內(nèi)62例，8-24小時51例，24小時以上5例。

1.2處理方法：傷口用皂水或肥皂、流動水徹底沖洗，無論是否自行處理經(jīng)傷口，未結(jié)痂，處理至少15分鐘，由醫(yī)務(wù)人員規(guī)范處理，用生理鹽水將傷口洗凈，然后用干菌脫脂棉將傷口處殘留液吸盡，避免在傷口處理留肥皂水，較深傷口清洗時，用注射器插入傷口深部進行灌注清潔，做得全面徹底，傷口較大時可使局部麻后進行沖洗，傷口深時應(yīng)用雙氧水，最后碘伏或碘酒進行消毒。2例顏面部給予縫合，3例給予5天靜滴抗生素防感染，10例給予抗生素口服。1例處理傷口用免疫球蛋白在傷口及周圍作浸潤注解。

2結(jié)果

傷口全部治愈，無并發(fā)癥，1例肌注狂犬疫苗后發(fā)熱39。C，給予對癥處理。隨訪無并發(fā)癥。

3討論

討論：狂犬病是引起人類共的急性傳染病，狂犬病在人體內(nèi)潛伏期可以是幾天長至數(shù)年，發(fā)病后病程進度較快，一般1月患者即痛苦地死亡，死亡率高達100%，狂犬病疫苗的使用對減少狂犬病的發(fā)生起到了至關(guān)重要的使用。

3.1狂犬病預(yù)防:

表1 WHO推薦的暴露后治療指南

3.2及時處理傷口:盡快用20%肥皂水或0.1%新潔爾滅反復(fù)沖洗，辦求去除狗涎，擠出污血。如果是穿通傷口，應(yīng)用插管插入傷口內(nèi)，用注射器灌清水沖洗，沖洗后用5%碘酊反復(fù)燒灼傷口。除非傷口大血管需緊急止血外，即使傷口深大，也不應(yīng)縫合、包扎。對傷口周圍的皮膚有針刺，盡量擠壓出血或用火罐拔毒，。切忌用嘴吮吸傷口，以防止口腔黏膜感染。嚴重咬傷及傷口靠近頭部的病人，用抗狂犬病免疫血溥 或免疫球蛋白在傷口及周圍作浸潤注射。此外，需要防止細菌感染或破傷風(fēng)[1]。

3.3狂犬疫苗接種:我國對暴露后接種的方案為：一般咬傷按5針法免疫（0、3、7、14、28天各接種1針），嚴重咬傷者應(yīng)于第0、3天加倍量注射。疫苗應(yīng)在上臂三角肌肌內(nèi)注射，兒童應(yīng)在大腿前外側(cè)區(qū)肌內(nèi)注射，嚴禁臀部注射。

對于某些免疫低下和特殊人群應(yīng)在首針注射加倍或3倍劑量注射，如：注射疫苗前1個月內(nèi)注射過免疫球蛋白或抗血清；慢性病病人如肝硬化；先天性或獲得性免疫缺陷病病人；接受免疫抑制藥物（包括皮質(zhì)類固醇和抗瘧疾藥物）病人；老年人；暴露后48小時更長時間接種疫苗者；嚴重營養(yǎng)不良者。由于狂犬病的潛伏期很長，因此對暴露后已過數(shù)月者也應(yīng)與剛被暴露者一樣以相同方案接種疫苗。

關(guān)于禁忌證的問題，專家認為因為狂犬病是致死的疾病，對高度危險的暴露者由于某種原因而不給予全程治療的做法應(yīng)慎重考慮?；颊邔σ环N疫苗發(fā)生過敏反應(yīng)可以改用另一種類型的疫苗。只有在接種疫苗后出現(xiàn)無法控制的嚴重過敏反應(yīng)時才能中斷疫苗接種。有嚴重變態(tài)反應(yīng)史的患者接種疫苗時應(yīng)備有腎上腺素。孕婦不應(yīng)作為狂犬病疫苗接種的禁忌證。對于一般患者必須給予全程足量的疫苗免疫[2]。

3.4狂犬人免疫球蛋白 狂犬人免疫球蛋白主要用于接觸狂犬病動物對象的預(yù)防，被病犬2咬傷后立即按每公斤體重肌內(nèi)注射20IU狂犬人免疫球蛋白，若與狂犬疫苗聯(lián)合使用，效果更好。在預(yù)防狂犬病過程中，疫苗可作為重要補充，生效快，使用安全可靠，不會引起變態(tài)反應(yīng)[3]。

4動物咬傷處理應(yīng)注意

4.1動物咬傷，會造成狂犬病的傳染，可疑動物、溫血動物、野生動物、嚙齒動物、貓、蝙蝠等，一定要接種疫苗。

4.2可疑動物舔傷抓傷，傷口處理是預(yù)防狂犬病的關(guān)鍵，傷口處理愈早愈好。

4.3預(yù)防傷口較深、較寬可給予破傷風(fēng)疫苗，狂犬病疫苗、狂犬病等免疫球蛋白的預(yù)防。在經(jīng)濟條件的一定給予用抗狂犬病免疫血清或免疫球蛋白在傷口及周圍作浸潤注解。

4.4健康教育：尤其是學(xué)校、幼兒園的小朋友，掌握狂犬病的常識，在被抓傷、舔傷后能及時告訴家長得到及時處理，更好防病。

參考文獻

[1]蔡淑清.狂犬病.楊紹基主編.傳染病學(xué).2006.6.100

第5篇：動物免疫的方法范文

一、指導(dǎo)思想

堅持“預(yù)防為主、防控結(jié)合”的原則，深入科學(xué)發(fā)展觀統(tǒng)領(lǐng)防控工作全局，切實履行“村不漏戶、戶不漏畜、畜不漏針”的職責(zé)，以高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性豬藍耳病、雞新城疫、豬瘟等重大動物疫病和狂犬病等人畜共患病為防控重點，統(tǒng)籌兼顧牛出敗等動物疫病，以建立長效機制為基礎(chǔ)，為提高防控能力為核心，以控制重大動物疫病、保障公共衛(wèi)生為目標，以建立完善的技術(shù)服務(wù)體系為依托，不斷提高預(yù)警、預(yù)報、預(yù)防控制和應(yīng)急處置能力。堅持“加強領(lǐng)導(dǎo)、密切配合、依靠科學(xué)、依法防治，群防群控、果斷處置”的防控方針，確保我鎮(zhèn)全年無重大動物疫情發(fā)生。

二、總體目標

（一）免疫目標。

2014年對高致病性禽流感、口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍耳病、雞新城疫五種強制免疫的總體要求是，群體免疫密度常年維持在90%以上，其中應(yīng)免疫畜禽免疫密度要達到100％，免疫抗體合格率全年達到70%以上。

（二）檔案的建立和保存。

在完成免疫工作基礎(chǔ)上，要以村委會為單位建立動物免疫檔案，對豬全面實施佩戴二維碼標識，牛羊佩戴免疫耳標。農(nóng)村散養(yǎng)戶及養(yǎng)殖專業(yè)戶的免疫檔案由鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站建立保存。

（三）建立免疫示范村。

每個村委會至少建立2個以上免疫示范村。在免疫示范村范圍內(nèi)，強制免疫動物的免疫率、豬二維碼標識的佩帶率、免疫證的發(fā)證率和建檔率均達100%。非免疫示范村的豬二維碼標識的佩帶率和動物免疫的建檔率至少達90%以上。以后各村委會的免疫示范村以每年2個村以上的速度增加。

三、免疫原則及免疫程序

各種疫苗免疫接種劑量和方法按相關(guān)產(chǎn)品說明書規(guī)定使用。

四、實施步驟

春季集中免疫時間短，接種的疫苗種類多，技術(shù)要求高。各村要科學(xué)安排豬的高致病性豬藍耳病、口蹄疫和豬瘟等各種疫苗的接種時間，避免在短時間內(nèi)連續(xù)注射疫苗的現(xiàn)象。春季免疫分五個階段進行：

（一）準備動員

3月初召開春季動物免疫工作部署會議，廣泛宣傳動物免疫的重要性和必要性。做好疫苗組織、器械購置、人員組織等準備工作，抓緊時間安排做好春季免疫操作技術(shù)培訓(xùn)班。

（二）集中免疫階段

按上述的免疫原則和要求，3月10日至5月上旬，對所有的家禽和家畜開展禽流感、口蹄疫、豬瘟、豬藍耳病、雞新城疫等重大動物疫病集中免疫接種。并在規(guī)定的免疫時間后抽檢血清進行免疫抗體監(jiān)測。

（三）補漏復(fù)查階段

5月初，各村委會自行組織檢查驗收，查漏補缺，補免補防，并進一步完善免疫檔案。

（四）總結(jié)階段

5月30日前，春季動物免疫工作全部結(jié)束，認真做好春防的總結(jié)，檔案材料匯總和上報工作。

（五）迎檢階段

6月份，準備迎接國家和省里的檢查，做好相關(guān)的材料準備。

五、保障措施

（一）加強領(lǐng)導(dǎo)，明確責(zé)任

重大動物疫病集中免疫工作是預(yù)防動物疫病的重要環(huán)節(jié)，各鄉(xiāng)鎮(zhèn)政府和有關(guān)單位要進一步增強對免疫工作的責(zé)任感、使命感和緊迫感，充分認識做好重大動物疫病防控工作的重大意義，堅決克服麻痹思想、厭戰(zhàn)情緒。一定要充分做好春防的準備工作，做到措施更具體，目標更明確，要求更嚴格。要相應(yīng)成立免疫領(lǐng)導(dǎo)小組、技術(shù)小組，制定免疫方案，組織召開主要領(lǐng)導(dǎo)、村委會干部和村畜牧獸醫(yī)員參加的動物免疫動員大會，部署任務(wù)，分片包干，落實責(zé)任，扎扎實實地開展動物免疫工作，向社會宣傳動物免疫的重要性和必要性，爭取全社會各界的支持。

（二）技術(shù)培訓(xùn)

技術(shù)培訓(xùn)采用縣、鎮(zhèn)二級培訓(xùn)機制。培訓(xùn)內(nèi)容包括免疫操作方法、疫苗的使用及注意事項、免疫效果監(jiān)測、疫苗的運輸、儲存、免疫檔案的建立等內(nèi)容，采用理論和實際相結(jié)合的方式，注重培訓(xùn)內(nèi)容的針對性和實用性，以切實提高基層防疫隊伍業(yè)務(wù)素質(zhì)和工作能力。

（三）經(jīng)費保障

鎮(zhèn)政府應(yīng)采取多種辦法和多種渠道，積極籌措疫苗費用、耳標鉗、免疫器具、消毒藥品、急救藥品、業(yè)務(wù)培訓(xùn)、冷鏈維修運轉(zhuǎn)、村級防疫員補助等經(jīng)費。

（四）疫苗組織及供應(yīng)

鎮(zhèn)政府必須加強強制免疫用疫苗管理，規(guī)范疫苗進出庫制度。要按“高效、精確、節(jié)約”的原則使用疫苗，嚴格根據(jù)免疫進度領(lǐng)取疫苗，杜絕浪費現(xiàn)象的發(fā)生?？h畜牧獸醫(yī)局負責(zé)強制免疫用疫苗的組織和供應(yīng)工作。各鄉(xiāng)鎮(zhèn)對疫苗儲存的冷鏈設(shè)備要進行檢查和維修，確保疫苗安全存放，有效使用。特別是在集中免疫工作開展前，要對村級防疫員使用的攜帶式冷藏箱的保溫性能進行全面檢查，有問題的應(yīng)及時修理或報廢，以保證疫苗質(zhì)量。

（五）免疫效果監(jiān)測

免疫效果監(jiān)測是檢查免疫接種成敗的重要手段，是制定補免計劃、免疫程序的基礎(chǔ)。實行常年監(jiān)測、集中監(jiān)測和隨機抽檢監(jiān)測相結(jié)合的機制，重點在集中免疫后根據(jù)免疫的進度組織開展免疫效果的監(jiān)測，并對其監(jiān)測結(jié)果進行匯總、評價，于5月30日前上報省動物疫病預(yù)防控制中心。要做好診斷試劑和相關(guān)用品的訂購，以免貽誤監(jiān)測工作開展?？h畜牧獸醫(yī)局將組織免疫抗體監(jiān)測組，不定期到各村委會和各飼養(yǎng)場，進行抗體隨機檢測和效果評價，并以監(jiān)測結(jié)果做為評價各鄉(xiāng)鎮(zhèn)免疫效果的主要依據(jù)。

（六）檢查、督導(dǎo)、驗收和總結(jié)

在免疫工作開展后，鎮(zhèn)畜牧站要組織有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)及業(yè)務(wù)技術(shù)骨干，到各村委會、自然村檢查督促免疫工作，及時發(fā)現(xiàn)存在的問題，進行階段性總結(jié)和階段性匯報。免疫工作基本結(jié)束后，每個村委會應(yīng)進行自我驗收或由縣畜牧獸醫(yī)局組織抽查驗收。

六、其他要求

（一）對調(diào)出縣境的非屠宰家禽和非屠宰家畜在調(diào)運前2周分別進行一次禽流感免疫和口蹄疫免疫。未按規(guī)定免疫的家禽家畜，防疫監(jiān)督機構(gòu)不得出具動物檢疫合格證明（未滿2周齡的雛禽除外）。

（二）盡量減少免疫應(yīng)激反應(yīng)。修訂后的《動物防疫法》規(guī)定，因依法實施強制免疫造成動物應(yīng)激死亡的，給予補償，具體補償標準和辦法由國務(wù)院財政部門會同有關(guān)部門制定。發(fā)生不良反應(yīng)時，應(yīng)積極采取救治措施，避免飼養(yǎng)者的損失。同時耐心做好群眾的思想工作。

第6篇：動物免疫的方法范文

關(guān)鍵詞：狂犬??；疫苗接種；傷口處置

【中圖分類號】R529 【文獻標識碼】A 【文章編號】1674-7526(2012)04-0029-01

1 材料與方法

1.1 研究對象：我院2009年1月至2011年1月門診治療的1688例暴露后狂犬病傷口處置的患者作為研究對象，進行研究。

1.2 研究內(nèi)容：按照中國疾病預(yù)防控制中心《狂犬病暴露后預(yù)防處置操作指南》(2007)，對患者進行正確的狂犬病預(yù)防處置操作[1],并登記患者的一般情況、傷口情況、動物致傷的情況和疫苗注射的情況。

2 結(jié)果

2.1 一般特征:作為研究對象的1688例患者中，無一發(fā)生狂犬病免疫失敗的病例，也沒有發(fā)生狂犬病的患者。其中男性患者905例，占53.61%，女性患者783例，占46.39%?；颊咧心挲g最的10個月，被犬咬傷腳部；年齡最大85歲，被犬咬傷腳部；其中0-9的424例，占25.11%，10-19歲患者281例，占16.65%，20-29歲198例，占11.72%，30-39歲269例，占1594%，40-49歲187例，占11.07%，50-59歲168例，占995%，60歲以上的有161例，占9.54%。

2.2 動物致傷情況:傷人的動物有犬、貓、鼠、果子貍等，其中被貓所傷患者有335例，占19.85%；被犬所傷的有1298例，占76.90%；被果子貍傷者有2例，占0.01%；被鼠傷者34例，占2.01%；因切狗肉切傷手的患者19例，占1.13%。致傷動物免疫情況：未經(jīng)免疫的動物415例，占24.86%，免疫史不詳?shù)?273例，占75.14%。暴露程度的分級為：I度暴露402例，占2381%。Ⅱ度暴露812例，占48.10%。Ⅲ度暴露474例，占2809%，暴露的部位分別是：下肢856例，占50.71%，上肢740例，占43.84%，軀干部67例，占3.96%，混合傷（下肢和上肢，下肢和頭部，上肢和頭部）25例，占1.49%。

2.3 免疫處理情況:在被動物咬傷的1688例患者中，最快在20分鐘內(nèi)進行免疫處理，時間最長的在受傷之后8年才來就診，24小時內(nèi)就診的有1390人，占82.34%，24-48小時就診的患者196人，占11.61%，3-10天就診的有65例，占390%，10天之后來就診的有37例，占2.19%。1688例被咬傷的患者到醫(yī)院進行處理的1508例，占89.33%，沒有處理傷口的180例，占10.67%。全部1688例患者均注射人用狂犬病疫苗，均進行注射使用人凍干狂犬疫苗，其中158人注射了人狂犬病免疫球蛋白及抗狂犬病血清，比例為9.36%。

2.4 討論:本次研究的1688例患者中，男性占53.61%，女性占46.39%，男性患者多于女性，可能由于男性活動多，和動物接觸的機會多，受到動物的攻擊也多，0-9歲的患者受傷者最多，占25.11%，與該年齡段的孩子喜歡動物，逗貓逗狗等，加以自身防御力差，且喜歡戶外活動有關(guān)。因此，需要對0-9歲年齡段加強看管和教育，防止受傷。

傷人的動物犬最多，占76.90%，其次是貓，占19.85%，其中大部分為流浪貓、狗。動物致傷與現(xiàn)在人們生活水平的提高，飼養(yǎng)動物的人數(shù)增多有關(guān)，越來越多的人飼養(yǎng)各種各樣的動物，因而被傷害的幾率也大大增加；從動物面積的情況看，未免疫的占24.86%，免疫史不詳?shù)恼?5.14%，由于目前養(yǎng)犬的數(shù)量上升，犬密度升高，但免疫率地，同時外觀健康的犬存在攜帶狂犬病毒的現(xiàn)象，因此相關(guān)部門應(yīng)提高對犬的管理及免疫接種，增加犬的免疫比例，減少狂犬病的發(fā)病幾率；受傷后不處理傷口或是處理不當事狂犬病發(fā)病的重要原因之一，如果及時徹底的對傷口進行清洗消毒可以明顯降低發(fā)病率。被動物咬傷后24小時內(nèi)到醫(yī)院就診率達82.34%，這與近年來對加強對狂犬病的宣傳力度有關(guān)，但當天及時就診率較低，說明對狂犬病的防治知識還需提高，受傷者的自我保護意識不強，同時也提示了有關(guān)部門應(yīng)該繼續(xù)加強有關(guān)狂犬病的防治知識宣傳，普及被動物咬傷之后處理傷口的正確方法，是今后工作的重點；1688例患者之中，Ⅲ度暴露474例，占28.09%，但進行了抗狂犬病血清和人狂犬病免疫球蛋白注射的患者僅占9.36%，未達到《狂犬病暴露后預(yù)防處置操作指南》(2007)要求的29．73％，這與注射狂犬病免疫血清之前要做過敏試驗、操作復(fù)雜有關(guān)[2]。而狂 犬病免疫球蛋白價格偏高，患者的經(jīng)濟承受能力有就診限，限制了其使用量[3]。所以，加強對群眾進行狂犬病防治的知識，尤其是動物致傷后的治療知識尤為重要，能夠顯著增加暴露后迅速就診率，暴露后在短時間內(nèi)到具有高醫(yī)療水平的機構(gòu)進行狂犬病免疫處置。

此次調(diào)查的1688例患者均主動進行狂犬病暴露部位的處置，沒有出現(xiàn)狂犬病發(fā)病，與暴露后及時按要求對傷口進行處理、接種疫苗與注射人狂犬病免疫球蛋白及抗狂犬病血清存在一定的相關(guān)性.所以，加強對動物的免疫管理，被咬傷后傷口的處理，疫苗的正確使用，加強對兒童、學(xué)生及戶外活動多的男性等易被犬等動物襲擊的人群狂犬病防治知識的宣傳力度，是預(yù)防及控制狂犬病發(fā)病率的良好途徑。

參考文獻

第7篇：動物免疫的方法范文

[關(guān)鍵詞] 重大動物疫病 過敏死亡 免疫

[中圖分類號] S852.4 [文獻標識碼] A [文章編號] 1003-1650（2013）03-0187-01

免疫接種是預(yù)防、控制動物疫病的有效措施。近年來，我縣按照各種動物疫病免疫方案的要求，對規(guī)模養(yǎng)殖場采取程序化免疫，散養(yǎng)戶采取春、秋集中免疫，常年補針相結(jié)合的免疫方法，基本做到了應(yīng)免盡免。但在實際工作中，有時會出現(xiàn)動物免疫過敏甚至死亡的事例。據(jù)統(tǒng)計，發(fā)生過敏反應(yīng)的過敏率大約在0，003%左右，致使防疫工作一度陷入畜主怕、防疫員難的困境，給防疫工作帶來一定的影響。針對這個問題，近年來，本人先后與全縣各鄉(xiāng)鎮(zhèn)的30多名防疫員進行了廣泛的交流，分析其原因，提出以下應(yīng)對措施和建議：

一、原因分析

1.疫苗運輸、保存不當

疫苗運輸不規(guī)范，少數(shù)鄉(xiāng)、村防疫人員在貯存疫苗時沒有達到要求的溫度范圍，有的甚至未使用疫苗冷藏箱，疫苗取出后在免疫前受到陽光照射或在常溫下放置時間過長等，從而影響疫苗的效價甚至過期失效。

2.防疫時消毒不嚴

個別鄉(xiāng)、村防疫人員不按操作規(guī)程辦事，為了省工省錢，舍不得用酒精棉球，未做到“一畜一針，一針一棉”的要求，一針打到底，有時根本不消毒，很可能誘發(fā)疫病甚至導(dǎo)致死亡。

3.防疫員責(zé)任心不強、操作不當

疫苗劑量沒有嚴格按說明書執(zhí)行，超量或減量注射，注射部位不準，時深時淺；有時打飛針，形成錯位注射或劑量不夠。

4.未按規(guī)定程序接種

按規(guī)定程序重復(fù)接種，是強化免疫應(yīng)答，鞏固免疫效果的有效方法。個別養(yǎng)殖場有時對防疫工作不夠重視，對免疫程序不懂，對某些疫苗的保護期限不知，認為接種某一種疫苗就萬事大吉，不強化免疫，結(jié)果免疫抗體達不到應(yīng)有的效果而發(fā)病。

5.免疫注射后未進行觀察，出現(xiàn)過敏癥狀后未及時搶救

個別鄉(xiāng)、村防疫人員粗心大意，免疫注射后不給畜主說明情況，讓其觀察動物的反應(yīng)，或者動物過敏反應(yīng)后未及時搶救，延誤有效搶救時機導(dǎo)致死亡。

二、主要對策

1.把好疫苗運輸與貯存關(guān)

1.1嚴格按照說明書貯存運輸疫苗，做到防高溫、防暴曬，防疫時將疫苗裝入盛有冰袋的冷藏箱內(nèi)，避免高溫和陽光直射。分類保存疫苗，一般凍干苗-10～15℃，滅活苗2～8℃保存。

1.2防疫員把好注射前消毒關(guān)。按照“一畜一針，一針一棉”的要求，搞好免疫時的消毒，禁止一針多畜不按規(guī)定消毒。

1.3防疫員把好注射劑量關(guān)。按照不同畜種、年齡、體重等按規(guī)定劑量進行接種，杜絕超量或減量注射，疫苗啟封后要按12小時內(nèi)使用，不得隔日再用。

1.4把好接種部位關(guān)。嚴格按照疫苗種類規(guī)定的注射部位注射，不得錯位注射，禁止打飛針和不按規(guī)定的部位、深度注射。

1.5防疫員把好過敏搶救關(guān)。對個別家畜免疫注射后出現(xiàn)氣喘、呼吸加快、發(fā)抖等過敏反應(yīng)，盡快使用腎上腺素、地塞米松等抗過敏藥物搶救。

各鄉(xiāng)鎮(zhèn)要認真貫徹落實國務(wù)院關(guān)于“地方各級政府對防疫工作負總責(zé)，政府主要領(lǐng)導(dǎo)是第一責(zé)任人，分管領(lǐng)導(dǎo)是主要負責(zé)人”的防疫工作責(zé)任制，提高認識，組織協(xié)調(diào)各相關(guān)部門做好秋防的各項工作。要督促落實防疫所需器械、疫苗、監(jiān)測、過敏反應(yīng)死亡和撲殺補貼等各項防控工作經(jīng)費。要逐級落實工作責(zé)任，認真執(zhí)行重大動物疫情舉報核查、免疫效果監(jiān)測、免疫檔案管理等重大動物疫病防控工作管理制度，做到重大動物疫病防控工作科學(xué)化、規(guī)范化、制度化。要及時組織開展秋防督察，查找工作中存在的問題并及時予以解決，總結(jié)工作中積累的好的經(jīng)驗及時予以推廣，保證各項免疫措施能夠落到實處，防疫工作能夠扎實有效開展。要充分認識秋防工作的重要性和緊迫感，切不可麻痹大意，決不能掉以輕心，要精心組織，全面做好華亭縣重大動物疫病集中免疫工作，落實責(zé)任，強化督查，全面做好免疫工作。

參考文獻

[1]王雪玲，原林，劉鐵龍.動物疫病免疫失敗的原因及主要對策[J].河南畜牧獸醫(yī)，綜合版.2012年，第9期3頁33-35頁；

第8篇：動物免疫的方法范文

一、提高養(yǎng)殖技術(shù)，提升養(yǎng)殖環(huán)境是做好動物防疫工作的基礎(chǔ)條件

科學(xué)證明，不同的養(yǎng)殖環(huán)境、養(yǎng)殖方式和管理程序，不僅對動物的生長起決定性作用，而且對動物的抗病能力會產(chǎn)生不同的影響，更重要的是密切關(guān)系到動物疫病的發(fā)生與傳播。如當今畜禽實行高密度飼養(yǎng)，大大提高了飼養(yǎng)效率和經(jīng)濟效益，促進了畜牧業(yè)的高速發(fā)展；但是也帶來了另一方面問題，在這種飼養(yǎng)方式條件下，動物的抗病能力顯著下降，疫病傳播和發(fā)生的機會大大增加。所以提高養(yǎng)殖技術(shù)，提升養(yǎng)殖環(huán)境對做好動物防疫工作意義重大。

1.堅持規(guī)?；?、標準化的生產(chǎn)方式，不斷提高生豬養(yǎng)殖的生產(chǎn)水平

適度規(guī)模的飼養(yǎng)，統(tǒng)一標準的生產(chǎn)操作可以使品質(zhì)提高、成本下降、生產(chǎn)率提升。

2.建立和執(zhí)行與動物防疫要求相適應(yīng)的畜牧業(yè)生產(chǎn)管理制度

從生產(chǎn)管理角度，動物防疫技術(shù)和畜牧業(yè)生產(chǎn)相結(jié)合，要通過形成生產(chǎn)制度，把動物防疫要求溶入到畜牧業(yè)生產(chǎn)的各個階段。

3.堅持科技創(chuàng)新，有效提高新技術(shù)應(yīng)用的能力，提升養(yǎng)殖業(yè)科技水平

科技進步是養(yǎng)發(fā)展的根本動力，在養(yǎng)殖發(fā)展過程中，不僅要發(fā)揮了自身已有的科技優(yōu)勢，更是把科技創(chuàng)新作為重要指導(dǎo)方針貫徹始終。積極引進國內(nèi)外先進技術(shù)和生產(chǎn)設(shè)備，將其推廣應(yīng)用到生豬生產(chǎn)中，積極探索發(fā)酵床養(yǎng)殖、高床飼養(yǎng)、人工授精、早期斷奶、育種改良、飼料配方、生物能利用等新型養(yǎng)殖技術(shù)，有效解決養(yǎng)殖技術(shù)瓶頸，提升生豬養(yǎng)殖的科技水平。

二、隔離消毒是做好動物防疫工作的重要環(huán)節(jié)

動物疫病傳播有三個環(huán)節(jié)：傳染源、傳播途徑、易感動物。在動物防疫工作中，只要切斷其中一個環(huán)節(jié)，動物傳染病就失去了傳播的條件，就可以避免某些傳染病在一定范圍內(nèi)發(fā)生，甚至可以撲滅疫情、最終消滅傳染病。但對養(yǎng)殖場來說，不能只注重通過免疫手段保護易感動物這個層次，只有同時做好消毒隔離工作，消滅傳染源切斷傳播途徑，才是防止重大動物疫情發(fā)生的最關(guān)鍵措施。

1.建立人員，物品隔離制度

生產(chǎn)區(qū)內(nèi)禁止非本場生產(chǎn)、管理人員出人；外來人員出人需經(jīng)獸醫(yī)批準，進人生產(chǎn)區(qū)人員必須換鞋、更衣、洗手、紫外線消毒。凡生產(chǎn)區(qū)內(nèi)的工具、物品、固定使用，不得隨便帶離場外使用。必須進人生產(chǎn)區(qū)的車輛、物品應(yīng)視種類不同作必要的消毒處理方可進入。嚴禁將活畜禽、生肉類帶人場內(nèi)，已出場動物及產(chǎn)品嚴禁返回生產(chǎn)區(qū)。引人種用動物或商品動物，必須隔離飼養(yǎng)一個月后，確認健康才能進人生產(chǎn)區(qū)。

2.各飼養(yǎng)場應(yīng)根據(jù)自身的生產(chǎn)方式、主要存在的疫病、消毒劑和消毒設(shè)備設(shè)施的種類等因素因地制宜地制定消毒程序。飼養(yǎng)舍應(yīng)每天進行打掃、清洗、保持舍內(nèi)整潔、干燥，并經(jīng)常性進行滅鼠和滅蠅、滅蚊工作，同時應(yīng)搞好場內(nèi)綠化。病死動物應(yīng)深埋或高溫處理，病死動物的糞便實行封閉性堆積發(fā)酵。

三、免疫預(yù)防是動物防疫工作的重中之重

在一定的范圍內(nèi)，只要消除了某種病原的易感動物，就能防止這種病原引起的動物疫病。消除易感動物的方法，除了加強飼養(yǎng)管理，提高動物本身的體質(zhì)外，按照免疫程序給動物普遍接種相應(yīng)的疫苗，是最重要、最有效的辦法。

1.具體給當?shù)貏游锝臃N幾種疫苗，除了國家要求強制免疫的，可根據(jù)當?shù)匕l(fā)生動物疫病的種類、發(fā)展趨勢和周圍動物疫病流行態(tài)勢來確定。免疫過程中，要注意疫苗的質(zhì)量、免疫操作的規(guī)范性。

2.注重做好免疫監(jiān)測工作，免疫監(jiān)測利用血清中抗體水平動態(tài)和消長規(guī)律，可優(yōu)先選擇疫苗，并可對多種疫苗進行合理制定免疫程序，避免不同種疫苗相互干擾，達到全面免疫。

四、疫病控制是防止疫病擴散的重要手段

隨著形勢的發(fā)展，養(yǎng)殖業(yè)中散戶逐漸淡出，規(guī)?；?、集約化養(yǎng)殖逐漸占領(lǐng)市場。動物發(fā)病概率加大，疫病發(fā)生在所難免，針對畜禽各類疫病的出現(xiàn)，要做到“早發(fā)現(xiàn)、早報告、早診斷和早處置”。

1.出現(xiàn)疾病先兆應(yīng)及時發(fā)現(xiàn)，動物發(fā)病都有先兆，任何病都有潛伏期，僅是潛伏期長短而已，一旦發(fā)現(xiàn)動物疫病或疑似傳染病時，必須立即向當?shù)孬F醫(yī)行政主管部門報告。

2.對發(fā)病畜禽及早診斷，疫情診斷一般要符合三個指標：臨床指標、病理指標、病原學(xué)指標。而是在診斷發(fā)病原因的基礎(chǔ)上，有目的、有針對性地用藥，這樣才能起到事半功倍的效果，避免無目的地濫用藥物。

第9篇：動物免疫的方法范文

【摘要】 目的 觀察 FTS提高正常動物、荷瘤動物及免疫缺陷型動物自然殺傷性細胞（NK）活性的作用。方法 用正常動物、荷瘤動物及免疫缺陷型動物模型皮下注射不同劑量的FTS后，取其脾NK細胞測定其對靶細胞（L929）的殺傷能力。結(jié)果 FTS 2.5mg/kg、1.25mg/kg能夠顯著地增加正常小鼠及免疫力低下模型小鼠的NK細胞對靶細胞的殺傷能力（P

【關(guān)鍵詞】 血清胸腺因子；NK；L929；抗腫瘤

【Abstract】 Objective Observation the FTS to enhance the normal animal， the Dutch lump animal and the immunodeficiency animal nature killing germ cell （NK） active function.Methods After the normal animal， the Dutch lump animal and immunodeficiency animal model hypodermic injection different dosage of FTS， take its the spleen NK cell to determine it to the target cell （L929） kill capability.Results FTS 2.5mg/kg，1.25mg/kg can obviously increase the normal mouse and the immunity low model mouse’s NK cell to the target cell kill capability （p< 0.01）.Conclusion FTS can enhance the NK cell activeness， has function which the anti-tumor and the immunity strengthen.

【Key words】 FTS;NK;L929;anti-tumor

血清胸腺因子（thymulin，F(xiàn)TS）是胸腺組織中由9個氨基酸殘基組成的小分子肽，是一類具有增強機體免疫功能的多肽［1］，自然殺傷細胞（NK）具有抗腫瘤、抗感染和免疫調(diào)節(jié)功能［2］，是抗腫瘤的免疫監(jiān)視作用中的第一道防線［3］，因此，NK活性的提高對于機體的抗腫瘤能力的提高是有很積極作用的，本文通過研究FTS對不同模型動物NK細胞活力的影響，了解FTS的免疫調(diào)節(jié)作用。

1 材料與方法

1.1 藥物與試劑 血清胸腺因子（批號060821，由深圳市翰宇生物工程有限公司提供），其純度為>96%，凍干粉末，冷凍保存，臨用前取FTS 1mg，加1ml消毒生理鹽水稀釋為1mg/ml的原液，供皮下注射用。陽性對照藥為胸腺肽，凍干粉末，20mg/支（黑龍江迪龍藥業(yè)有限公司提供，批號20061001）；環(huán)磷酰胺，針劑，10mg/10ml（山西普德藥業(yè)有限公司提供，批號20060203）；0.1%中性紅染液；細胞溶解液（50%醋酸+50%乙醇）；0.25%胰酶；RPMI-1640培養(yǎng)液。

1.2 瘤株 小鼠H22，取接種于小鼠的腹腔第7天的瘤株，配成106/ml瘤細胞懸液，接種于小鼠前肢腋窩皮下0.2ml/鼠。

1.3 靶細胞（L929） 實驗前一天換液，用0.25%胰酶消化后，用含10%小牛血清的RPMI-1640稀釋成1×105/ml。

1.4 動物 實驗用體重18～20g的SPF級雄性昆明小鼠，動物合格證號：SCXK京（2005-2006），均由中國藥品生物制品檢定所實驗動物中心提供。飼養(yǎng)觀察2天后使用。實驗動物室為無菌空氣二級過濾，人工日光燈12h自動照明，恒溫、恒濕送風(fēng)，溫度22～24℃，相對濕度40%～45％。鼠籠具為塑料盒，不銹鋼絲蓋。

1.5 免疫缺陷型動物模型 用18～20g的昆明小鼠稱重后皮下注射環(huán)磷酰胺，劑量為80mg/kg，給藥體積0.1ml/10g，5天后稱重，將體重降低的小鼠隨機分組用于實驗。

1.6 劑量設(shè)置 根據(jù)藥效曲線結(jié)果設(shè)置劑量為高、中、低三個劑量組，小鼠給藥劑量2.5、1.25、0.63mg/kg，給藥體積為0.1ml/10g。陽性對照藥胸腺肽，臨用前配成13mg/ml，小鼠皮下0.1ml/10g，劑量為130mg/kg?？瞻讓φ沼肗S，藥液臨用時根據(jù)動物個體體重調(diào)整給藥體積。

1.7 給藥方法 分別取接種H22瘤株24h后的昆明小鼠，健康動物及免疫缺陷型動物各50只，均分為5組，分別按高、中、低3個劑量注射FTS，對照組注射NS，用胸腺肽做陽性對照，均皮下注射給藥，每天給藥1次，共給藥14天。

1.8 小鼠脾NK細胞的制備 將給藥后的小鼠斷頸放血，取脾置于無血清RPMI-1640培養(yǎng)液中去雜質(zhì)，研磨成單個細胞后用100目篩及200目篩過濾，將濾液1000rpm，5min離心，去上清，除紅細胞后，用無血清RPMI-1640培養(yǎng)液洗1次，最終用含10%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液配成0.5×107/ml。

1.9 檢測指標 用酶標儀在490nm測定各組的OD值，殺傷率%=靶細胞OD值-實驗組OD值/靶細胞OD值。實驗數(shù)據(jù)用x±s表示，組間比較用t檢驗。

2 方法與結(jié)果

將L929細胞加入96孔板，100μl/孔，37℃，5% CO2培養(yǎng)4h，使其貼壁，然后實驗孔每孔加入100μl脾NK細胞，對照孔加入無血清RPMI-1640培養(yǎng)液100μl，37℃，5% CO2培養(yǎng)24h，取出，棄上清，用NS洗3次，濾紙吸干。加入中性紅100μl/孔，37 ℃， 30min，棄上清，用NS洗3次，加入細胞裂解液100μl/孔，混勻后，用490nm測各孔的OD值。

2.1 FTS對正常小鼠NK細胞活性的影響 制備實驗到期的正常小鼠的脾NK細胞，按實驗方法進行實驗，結(jié)果見表1。表1 FTS對正常小鼠NK細胞活性（略）注：與對照組比較，*P

由表1可見，與NS組比較，F(xiàn)TS 2.5mg/ml可以極顯著地增強正常小鼠NK細胞的活性，而胸腺肽沒有顯著的增強作用。

2.2 FTS對免疫缺陷型小鼠NK細胞活性的影響 制備實驗到期的免疫缺陷型小鼠的脾NK細胞，按實驗方法進行試驗，結(jié)果見表2。表2 FTS對免疫缺陷型小鼠NK細胞活性的影響 （略）注：與對照組比較，**P

由表2可見，與NS組比較，F(xiàn)TS 2.5mg/ml、1.25mg/ml可以極顯著地增強免疫缺陷型小鼠NK細胞的活性，而胸腺肽的增強作用較弱，與對照組比差異無顯著性。

2.3 FTS對荷瘤小鼠NK細胞活性的影響 制備實驗到期的H22荷瘤小鼠的脾NK細胞，按實驗方法進行試驗，結(jié)果見表3。表3 FTS對荷瘤小鼠NK細胞活性的影響 （略）注：與對照組比較，**P

由表3可見，F(xiàn)TS 2.5mg/ml、1.25mg/ml可以對荷瘤小鼠NK細胞的活性表現(xiàn)出極顯著的增強作用，而胸腺肽沒有顯著的增強作用。3 結(jié)論

由實驗1～3可知，F(xiàn)TS各劑量間呈現(xiàn)量效關(guān)系，高、中劑量組可以顯著地增強免疫缺陷型小鼠、荷瘤小鼠及正常小鼠NK細胞的殺傷能力（P

【參考文獻】

1 JF Bach， M Dardenne， JM Pleau. Biochemical characterization of a serum thymic factor.Nature， 1977， 266（3）:55-56.

2 P Merlino， JA Marsh. Evidence for the direct action of thymulin on avian NK cells. Develop Comp Immunol，2001，25:337-343.

3 P Merlino， JA Marsh. Evidence for the direct action of thymulin on avian NK cells. Develop Comp Immunol， 2001， 25:337-343.

4 左增艷，柳鐘勛.新型生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑、當歸多糖（ASDP）抗腫瘤作用及對荷瘤小鼠免疫功能的影響.中國免疫學(xué)雜志，2000，16（10）:545-546.