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細(xì)胞技術(shù)論文精選(九篇)

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細(xì)胞技術(shù)論文

第1篇:細(xì)胞技術(shù)論文范文

經(jīng)典的iPSC技術(shù)路線主要包括以下步驟:①選擇宿主細(xì)胞;②選擇外源重組因子;③重組因子導(dǎo)入宿主細(xì)胞;④重編程產(chǎn)生iPSC;⑤iPSC的鑒定及分化。

1.1宿主細(xì)胞來源Yamanaka將小鼠體細(xì)胞誘導(dǎo)為iPSC開啟了該技術(shù)的先河,之后人、大鼠、猴、豬、綿羊,甚至一些瀕危動物的iPSC系紛紛建立。就人類而言,目前已從皮膚成纖維細(xì)胞、角質(zhì)成形細(xì)胞、羊水、神經(jīng)前體細(xì)胞、外周血細(xì)胞,甚至尿液中獲得iPSC。不同組織來源細(xì)胞重編程效率及所需因子不同。不僅iPSC分化能力因人而異,在表觀遺傳穩(wěn)定性和癌基因的表達(dá)方面也存在男女有別現(xiàn)象。使得iPSC技術(shù)應(yīng)用于臨床個(gè)體治療更具挑戰(zhàn)性。

1.2重組因子的選擇及導(dǎo)入方式經(jīng)典的Yamanaka因子在癌細(xì)胞中存在超表達(dá)、整合型載體可導(dǎo)致插入突變,且誘導(dǎo)效率非常低。因此,iPSC研究者一直致力于尋求更安全、簡單、有效的誘導(dǎo)策略。Anokye-Danso等應(yīng)用微RNA調(diào)控技術(shù),不使用轉(zhuǎn)錄因子高效誘導(dǎo)iPSC。Zhou等和Kim等分別利用Yamanaka四因子的融合蛋白和穿膜肽與轉(zhuǎn)錄因子蛋白的融合蛋白,直接誘導(dǎo)受體細(xì)胞為iPSC,但效率較低。一些學(xué)者利用腺病毒、質(zhì)粒載體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞,或利用Cre/LoxP系統(tǒng)、oriP/EBNAI系統(tǒng)及piggyBac轉(zhuǎn)座系統(tǒng)將外源基因整合后再特異性切除,從而得到不含外源基因整合的iPSC,但是存在基因重排及效率低下現(xiàn)象。而一些小分子化合物(如丙戊酸、曲古抑菌素A、維生素C、篩選激酶抑制劑、BIX-01294、5-AZA、Wnt3a、Zscan4因子)的應(yīng)用可顯著提高iPSC的產(chǎn)生效率。

1.3iPSC的誘導(dǎo)分化Zhao等利用iPSC通過四倍體囊胚注射得到存活并具繁殖能力的小鼠,證明了iPSC的全能性。目前,人們已成功地將iPSC在體外定向誘導(dǎo)分化為神經(jīng)細(xì)胞、造血細(xì)胞、胰腺細(xì)胞、肝細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、耳蝸毛細(xì)胞、色素細(xì)胞等類型細(xì)胞。

1.4iPSC機(jī)制相關(guān)研究突破研究人員長期受困于體細(xì)胞重編程的具體機(jī)制。Polo等繪制出體細(xì)胞重編程為iPSC的分子線路圖,證實(shí)誘導(dǎo)過程引起了兩次轉(zhuǎn)錄波,分別是由c-myc/Klf4和Oct4/Sox2/Klf4驅(qū)動,并確定了重編程過程中路障基因。基于iPSC技術(shù)已證明細(xì)胞的分化過程并非不可逆轉(zhuǎn),研究人員利用細(xì)胞直接重編程技術(shù)將已分化細(xì)胞直接轉(zhuǎn)化成特定譜系的細(xì)胞,利用間接譜系轉(zhuǎn)化技術(shù)部分去分化生成多潛能祖細(xì)胞,為干細(xì)胞研究開辟了新思路。

2臨床應(yīng)用前景

iPSC因其分化全能性、體外易擴(kuò)增、易于基因干擾或過表達(dá)等特性,在再生醫(yī)學(xué)、藥物研發(fā)評價(jià)、組織工程等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用前景。

2.1疾病特異iPSC動物疾病模型由于種屬差異,不能真實(shí)反映人類疾病,利用疾病特異的iPSC系建立的iPSC疾病模型則可彌補(bǔ)這一缺陷,還可在免疫缺陷動物體內(nèi)觀察疾病。當(dāng)前已建立包括神經(jīng)系統(tǒng)疾病(帕金森病、亨廷頓病、肌萎縮側(cè)索硬化癥、脊髓性肌萎縮、唐氏綜合征、脆性X綜合征),血液系統(tǒng)疾病(范科尼貧血、鐮刀細(xì)胞型貧血、β地中海貧血、原發(fā)性骨髓纖維化),代謝系統(tǒng)疾病(1型糖尿病,Ⅲ型戈謝病,Shwachman-Bodian-Diamond綜合征、肌營養(yǎng)不良、萊施-奈恩綜合征)及其他疾病(右心室心肌病)等特異的iPSC系。

2.2藥物研發(fā)及篩選大規(guī)模藥物篩選需要很多細(xì)胞,iPSC可以無限增殖,并且疾病特異iPSC本身就是篩選藥物的目標(biāo)。Takayama等導(dǎo)入Foxa2及肝細(xì)胞核因子1α到人類ESC/iPSC產(chǎn)生具有代謝功能的肝細(xì)胞樣細(xì)胞,對篩查藥物肝毒性具有重大意義。Lippmann等將iPSC轉(zhuǎn)化為血腦屏障的內(nèi)皮細(xì)胞,可用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病藥物高通量篩選或藥物神經(jīng)毒性檢測。Egawa等利用肌萎縮側(cè)索硬化癥患者iPSC分化而來的神經(jīng)細(xì)胞來篩選并確認(rèn)藥物效果,發(fā)現(xiàn)漆樹酸具有改善神經(jīng)異常的作用。

2.3組織工程學(xué)應(yīng)用用干細(xì)胞培養(yǎng)的人體組織是理想的器官再造來源。英國已經(jīng)報(bào)道利用3D打印技術(shù)為癌癥患者重塑面部,F(xiàn)aulkner-Jones等將3D打印拓展到人ESC范圍,當(dāng)3D打印技術(shù)能夠兼容iPSC時(shí),組織工程學(xué)將邁上一個(gè)新的臺階。

2.4臨床疾病治療

2.4.1神經(jīng)系統(tǒng)疾病帕金森病是一種常見的神經(jīng)退行性疾病,目前治療手段只能改善癥狀。Kikuchi等利用iPSC分化出能產(chǎn)生多巴胺的神經(jīng)細(xì)胞,然后移植到帕金森病猴子腦部,這些細(xì)胞存活半年以上,并持續(xù)釋放多巴胺,很大程度上減輕了患病猴子的癥狀。Jiang等將帕金森病患者和健康志愿者皮膚細(xì)胞來源iPSC誘導(dǎo)為腦細(xì)胞并對比,觀察到parkin基因發(fā)生突變產(chǎn)生自由基破壞多巴胺神經(jīng)元是帕金森病發(fā)病機(jī)制之一。除帕金森病外,在阿爾茨海默病、脊髓側(cè)索硬化癥、脊髓肌肉萎縮癥及舞蹈癥等神經(jīng)退行性疾病研究中,iPSC也取得許多進(jìn)展。

2.4.2血液系統(tǒng)疾病Hanna等將人類鐮刀型貧血癥小鼠皮膚成纖維細(xì)胞建立的iPSC,通過同源重組技術(shù)獲得正常基因型iPSC,誘導(dǎo)為造血干細(xì)胞并移植后可治療動物模型的鐮狀細(xì)胞性貧血。Xu等用iPSC來源的內(nèi)皮前體細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞移植到血友病小鼠肝臟中,病鼠出血癥狀得到了改善。Raya等獲得了基因修飾后的貧血癥患者特異性iPSC,其能夠分化成表型正常的髓系和紅系造血祖細(xì)胞。最近,日本學(xué)者利用iPSC培養(yǎng)出一種能產(chǎn)生促紅細(xì)胞生成素的細(xì)胞,有望用于治療腎性貧血。

2.4.3心血管系統(tǒng)疾病2008年,Schenke-Layland等成功地將小鼠iPSC在體內(nèi)和體外分別誘導(dǎo)出了心肌細(xì)胞。之后,Nelson等將iPSC分化得到的心肌細(xì)胞移植入具有完整免疫系統(tǒng)的成年小鼠梗死心臟內(nèi),能夠觀察到功能性的新生心肌。Tohyama等使用不含葡萄糖的低成本培養(yǎng)液獲得大量純度高達(dá)99%的心肌細(xì)胞,且?guī)缀醪淮嬖诎┗L(fēng)險(xiǎn)。而Zhang等證實(shí)iPSC具有分化為心房、心室和竇房結(jié)細(xì)胞等的潛能。

2.4.4感官疾病感音神經(jīng)性聾的主要原因是毛細(xì)胞及螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞退變和死亡,而其治愈需要相關(guān)結(jié)構(gòu)的修復(fù)或再生。Nishimura等將iPSC來源神經(jīng)祖細(xì)胞移植到小鼠耳內(nèi),觀察到這些神經(jīng)細(xì)胞開始表達(dá)谷氨酸神經(jīng)元的標(biāo)志性因子,表明iPSC可用于螺旋神經(jīng)節(jié)損傷的再生修復(fù)。Oshima等使用小鼠ESC及iPSC成功分化出了功能性內(nèi)耳毛細(xì)胞。Mizutari等使用γ-分泌物抑制劑抑制Notch信號通路,刺激支持細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槊?xì)胞,首次證明成熟哺乳動物的感音毛細(xì)胞也能再生。感音毛細(xì)胞的損傷導(dǎo)致聽力損失,感光細(xì)胞的損失則導(dǎo)致視力損失。Meyer等將iPSC分化為視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞,成功治愈1例回旋狀脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜萎縮癥患者。Singh等將發(fā)育中的感光細(xì)胞移植到盲鼠眼睛中,能夠再次形成視網(wǎng)膜的整個(gè)光敏感層,恢復(fù)視覺。

2.4.5內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病Tateishi等將正常人iPSC培養(yǎng)成胰島素分泌型的胰島細(xì)胞,其不僅能分泌C肽和胰高血糖素,而且能通過感受葡萄糖的刺激來調(diào)節(jié)C肽的分泌。Maehr等用1型糖尿病患者的成纖維細(xì)胞來源iPSC分化出了具有胰島素分泌功能的細(xì)胞。這些研究使糖尿病患者特異細(xì)胞治療成為可能。

2.4.6生殖系統(tǒng)疾病Park等將iPSC體外分化并分離得到原始生殖細(xì)胞,其與體內(nèi)分離的原始生殖細(xì)胞在基因表達(dá)上極相似。Hayashi等將小鼠ESC和iPSC在體外誘導(dǎo)成為原始生殖細(xì)胞樣細(xì)胞并分化為功能正常的和卵子。如果能進(jìn)一步將人原始生殖細(xì)胞體外分化為和卵子,就有望治療不孕不育癥。

2.4.7運(yùn)動系統(tǒng)疾病杜氏肌營養(yǎng)不良是一種X染色體隱性遺傳病,患者早期即出現(xiàn)肌肉無力或萎縮,嚴(yán)重威脅生命安全。Filareto等將杜氏肌營養(yǎng)不良小鼠皮膚細(xì)胞重編程為了iPSC,進(jìn)行遺傳修復(fù),再分化成骨骼肌干細(xì)胞進(jìn)行移植治療,能產(chǎn)生功能性肌肉,并檢查到新形成的肌纖維表達(dá)修復(fù)后的標(biāo)記,證明了iPSC技術(shù)結(jié)合遺傳修復(fù)技術(shù)治療杜氏肌營養(yǎng)不良的可行性。Diekman等利用iPSC在小鼠實(shí)驗(yàn)中培育出無再生能力的軟骨,有望成為人造軟骨組織的來源。

2.4.8腫瘤Chen等用小鼠iPSC培育出了癌癥干細(xì)胞,并確認(rèn)其發(fā)展成癌細(xì)胞的過程。Yang等發(fā)現(xiàn)人類iPSC來源的神經(jīng)干細(xì)胞可以靶向腫瘤,或可用于聯(lián)合基因治療,抑制腫瘤生長。Vizcardo等從惡性黑色素瘤患者體內(nèi)提取出T淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)出iPSC再分化成為T淋巴細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)這些T細(xì)胞能夠識別黑色素瘤特異性蛋白黑色素瘤抗原1,繼續(xù)攻擊癌細(xì)胞。此方法能夠大量培養(yǎng)T淋巴細(xì)胞,有望在此基礎(chǔ)上開發(fā)出治療癌癥的新型免疫療法。

2.4.9其他人類疾病CCR5(C-Cchemokinereceptortype5)是人類免疫缺陷病毒進(jìn)入靶細(xì)胞的重要輔助受體,缺乏CCR5使人類免疫缺陷病毒不能感染人體。Yao等用鋅指核酸酶技術(shù)剔除患者iPSC的CCR5基因,并誘導(dǎo)成造血干細(xì)胞,為艾滋病的治療提供一條新的可能途徑。Arakaki等將小鼠iPSC與小鼠齒源性上皮細(xì)胞共培養(yǎng),轉(zhuǎn)化為成釉細(xì)胞,且含有作為牙釉質(zhì)成分的成釉蛋白,這對牙齒再生和修復(fù)研究至關(guān)重要。

3展望

第2篇:細(xì)胞技術(shù)論文范文

緩沖材料及其應(yīng)用

1常用緩沖材料

發(fā)泡植物纖維是近幾年來研究的一個(gè)熱點(diǎn),國內(nèi)外都在努力開發(fā)這類材料。國外主要研究不添加化學(xué)發(fā)泡劑,通過水蒸氣的作用發(fā)泡,形成顆粒型發(fā)泡紙漿;而國內(nèi)則是采用發(fā)泡劑產(chǎn)生發(fā)泡,工藝較簡單,但是生產(chǎn)和使用后對環(huán)境具有隱患,該技術(shù)還有待改進(jìn)和提高。順應(yīng)當(dāng)代環(huán)保及綠色理念,許多新型緩沖材料不斷產(chǎn)生。成培芳等以淀粉/纖維作為原料制備可降解緩沖包裝材料。Shi等和Lu等分別以向日葵莖稈和毛竹竹漿作為開發(fā)生物緩沖包裝材料的原料,與發(fā)泡聚乙烯材料相比較,其物理特性和緩沖系數(shù)表現(xiàn)出更好的防護(hù)性能,并且安全無污染,可以替代石化產(chǎn)品作為新型的生物緩沖包裝材料。

2緩沖材料的減振作用

研究各種緩沖材料的減振效果,有助于設(shè)計(jì)和開發(fā)減振包裝。不同緩沖材料類型、緩沖材料的厚度、包裝結(jié)構(gòu)吸收振動沖擊的能量不同,減振效果表現(xiàn)不同。緩沖材料對果蔬振動保護(hù)的作用主要在于緩沖襯墊對沖擊能量的吸收、沖擊對緩沖襯墊的壓縮變形,緩沖材料的種類、厚度、包裝結(jié)構(gòu)對其減振效果都有一定的影響。了解各種因素對減振效果的影響對減振包裝設(shè)計(jì)具有很強(qiáng)的理論指導(dǎo)作用。

2.1材料種類

具有高滯后吸收能量的材料,如塑料、紙板、泡沫、植物纖維等,均能夠減少運(yùn)輸中振動損傷的程度,但是不同的緩沖材料對果蔬減振效果不同。Raghav和Gupta用寬松的水稻秸稈和紙碎片作為水果層之間的緩沖材料,發(fā)現(xiàn)沒有緩沖包裹的水果比包裹的水果腐爛速度要快得多,說明水果層之間的緩沖材料有利于減少運(yùn)輸振動損傷。以竹籃為包裝材料時(shí)芒果損傷程度嚴(yán)重,以泡沫網(wǎng)包裹的瓦楞紙箱對芒果具有最優(yōu)的保護(hù)作用。紙包裹和泡沫網(wǎng)都能大大減少黃花梨的運(yùn)輸振動,泡沫網(wǎng)緩沖材料對于保持黃花梨貯運(yùn)品質(zhì)效果更好,而紙包裝的黃花梨酶活性比泡沫網(wǎng)箱高出許多,但是硬度反而降低。Jarimopas等發(fā)現(xiàn)塑料和紙板均具有降低沖擊損傷作用,但是紙板的減振效果優(yōu)于塑料板,緩沖能量與蘋果的大小無關(guān)。Chonhenchob和Singh認(rèn)為紙板緩沖和泡沫網(wǎng)緩沖材料具有相似的保護(hù)作用,但是紙板包裝更有利于番木瓜的成熟。但是Çakmak等認(rèn)為在中長期高速運(yùn)輸過程中,紙板包裝運(yùn)輸增加了果品內(nèi)部的溫度,導(dǎo)致果品品質(zhì)的降低,而聚苯乙烯包裝盒可以減小這種負(fù)面反應(yīng)。李春飛等也發(fā)現(xiàn),采用瓦楞紙板襯墊、發(fā)泡塑料網(wǎng)作緩沖包裝時(shí),均可有效地降低蘋果損傷率,發(fā)泡塑料網(wǎng)對蘋果的整體保護(hù)特性優(yōu)于瓦楞紙板襯墊。

2.2材料厚度

不同厚度的緩沖材料產(chǎn)生不同的緩沖作用,在一定范圍內(nèi),緩沖材料的厚度越大,緩沖吸收能量越大,減振效果好。多層瓦楞紙板能量吸收顯著大于單層,多層瓦楞紙板抗沖擊能力強(qiáng),雙壁瓦楞紙板箱較單壁有利于減少蘋果的損傷率。當(dāng)緩沖材料厚度超過一臨界值時(shí),甜羅望子損傷率不再發(fā)生變化,以30%5mm大小的泡沫球與甜羅望子混合在15cm直徑、20cm高度的瓦楞紙箱中,甜羅望子的損害率最小。

2.3包裝結(jié)構(gòu)

包裝結(jié)構(gòu)的不同對緩沖性能也有一定的影響,盧立新等研究表明,瓦楞紙板襯墊與隔檔可以減小梨損傷率達(dá)15%~25%,瓦楞紙板襯墊、隔檔以及網(wǎng)罩的聯(lián)合包裝形式可以使梨損傷率減小35%~45%。實(shí)際物流過程中,果品常常堆積多層,研究發(fā)現(xiàn)多層蘋果的總損失體積與其吸收總能量存在線性關(guān)系,而其中的單個(gè)蘋果不存在線性關(guān)系,盧立新建立了多層果實(shí)跌落沖擊模型。

包裝箱所處堆碼層數(shù)對果實(shí)的振動損傷有重要的影響,最上層包裝箱內(nèi)梨果實(shí)的損傷最大,最下層梨果實(shí)的損傷次之,中間層梨果實(shí)的損傷最??;在同一包裝箱內(nèi),最上層梨果實(shí)損傷最大,中間兩層次之,最下層最小。但是李春飛等研究發(fā)現(xiàn),瓦楞紙板內(nèi)部隔檔可以減小蘋果的損傷率,同一種緩沖包裝的中間層蘋果的損傷率最大,底層蘋果損失率次之,頂層蘋果損傷率最小。雙壁瓦楞紙板箱較單壁減振效果較好,多層瓦楞紙板作為緩沖介質(zhì)夾層結(jié)構(gòu)減振效果較好,因?yàn)槎鄬硬y夾層結(jié)構(gòu)振動能量吸收顯著大于單層結(jié)構(gòu),多層瓦楞紙板具有重復(fù)抗沖擊能力,減小果實(shí)的振動損傷程度。

模擬振動試驗(yàn)

運(yùn)輸過程中不同路面造成的沖擊和振動之間的加速度存在明顯差異,在模擬振動損傷時(shí),必須把沖擊和振動分開,達(dá)到實(shí)際振動隨機(jī)性。通過模擬運(yùn)輸試驗(yàn),在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)再現(xiàn)實(shí)際運(yùn)輸環(huán)境,通過包裝內(nèi)果蔬的損傷情況來評定包裝系統(tǒng)的減振效果,是目前開發(fā)或改進(jìn)緩沖包裝,解決果蔬運(yùn)輸損傷的最有效途徑。康維民等通過模擬運(yùn)輸振動試驗(yàn),確定了運(yùn)輸模擬試驗(yàn)的振動頻率、振動加速度、振動時(shí)間參數(shù)。Thompson等通過模擬振動運(yùn)輸開發(fā)了一套新的水果包裝系統(tǒng),當(dāng)結(jié)合一個(gè)塑料翻蓋或瓦楞紙板控制器時(shí),這套包裝運(yùn)輸系統(tǒng)幾乎可以防止梨的所有振動損傷。

1振動頻率

通過模擬實(shí)際運(yùn)輸條件,在一定頻率范圍內(nèi)進(jìn)行振動掃描,確定共振頻率。黃翔飛等發(fā)現(xiàn),共振頻率隨著包裝箱層數(shù)的增加而增大,箱內(nèi)梨果實(shí)的共振頻率隨著激勵(lì)源加速度的增加而減小。在相同加速度條件下,振動頻率越小,梨越容易產(chǎn)生損傷。因此,果蔬損傷主要產(chǎn)生在低頻范圍內(nèi),Barchi等研究發(fā)現(xiàn),在頻率為13-25Hz范圍內(nèi),枇杷損傷從底部到頂部逐漸加強(qiáng)。Shahbazi等模擬卡車運(yùn)輸西瓜的研究中也發(fā)現(xiàn),在7.49Hz和13.03Hz產(chǎn)生損傷率峰值。但是,Berardinelli等模擬梨運(yùn)輸振動損傷時(shí)發(fā)現(xiàn),振動頻率與振動加速度會產(chǎn)生交互作用,在出現(xiàn)振動加速度峰值的頻率范圍內(nèi),不同包裝箱所處位置所受的振動加速度不同,因此在減振包裝設(shè)計(jì)時(shí),應(yīng)考慮到多方面的影響因素。

2振動加速度

振動加速度分為穩(wěn)定振動條件和隨機(jī)振動條件下的加速度,隨機(jī)振動條件下進(jìn)行模擬振動試驗(yàn),以隨機(jī)振動加速度進(jìn)行實(shí)際運(yùn)輸時(shí)間的振動,水果的振動損傷和實(shí)際運(yùn)輸條件下的相同。振動時(shí)間和振動加速度具有相關(guān)性,為提高試驗(yàn)效率,縮短試驗(yàn)時(shí)間,在進(jìn)行模擬振動試驗(yàn)時(shí),可以通過改變振動加速度來確定振動時(shí)間。模擬振動時(shí)間越長,梨果實(shí)損傷越大。

振動時(shí)間對梨果實(shí)損傷也受到包裝方式的影響,不同包裝方式條件下,梨果實(shí)損傷隨振動時(shí)間的變化不同。振動加速度越大,梨越容易受損傷,西瓜振動損傷隨著加速度的增加而增加,而且西瓜肉的損害明顯高于西瓜皮。貨車前后部的振動加速度幅值最高峰分別是0.51和0.83m/s,車廂后部的振動加速度顯著高于車廂前部,使得車廂后部的梨損傷要高于車廂前部同樣高度堆放的。在車廂內(nèi)同一位置,頂部塑料箱所受的振動加速度高于底部塑料箱,因此,裝載頂部塑料箱內(nèi)的梨損傷情況顯著高于裝在底部塑料箱的。但是Zeebroeck等研究發(fā)現(xiàn)在高峰值加速度時(shí),位置從高往低,擠壓不斷加強(qiáng),因此蘋果受到的擠壓損傷逐漸增加。

3振動損傷檢測

果蔬模擬損傷運(yùn)輸過程中往復(fù)振動產(chǎn)生的損傷,可以根據(jù)Palmgren-Miner理論和S-N曲線來定量評價(jià)。果蔬因振動引起的機(jī)械損傷會產(chǎn)生一系列生理異常,影響果蔬的貯藏,如表皮腐爛、呼吸加強(qiáng)、乙烯釋放量增多、電導(dǎo)率升高等。Jiang和Shiina研究表明,以表皮破損程度、呼吸和乙烯、電導(dǎo)率和吸光度為指標(biāo),可以評價(jià)振動引起的果蔬損傷程度。

由于果蔬損傷后能量吸收發(fā)生變化,可以通過能量吸收、聲波和超聲波、X射線、熒光、核磁共振等物理方法來檢測振動損傷。通過實(shí)驗(yàn)室模擬公路運(yùn)輸果蔬所受的振動,可以從振動頻率、振動加速度和振動時(shí)間等不同方面來研究果蔬振動損傷模型,有很強(qiáng)的理論指導(dǎo)意義和現(xiàn)實(shí)價(jià)值,有助于加強(qiáng)貯運(yùn)中果蔬保鮮和減少果蔬損傷,同時(shí)也是減振包裝設(shè)計(jì)步驟中關(guān)鍵的一環(huán)。

減振包裝設(shè)計(jì)

減振包裝,又稱為防振、隔振包裝,它是通過在包裝內(nèi)設(shè)計(jì)具有高阻尼特性的隔振墊層,使外界振動傳遞到被包裝產(chǎn)品后,產(chǎn)品被激勵(lì)的加速度不超過脆值,減小產(chǎn)品在功能和形態(tài)上的損傷。減振包裝設(shè)計(jì)形式大致可以分為兩類:一類是以防沖擊破損為主的包裝設(shè)計(jì),應(yīng)選擇具有強(qiáng)壓縮能力、高彈性的材料,適用于沖擊破壞強(qiáng)度高于振動破壞強(qiáng)度的產(chǎn)品;另一類是以減振為主的包裝設(shè)計(jì),側(cè)重強(qiáng)衰減能力、高阻尼特性材料,適用于由于長期運(yùn)輸振動易產(chǎn)生疲勞損傷、脆值低的產(chǎn)品,例如振動敏感性強(qiáng)的水果和蔬菜,因此果蔬的減振包裝設(shè)計(jì)常以防振為主要目標(biāo)。

減振包裝設(shè)計(jì)的核心在于調(diào)節(jié)防振襯墊的傳送率來控制產(chǎn)品的共振響應(yīng),產(chǎn)品、容器以及高阻尼性材料構(gòu)成產(chǎn)品包裝系統(tǒng),可以看作“質(zhì)量-彈簧系統(tǒng)”模型,當(dāng)忽略外包裝箱的彈性和緩沖材料的質(zhì)量時(shí),可視為單自由度線性模型。

果蔬減振包裝設(shè)計(jì)必須按照一定的要求進(jìn)行。首先,必須確定果蔬流通環(huán)境的條件,了解果蔬自身生理和力學(xué)特性,設(shè)計(jì)襯墊材料的結(jié)構(gòu)和尺寸;然后,進(jìn)行模擬振動損傷試驗(yàn),確定振動環(huán)境條件,主要是振動頻率、加速度及最大耐受時(shí)間;最后,確定在既定振動環(huán)境條件和損傷率下果蔬振動損傷脆值、疲勞損傷閾值,果品允許損傷率的確定要綜合考慮果品自身特性、運(yùn)輸條件及綜合成本等,確定襯墊材料的種類。在以上基礎(chǔ)上,確定不至于引起果品過度損傷的系統(tǒng)振動傳遞率,選擇合適的襯墊,設(shè)計(jì)合理的包裝結(jié)構(gòu),最后進(jìn)行振動模擬試驗(yàn),進(jìn)行試驗(yàn)校核。

第3篇:細(xì)胞技術(shù)論文范文

在將繼電保護(hù)自動化技術(shù)應(yīng)用到電力系統(tǒng)中之后,能夠降低電壓,同時(shí)增強(qiáng)電流,但會導(dǎo)致各項(xiàng)運(yùn)行參數(shù)出現(xiàn)與實(shí)際參數(shù)不相符現(xiàn)象。繼電保護(hù)自動化系統(tǒng)擁有自動切斷電力系統(tǒng)線路的功能,以維護(hù)電力系統(tǒng)的正常運(yùn)作。供電系統(tǒng)采用的監(jiān)控技術(shù)是衛(wèi)星定位,該技術(shù)的運(yùn)用,有助于及時(shí)發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)運(yùn)行過程中存在的問題,同時(shí)借助電路的遠(yuǎn)程操控方式,分析產(chǎn)生故障的原因,并采取措施加以維護(hù)。繼電保護(hù)裝置具有很多特點(diǎn),如操作簡單、維護(hù)方便、參數(shù)自動分析對比等,能夠給予供電系統(tǒng)有效的保護(hù)。在現(xiàn)代網(wǎng)絡(luò)技術(shù)不斷發(fā)展的同時(shí),繼電保護(hù)裝置也處于不斷更新還換代中。通過對網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的應(yīng)用,繼電保護(hù)裝置的實(shí)用性不斷增強(qiáng),促使人力資源使用效率得以提高。

2電網(wǎng)系統(tǒng)中對繼電保護(hù)自動化技術(shù)的具體運(yùn)用分析

2.1繼電保護(hù)自動化技術(shù)對線路的接地保護(hù)

對于電力系統(tǒng)自動化保護(hù)裝置,從線路接地的不同設(shè)置上來說,有兩種不同的方式。第一種是要保證電路出現(xiàn)問題時(shí),第一時(shí)間將電源切斷,從而保障電路整體的安全性,這種是在大電流情況下實(shí)施的保護(hù)措施,因此被稱為大電流型接地保護(hù)電路。而另一種則是要保證在電路出現(xiàn)小問題時(shí),及時(shí)發(fā)出預(yù)警信號,使相關(guān)人員能夠盡快維修,這種電路主要針對小電流經(jīng)過情況下實(shí)施的保護(hù)措施,也被成為小電流型接地保護(hù)電路。當(dāng)電力系統(tǒng)電路粗線出現(xiàn)問題時(shí),采取一定的措施,可以在短時(shí)間內(nèi),促使電路恢復(fù)正常運(yùn)轉(zhuǎn)。以下三種為比較常見的情形:(1)零序電壓。在正常的電路系統(tǒng)中不存在零序電壓情況,電力系統(tǒng)的三個(gè)電壓屬于對稱關(guān)系,且每一個(gè)系統(tǒng)都相互獨(dú)立。但當(dāng)電路出現(xiàn)問題時(shí),零序電壓會在電路中出現(xiàn),保護(hù)裝置將在這種情況下,則會對系統(tǒng)發(fā)出預(yù)警信號,并自動完成電壓降低工作,使得維修人員能夠及時(shí)根據(jù)電壓情況確定故障來源。(2)零序電流。電路出現(xiàn)問題時(shí),零序電壓的產(chǎn)生,會引發(fā)零序電流的升高。此時(shí),保護(hù)裝置會自動斷開電源,最大限度的保護(hù)整個(gè)電路。(3)零序功率。零序電流的升高范圍,隨著故障的出現(xiàn)而保持相對穩(wěn)定性,此時(shí)的零序功率會自動改變方向,這樣就能夠確保裝置,有效預(yù)測整個(gè)電路的故障,并給予相應(yīng)的保護(hù)。

2.2繼電保護(hù)自動化技術(shù)對變壓器的保護(hù)

變電器在電力系統(tǒng)中扮演著重要角色,其能夠改善電力系統(tǒng)的運(yùn)行狀態(tài),達(dá)到穩(wěn)定運(yùn)行的目的,同時(shí)強(qiáng)化電力系統(tǒng)的運(yùn)行安全性,防止電力事故的發(fā)生。

2.3技術(shù)是影響變壓器的關(guān)鍵性因素

(1)變壓器接地保護(hù)。電壓器的種類有兩種,分別為接地和不接地。對于第一種可以通過零序電流對其進(jìn)行保護(hù)。而第二種則通過零序電壓進(jìn)行保護(hù)。(2)變壓器瓦斯保護(hù)。變壓器在應(yīng)用的過程中存在一定的危險(xiǎn)性,尤其是絕緣材料、油料等易被分解的物質(zhì),在具體應(yīng)用過程中一旦受到電弧影響,就會產(chǎn)生危害人體健康的氣體。所以需要建立預(yù)警系統(tǒng)一旦油箱受到危害,產(chǎn)生毒氣,就應(yīng)立即斷電,同時(shí)發(fā)出預(yù)警信號。(3)變壓器短路保護(hù)。短路是變壓器常見問題之一,在實(shí)際工作過程中,一旦出現(xiàn)短路現(xiàn)象,就會造成變壓器工作停滯,進(jìn)而影響整個(gè)電力系統(tǒng)。因此變壓器應(yīng)提前做好應(yīng)對工作,采用電流繼電器保護(hù)變壓器不受短路的影響。在對變壓器進(jìn)行阻抗保護(hù)時(shí),主要依靠阻抗元件的作用,在運(yùn)轉(zhuǎn)到達(dá)限制時(shí)間后,變壓器就可以自動斷電,避免發(fā)生短路現(xiàn)象。

3繼電保護(hù)自動化技術(shù)對發(fā)電機(jī)的保護(hù)

第4篇:細(xì)胞技術(shù)論文范文

論文摘要闡述少、免耕栽培的保護(hù)性耕作技術(shù)適宜推廣區(qū)域及模式,論述該項(xiàng)技術(shù)的優(yōu)勢,并介紹推廣該項(xiàng)技術(shù)的措施,以指導(dǎo)該項(xiàng)技術(shù)的進(jìn)一步推廣應(yīng)用。

少、免耕栽培保護(hù)性耕作技術(shù)是一項(xiàng)集保護(hù)性耕作與輕型簡約栽培于一體的先進(jìn)適用技術(shù),通過少、免耕,秸稈殘茬覆蓋,合理深松,化學(xué)除草滅蟲,達(dá)到保水、保土、保肥、抗旱增產(chǎn)、節(jié)本增效的目的,體現(xiàn)了發(fā)展優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、節(jié)本、高效以及生態(tài)安全的現(xiàn)代農(nóng)業(yè)內(nèi)涵,是農(nóng)業(yè)部“十一五”期間重大推廣技術(shù)之一。

1少、免耕栽培的保護(hù)性耕作技術(shù)適宜推廣區(qū)域及模式

(1)高原風(fēng)沙區(qū)。推廣一年一作小雜糧技術(shù)體系,采用留茬固土、免耕覆蓋、輪作倒茬等保護(hù)性耕作技術(shù)措施。該區(qū)域要在改善耕地質(zhì)量的過程中,實(shí)現(xiàn)控制土壤侵蝕和水土流失,保護(hù)生態(tài)環(huán)境。

(2)丘陵山區(qū)。推廣一年一作玉米技術(shù)體系,普及實(shí)施免耕播種、秸稈覆蓋、中耕除草等保護(hù)性耕作技術(shù)措施。在重點(diǎn)實(shí)現(xiàn)培肥地力、穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的同時(shí),達(dá)到防止水土流失,改善生態(tài)條件的目標(biāo)。

(3)盆地周圍山區(qū)。推廣一年一作小麥、小麥—豆類一年兩作、小麥—玉米—豆類兩年三作技術(shù)體系,實(shí)施免耕播種、秸稈覆蓋、化學(xué)除草、深松淺松等保護(hù)性耕作技術(shù)措施。重點(diǎn)解決好治旱改土、保護(hù)生態(tài)、提高糧食品質(zhì)。

(4)平川盆地區(qū)。推廣一年一作玉米、小麥—玉米兩茬平作水、旱地技術(shù)體系。在水、旱地上普及應(yīng)用免耕播種、多種形式秸稈覆蓋、淺松、深松、化學(xué)除草為主要內(nèi)容的機(jī)械化保護(hù)性耕作措施。立足于改善農(nóng)田生態(tài)環(huán)境,旱地水地并舉,提高農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量和效益。

(5)丘陵盆地區(qū)。推廣小麥—豆類一年兩作、小麥—玉米—豆類兩年三作技術(shù)體系。推廣普及秸稈覆蓋、免耕播種等技術(shù),以達(dá)到蓄水保水、治旱改土,培肥地力,改善生態(tài)環(huán)境,提高土地產(chǎn)出率。

2少、免耕保護(hù)性耕作栽培技術(shù)優(yōu)勢

(1)有效地減少了水土流失和土壤風(fēng)蝕,改善了生態(tài)環(huán)境。山西省臨汾市堯都區(qū)小麥免耕栽培試驗(yàn)區(qū)試驗(yàn)表明,試驗(yàn)區(qū)地表徑流量比傳統(tǒng)耕作減少51.2%,土壤蓄水能力比傳統(tǒng)耕作提高11%~17%;壽陽玉米免耕試驗(yàn)區(qū),地表徑流量減少55%,土壤流失量減少95%,土壤蓄水能力提高9%~15%。根據(jù)初步估算,如果山西的440萬公頃耕地全部實(shí)施少、免耕保護(hù)性耕作栽培,每年減少土壤流失量可達(dá)9520萬噸,占全省水土流失量最大值的70%,這就能解決山西大部分地區(qū)的水土流失問題。另一方面,少、免耕保護(hù)性耕作對農(nóng)田不再進(jìn)行耕翻、耙耱等作業(yè),實(shí)施作物殘茬覆蓋和留茬固土,能有效地減少土壤風(fēng)蝕,可有效遏制沙塵暴的發(fā)生。

(2)少、免耕保護(hù)性耕作技術(shù)能有效增強(qiáng)抗旱能力,提高單位面積產(chǎn)量。所有少、免耕保護(hù)性耕作示范區(qū)都能獲得增產(chǎn),而且越旱的年份增產(chǎn)幅度越大。2002年全省19.27萬公頃示范面積,年糧食總產(chǎn)量達(dá)到89萬噸,平均產(chǎn)量5138.1kg/hm2,比對照田增加19.57%,比2001年增加25.24%。堯都區(qū)是山西中澳項(xiàng)目試驗(yàn)區(qū),也是國家級少、免耕保護(hù)性耕作示范推廣基地,2000年在全區(qū)降雨量僅為328.1mm的特大干旱情況下,少、免耕栽培的保護(hù)性耕作試驗(yàn)區(qū)小麥產(chǎn)量達(dá)到2340kg/hm2,而傳統(tǒng)耕作的只有1110kg/hm2,增產(chǎn)幅度達(dá)到110%;2003年項(xiàng)目區(qū)小麥產(chǎn)量達(dá)3600kg/hm2,比傳統(tǒng)耕作區(qū)增產(chǎn)20%。潞城市免耕栽培的保護(hù)性耕作示范推廣基地,2002年保護(hù)性耕作玉米產(chǎn)量8874kg/hm2,比傳統(tǒng)耕作區(qū)增產(chǎn)13.5%。

(3)少、免耕保護(hù)性耕作技術(shù)能有效地降低生產(chǎn)成本,增加農(nóng)民收入。據(jù)我們對7個(gè)重點(diǎn)示范基地的調(diào)查,少、免耕保護(hù)性耕作栽培比傳統(tǒng)耕作作業(yè)次數(shù)減少1~7次,且減少了人畜作業(yè)量,農(nóng)業(yè)生產(chǎn)成本比傳統(tǒng)耕作減少11.4%~28.3%,糧食產(chǎn)量增加15%~18%。由于產(chǎn)量增加和成本降低,糧食生產(chǎn)的效益顯著提高,平均純收入比傳統(tǒng)對照區(qū)提高1350~3000元/hm2,對增加農(nóng)民收入具有十分重要的意義。此外,通過少、免耕保護(hù)性耕作栽培能夠有效地培肥地力,提高耕地綜合生產(chǎn)能力,減少天然降雨沖刷和土壤的流失量。壽陽試驗(yàn)區(qū)玉米試驗(yàn)表明,玉米少、免耕保護(hù)性耕作區(qū)土壤有機(jī)質(zhì)含量年平均增加0.046%,比傳統(tǒng)耕作區(qū)增加35.74%,水解氮增加6.55%,速效磷增加16.4%,速效鉀增加10.17%;堯都區(qū)小麥少、免耕保護(hù)性耕作試區(qū)土壤有機(jī)質(zhì)含量年平均增加達(dá)到0.065%。3少、免耕保護(hù)性耕作技術(shù)推廣的措施

(1)從實(shí)際出發(fā),在引進(jìn)國外先進(jìn)保護(hù)性耕作技術(shù)的同時(shí),結(jié)合本地實(shí)際,選擇具有不同耕作制度、自然條件和種植作物建立長期穩(wěn)定的少、免耕保護(hù)性耕作試驗(yàn)基地,對少、免耕保護(hù)性耕作技術(shù)的機(jī)理、技術(shù)體系、生產(chǎn)成本和應(yīng)用效果作長期的試驗(yàn)研究,逐步形成和確立適合本地不同地區(qū)的一年一作玉米、一年一作小麥、小麥—豆類一年兩作和小麥—玉米—豆類兩年三作的少、免耕保護(hù)性耕作技術(shù)體系,這些技術(shù)模式都得到大面積推廣應(yīng)用。

(2)建立科學(xué)的運(yùn)作機(jī)制,抓好典型示范,由于少、免耕保護(hù)性耕作農(nóng)業(yè)與傳統(tǒng)耕作農(nóng)業(yè)有較大的差別,因此必須制定切實(shí)可行的實(shí)施方案,讓農(nóng)民通過試驗(yàn)區(qū)的效果認(rèn)識和掌握少、免耕保護(hù)性耕作技術(shù)。

(3)堅(jiān)持農(nóng)機(jī)、農(nóng)藝結(jié)合,相互滲透、相互促進(jìn)。少、免耕保護(hù)性耕作的農(nóng)藝技術(shù),是靠農(nóng)業(yè)機(jī)械實(shí)施到位的,因此少、免耕保護(hù)性耕作機(jī)具必須滿足農(nóng)藝技術(shù)要求,重點(diǎn)是在有作物殘茬覆蓋的情況下,保證播種質(zhì)量和不翻耕的情況下如何除草。另一方面,少、免耕保護(hù)性耕作是一項(xiàng)不同于傳統(tǒng)耕作技術(shù)的新的耕作方式,要研究新的農(nóng)藝規(guī)范,使農(nóng)機(jī)與農(nóng)藝互相適應(yīng),互相促進(jìn),潛力很大,前景廣闊。

(4)堅(jiān)持連年實(shí)施,避免短期行為。少、免耕保護(hù)性耕作能夠有效地減少土壤水分蒸發(fā)、減少徑流、提高土壤肥力,但要達(dá)到這個(gè)效果就必須連續(xù)堅(jiān)持?jǐn)?shù)年,不得間斷。只有這樣才能實(shí)現(xiàn)少、免耕保護(hù)性耕作技術(shù)的預(yù)期效果。據(jù)臨汾市堯都區(qū)連續(xù)9年對采用少、免耕保護(hù)性耕作示范的小麥地調(diào)查,土壤有機(jī)質(zhì)含量1992年為0.895%,2000年達(dá)到1.37%,這是一個(gè)逐步的量變過程。

(5)強(qiáng)化培訓(xùn),普及少、免耕保護(hù)性耕作知識。少、免耕保護(hù)性耕作是一項(xiàng)集成組裝的綜合性技術(shù),需要綜合運(yùn)用秸稈還田、化學(xué)滅草、合理深松、化肥深施、精量播種和免耕播種等技術(shù)。多年來,示范區(qū)對少、免耕保護(hù)性耕作的掌握程度直接影響到少、免耕保護(hù)性耕作的發(fā)展速度與質(zhì)量。舉辦保護(hù)性耕作技術(shù)短期培訓(xùn)會議、講座,對項(xiàng)目區(qū)的主要管理人員、技術(shù)骨干,從技術(shù)原理、操作規(guī)范、技術(shù)經(jīng)濟(jì)分析等方面進(jìn)行技術(shù)培訓(xùn),并安排實(shí)施項(xiàng)目區(qū)農(nóng)戶、農(nóng)機(jī)手、技術(shù)人員的培訓(xùn)計(jì)劃。

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第5篇:細(xì)胞技術(shù)論文范文

紙張的耐久性取決于纖維素的性質(zhì),盡管纖維素在一定的條件如高溫、高濕、酸、酶、氧化劑等下,可發(fā)生水解和氧化反應(yīng),但只要我們在檔案保護(hù)過程中,注意排除發(fā)生兩大化學(xué)反應(yīng)所需要的條件,就可以使紙質(zhì)檔案的壽命達(dá)到上百年甚至上千年。

電子文件的載體材料是磁性物質(zhì)和光盤。聚酯底基是磁盤和磁帶的支持體。聚酯底基具有易產(chǎn)生靜電而吸引塵埃導(dǎo)致卷曲、易與磁粉脫離、伸長后不易恢復(fù)等缺點(diǎn)。粘和劑起著連接底基和磁粉的作用,它具有易熱脹冷縮、磨損、脫落、粘連、生霉等缺點(diǎn),直接影響信息再現(xiàn)。磁粉中的磁性氧化物顆粒的剩磁感應(yīng)強(qiáng)度是記錄和再現(xiàn)信息的決定因素,它極易受外磁場影響而導(dǎo)致退磁、消磁等。光盤是利用激光進(jìn)行信息存取的,它呈圓盤狀,由盤基、記錄介質(zhì)和保護(hù)層等部分組成。目前光盤常用的記錄介質(zhì)主要有碲、碲合金、硒、碳鋁化合物以及一些在激光熱效應(yīng)作用下易產(chǎn)生物化性質(zhì)變化的材料。這些材料不穩(wěn)定、易氧化、易與堿溶液發(fā)生反應(yīng)。與紙質(zhì)檔案載體相比,電子文件載體材料的壽命要短得多,一般僅為5—15年。

二、環(huán)境條件影響的差異

1、溫濕度影響的差異。不適宜的溫濕度對磁性載體、光盤和紙張均有影響。對紙張而言,高溫高濕,可促進(jìn)紙張發(fā)生水解-氧化反應(yīng),加速紙張內(nèi)部不利化學(xué)成分對紙張的影響,也可使字跡材料發(fā)生擴(kuò)散、洇化現(xiàn)象。而電子文件載體受溫濕的影響方式截然不同。在溫度過高或過低條件下,聚酯底基易膨脹或收縮變形,光盤載體中使用的塑料、鋁和多碳材料也會彎曲變形,影響激光束精確定位和數(shù)據(jù)的讀寫。實(shí)驗(yàn)證明,保存紙質(zhì)檔案的標(biāo)準(zhǔn)溫度為14℃—24℃,相對濕度為45%—60%,而保存電子文件的理想溫度為16℃—20℃,相對濕度為40%±5%,可見,溫濕度對電子文件和紙質(zhì)檔案的影響程度是不同的。

2、灰塵影響的差異?;覊m對紙張的危害主要是機(jī)械磨損紙張、使紙張發(fā)生粘結(jié)而形成“檔案磚”、給紙張帶來霉菌等。而灰塵對電子文件載體的損壞主要有物理損壞、化學(xué)損壞和生物損壞。物理損壞是指污染、劃傷磁盤、磁帶、光盤表面,造成記錄信息的損毀;化學(xué)損壞是指灰塵中所含的化學(xué)成分會不同程度地引起磁盤、磁帶、光盤載體腐蝕、降解等化學(xué)作用而毀壞,造成記錄信息消失;生物損壞是指灰塵是霉菌孢子的傳播者,也是霉菌的培養(yǎng)基、繁殖地,霉菌分泌的酶和有機(jī)酸會損壞磁性載體和光盤,使數(shù)據(jù)丟失。綜上所述,灰塵均可以損壞紙張和電子文件載體。只是對紙張而言,即使灰塵已經(jīng)對其產(chǎn)生實(shí)質(zhì)性的損害,如磨損紙張、形成“檔案磚”、產(chǎn)生色斑和霉斑等,也可通過修復(fù)手段在很大程度上恢復(fù)其所記錄信息。而灰塵一旦對電子文件載體造成危害,載體上所記錄的信息可能會局部丟失,在計(jì)算機(jī)系統(tǒng)上便無法讀出原始信息,使電子文件失去保存價(jià)值。因此,防止灰塵對電子文件載體的危害有特別重要的意義,在電子文件形成和使用過程中,要采取嚴(yán)密的防灰塵措施。

3、外來磁場和機(jī)械震動影響的差異。磁場和機(jī)械震動對紙質(zhì)檔案無任何影響,而對電子文件的磁性載體則是最重要的影響因素。外來磁場作用于磁性載體,能使磁性涂層的剩磁發(fā)生消磁或磁化,造成信號失落或信噪比降低,破壞記錄信息,影響讀出效果。此外,強(qiáng)烈的機(jī)械震動也會影響磁性載體材料中磁分子的排列次序,造成剩磁衰減,從而破壞記錄信號。因而要防止外磁場的影響,如遠(yuǎn)離強(qiáng)磁場,將磁性載體存放在有抗磁性的框架內(nèi)或金屬盒內(nèi)等等,并避免強(qiáng)烈的機(jī)械震動。

4、光線和有害氣體影響的差異。光線和有害氣體對紙張的危害主要是促進(jìn)紙張發(fā)生水解氧化反應(yīng),導(dǎo)致紙張強(qiáng)度的降低。而有害氣體和光線特別是紫外線對電子文件的破壞力更大。有害氣體主要是二氧化硫、硫化氫、二氧化氮和氯氣等具有酸性和氧化性,在一定條件下,腐蝕、破壞磁性載體和光盤,致使盤基帶基老化、變質(zhì)和磁粉脫落,使電子文件信息丟失。光線能使電子文件載體材料發(fā)生光氧化反應(yīng),使盤基帶基老化,強(qiáng)度下降。同時(shí),紫外線的能量足以破壞磁性載體的剩磁的穩(wěn)定性,導(dǎo)致信號衰減,影響磁性記錄信息的讀寫效果。

三、技術(shù)壽命的差異

紙質(zhì)文件一旦形成,其制成材料——紙張、字跡材料、字跡三者永遠(yuǎn)結(jié)合在一起,它的壽命與其內(nèi)部諸因素和保護(hù)環(huán)境條件有關(guān)。而電子文件的壽命不僅與其內(nèi)部諸因素和保護(hù)環(huán)境條件有關(guān),更與技術(shù)革新有關(guān)。因?yàn)殡娮游募峭ㄟ^計(jì)算機(jī)將信息與載體結(jié)合在一起而形成的,必須通過計(jì)算機(jī)才能識讀。一旦技術(shù)過時(shí),則載體上的信息就無法讀出。技術(shù)過時(shí)的表現(xiàn)有兩個(gè)方面,一是技術(shù)革新,使舊的存貯技術(shù)消失。二是由于商業(yè)性的原因,使由單個(gè)廠家生產(chǎn)或銷售的電子文件設(shè)備會由于廠家的破產(chǎn)或改變產(chǎn)品生產(chǎn)而很難找到配套產(chǎn)品。一般說來,大多數(shù)電子文件載體的預(yù)期壽命都超過了識讀它的硬件和軟件的技術(shù)期限,也就是說,技術(shù)過時(shí)對電子文件安全性的影響顯得更為重要。因此,對于電子文件中數(shù)字化信息的長期存取而言,技術(shù)過時(shí)比載體損壞是更為嚴(yán)重的危害。針對技術(shù)過時(shí),歐美國家在理論上提出三種解決辦法:將閱讀電子文件的設(shè)備與軟件保存到某種技術(shù)博物館中;在紙與縮微膠片上制作拷貝;將電子文件轉(zhuǎn)換為盡可能中性格式的文檔。這三種方法只能是在沒有其它更好措施的情況下的暫時(shí)性辦法,因?yàn)殡S著需要保存的電子文件數(shù)量的增大,這三種方法都將花費(fèi)大量的人力物力。最近,信息專家提出了用標(biāo)準(zhǔn)化的方法,即用國際標(biāo)準(zhǔn)化組織用于連接開放系統(tǒng)的互連標(biāo)準(zhǔn),使不同系統(tǒng)和不同軟件的數(shù)據(jù)可以進(jìn)行互換。這種方法不失為解決技術(shù)過時(shí)的新途徑。

四、信息保護(hù)的差異

第6篇:細(xì)胞技術(shù)論文范文

關(guān)鍵詞:中醫(yī)證侯;研究概況;進(jìn)展

【中圖分類號】R255.2 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1672-3783(2012)05-0093-01

1 引言

辨證是中醫(yī)學(xué)的特點(diǎn)與優(yōu)勢之一,也是中醫(yī)藥取得療效的前提。中醫(yī)是以傳承性為主的實(shí)踐醫(yī)學(xué),受生產(chǎn)技術(shù)水平的影響,前人在辨證的時(shí)候主要靠個(gè)人的臨診經(jīng)驗(yàn),摻雜了許多主觀因素與模糊概念,加上眾多的醫(yī)學(xué)流派推崇不同的思辨方式,使證侯的外延與內(nèi)涵愈加復(fù)雜而不可確定。隨著計(jì)算機(jī)、生物技術(shù)的進(jìn)步以及交叉學(xué)科的發(fā)展,中醫(yī)證侯的研究開始了新局面,能否從病、證、癥、生物學(xué)基礎(chǔ)等不同層次中挖掘出其固有的規(guī)律性的聯(lián)系,以確定不同證侯的概念范疇、使辨證更具重復(fù)性和臨床可操作性,這成為大家所探求的方向。眾多學(xué)者為此開展了不少研究工作,筆者就中醫(yī)證侯近十年的研究概況進(jìn)行論述并分析如下。

2 中醫(yī)證侯近十年的研究概況

2.1 證侯研究成果檢索結(jié)果與分析:利用“中醫(yī)”、“證或證侯”、“文獻(xiàn)”、“臨床” 及“動物(實(shí)驗(yàn))”等主題詞檢索CNKI數(shù)據(jù)庫從2000-2008年所收錄的論文,其中文獻(xiàn)研究相關(guān)論文272篇,臨床研究相關(guān)論文5323篇,動物實(shí)驗(yàn)相關(guān)論文238篇。統(tǒng)計(jì)結(jié)果如圖1所示。從圖中可以看出以下特點(diǎn):1)臨床研究是證侯研究的主要方式,這是由中醫(yī)的臨證性所決定的。2)中醫(yī)古籍資源有限、研究成果轉(zhuǎn)換周期較長,是導(dǎo)致文獻(xiàn)研究數(shù)量低的主要原因。

2.2 證侯研究主要切入方向的研究成果檢索結(jié)果與分析:在檢索“證”或“證侯”研究論文的基礎(chǔ)上,以“四診規(guī)范”、“生物學(xué)”、“數(shù)據(jù)挖掘”等關(guān)鍵詞結(jié)合手工進(jìn)一步檢索,獲得近十年發(fā)表的論文中,與四診規(guī)范研究相關(guān)的論文227篇,與生物學(xué)研究相關(guān)論文436篇,與數(shù)據(jù)挖掘相關(guān)論文220篇。其研究態(tài)勢如圖2所示。從圖2中可以看出,相關(guān)研究論文均有逐年上升的趨勢。就近十年而言,證侯生物學(xué)研究相關(guān)論文最多,數(shù)據(jù)挖掘類論文數(shù)量增長迅速。

2.3 證侯的具體研究概況

2.3.1 四診的定性與定量研究:通過四診收集到的癥狀(主要由患者自己敘述出來)、體征(由患者表現(xiàn)出來,通過望、聞、切可知的,包括舌象、脈象、面色、神志狀況)等信息是證侯的構(gòu)成基礎(chǔ)。舌、脈和面色雖客觀存在,但易受周圍環(huán)境、自然光線及醫(yī)者主觀判斷的影響,因此利用物理儀器、高分辨率的數(shù)碼相機(jī)結(jié)合色彩、圖譜分析軟件力求量化已成為趨勢。就舌象客觀化而言,不少學(xué)者對舌色、苔色、舌苔的厚度與濕度、齒痕、紋理特征,甚至對舌體的胖瘦、歪斜,舌下絡(luò)脈的長度、寬度、顏色進(jìn)行了量化分析[2-5],具有一定的臨床符合率。

此外,通過問診所獲取的信息在中醫(yī)證候分類中起著重要的作用。如何控制和把握這些“軟指標(biāo)”,近年來不少學(xué)者也做了很多工作。有學(xué)者把社會學(xué)中的定性研究引入中醫(yī)問診領(lǐng)域[12],建議與患者進(jìn)行深入交談,對患者的語氣、語言表達(dá)方式、神態(tài)、言語內(nèi)容等進(jìn)行綜合分析,以期獲取盡可能多的與病癥相關(guān)的信息,這些信息可能容易被醫(yī)生所忽視,但對證侯的判別起重要作用,能彌補(bǔ)定量研究的缺憾。

2.3.2 證侯生物學(xué)基礎(chǔ)的研究:中醫(yī)證侯的確立是依據(jù)表現(xiàn)型組資料得來的,對于現(xiàn)代生命科學(xué)而言,一個(gè)證候表現(xiàn)型的產(chǎn)生必然有從基因組層次到器官組層次的不同范圍的功能異常[13]。從文獻(xiàn)檢索的結(jié)果來看,涉及細(xì)胞、基因?qū)用娴难芯空撐妮^多,技術(shù)相對成熟;蛋白、代謝組學(xué)層面的論文較少,研究技術(shù)有待完善。

就細(xì)胞層面而言,研究較多的是細(xì)胞因子、細(xì)胞外基質(zhì)及細(xì)胞表面標(biāo)志物在不同證侯下的特異表達(dá)。細(xì)胞因子的相關(guān)性研究趨于熱化主要是因?yàn)椋浩浣閷?dǎo)細(xì)胞間相互影響、作用而形成復(fù)雜的人體調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),這可能是證的實(shí)質(zhì)所在[14];其種類眾多,功能各異,如白細(xì)胞介素、腫瘤壞死因子、趨化性細(xì)胞因子及其細(xì)胞膜受體和可溶性受體等,這些指標(biāo)常見于諸多論文中;檢測方法較為便利,且敏感性強(qiáng)。

2.3.3 利用數(shù)據(jù)挖掘方法的證侯研究:中醫(yī)辨證的過程是醫(yī)者憑借個(gè)人經(jīng)驗(yàn)從患者的一系列癥狀、體征或生物學(xué)指征、外界環(huán)境等復(fù)雜的非線性現(xiàn)象[15]中提取出相互關(guān)聯(lián)的、有內(nèi)在規(guī)律的、特異的組合信息。數(shù)據(jù)挖掘[16]則是從大量的、不完全的、有噪聲的、模糊的、隨機(jī)的數(shù)據(jù)集中識別有效的、新穎的、潛在有用的,以及最終可理解的模式的非平凡過程??梢哉f兩者在獲取信息的方式與過程上有契合之處。

研究者常依據(jù)不同的研究目的及數(shù)據(jù)的特點(diǎn)選擇不同的多元統(tǒng)計(jì)方式。如探討飲食習(xí)慣、居住環(huán)境、體質(zhì)因素等不同的致病因素或生物學(xué)檢測指標(biāo)或某一疾病下各證型的癥狀、體征與該證型之間的關(guān)聯(lián)性多采用回歸法,如進(jìn)一步分析哪些癥狀、體征和生物學(xué)指標(biāo)對區(qū)分不同的證侯有較高的貢獻(xiàn)度,多通過逐步判別分析。

3 結(jié)語

就近年主要的研究成果來看,將宏觀與微觀、定性與定量的研究方式相結(jié)合是證侯研究的可行路徑和發(fā)展趨勢。然而如何將有一定組合規(guī)則和重疊涵蓋關(guān)系的證侯要素進(jìn)行合理的分解,四診宏觀信息如何定量,生物學(xué)微觀指標(biāo)如何定性,二者怎樣結(jié)合,采用什么樣的方式結(jié)合才能真正提示或反應(yīng)、甚而揭示證侯的內(nèi)涵,這是目前研究的困惑與癥結(jié)所在,借鑒現(xiàn)代計(jì)算機(jī)信息處理技術(shù)、生物學(xué)技術(shù)和多學(xué)科交叉的優(yōu)勢互補(bǔ),可能會有所突破。

參考文獻(xiàn)

[1] 郭蕾,王永炎,張志斌.關(guān)于證候概念的詮釋.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2002; 26(2): 5-7

[2] 衛(wèi)保國,沈蘭蓀.舌體胖瘦的自動分析.計(jì)算機(jī)工程,2004; 30(11):25-58

[3] 衛(wèi)保國,沈蘭蓀,蔡軼珩.舌體歪斜的自動分析.計(jì)算機(jī)工程與應(yīng)用,2003; 25(10): 22-26

[4] 沙洪,趙舒,王妍,任超世. 中醫(yī)脈象多信息采集系統(tǒng)的研制.中華中醫(yī)藥雜志,2007; 22(1): 21-24

第7篇:細(xì)胞技術(shù)論文范文

論文關(guān)鍵詞:阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs),香蕉,懸浮細(xì)胞

 

香蕉離體細(xì)胞胚性的恢復(fù)和保持是決定其再生能力的關(guān)鍵,也是香蕉生物技術(shù)育種的重要前提。但是,胚性反應(yīng)低、周期長、胚性易丟失等問題一直制約著香蕉高效胚性懸浮細(xì)胞再生體系的建立及其在生物技術(shù)育種中的應(yīng)用。因此,如何有效地促使香蕉離體細(xì)胞胚性的恢復(fù)并有效地保持,成為香蕉生物技術(shù)發(fā)展的核心問題。

AGPs(Arabinogalactan-proteins,阿拉伯半乳糖蛋白)具有細(xì)胞間信號的作用。研究表明小論文,從不同植物中分離獲得的AGPs對于細(xì)胞的胚性恢復(fù)具有相似的生理功能。Letarte 等發(fā)現(xiàn)采用阿拉伯膠可以代替看護(hù)培養(yǎng)(共培養(yǎng))促進(jìn)小麥(Triticum aestivum L.)小孢子母細(xì)胞發(fā)育成完整的植物[1];Egertsdoter 和 Von Aronld從挪威云杉(Picea abies)種子中提取的AGPs可以促進(jìn)挪威云杉懸浮細(xì)胞的體胚發(fā)育[2]。從胡蘿卜(Daucuscarota)種子中分離的AGPs可以促進(jìn)胡蘿卜懸浮細(xì)胞的體胚發(fā)生[3,4]。Kreuger 等研究發(fā)現(xiàn)從胡蘿卜種子中獲得的AGPs可以促進(jìn)仙客來(Cyclamen persicum)在培養(yǎng)過程中胚性細(xì)胞團(tuán)的增加,認(rèn)為AGPs的活性沒有品種特異性[5]。這些實(shí)驗(yàn)都表明,從不同的植物材料獲得的AGPs具有促進(jìn)其它植物體胚發(fā)生的能力,AGPs在很多植物細(xì)胞胚性的保持上具有重要的作用。李佳等的研究發(fā)現(xiàn)大蕉(Musa paradisiaca Linn. cv. Da JiaoABB)的非胚性懸浮細(xì)胞與貢蕉[Musa acuminata cv. Mas (AA)]的胚性懸浮細(xì)胞懸浮培養(yǎng)液的AGPs含量差別很大[6]。

?GlcY-試劑是一種與AGPs特異性結(jié)合的化學(xué)試劑,具有生物活性,在進(jìn)行AGPs功能的研究時(shí)通常采用添加?GlcY-試劑的方法進(jìn)行。在菊芋(Cichorium)胚性懸浮細(xì)胞的研究中,發(fā)現(xiàn)添加?GlcY-試劑會導(dǎo)致菊芋懸浮細(xì)胞的胚性喪失[7]。本文對具有胚性和不具備胚性的香蕉懸浮細(xì)胞的液體培養(yǎng)基中的AGPs含量進(jìn)行了測定,并通過對胚性懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)基中添加?GlcY-試劑的方法,研究AGPs在香蕉胚性的保持上所起的作用。

1材料與方法

1.1 材料

貢蕉[Musa acuminata cv. Mas (AA)],龍牙蕉‘過山香’品種(Musa AAB Silk cv. ‘Guoshanxiang’),大蕉[Musa paradisiaca Linn. cv. Da Jiao(ABB)],香芽蕉‘威廉斯’品種(Musa AAA cv. Williams)的未成熟雄花序小論文,取自廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹研究所建立的“國家果樹種質(zhì)-廣州荔枝香蕉圃”。

參照魏岳榮等 [8]、李哲等 [9] 的方法,以貢蕉、大蕉、香芽蕉‘威廉斯’的未成熟雄花為外植體建立均質(zhì)的細(xì)胞懸浮系。龍牙蕉‘過山香’的胚性細(xì)胞懸浮系(ECS)的建立參照魏岳榮等的方法進(jìn)行[10]。細(xì)胞懸浮系保持在M2液體培養(yǎng)基[11]中。懸浮培養(yǎng)保持在持續(xù)110 rpm 的旋轉(zhuǎn)搖床,28±1 ℃、黑暗條件下進(jìn)行。

1.2香蕉懸浮細(xì)胞體胚發(fā)生能力的檢驗(yàn)

將懸浮細(xì)胞直接接種到M3培養(yǎng)基[11],計(jì)算體胚發(fā)生頻率作為衡量懸浮細(xì)胞胚性的標(biāo)準(zhǔn)。誘導(dǎo)體細(xì)胞胚的發(fā)生M3培養(yǎng)基組成為:SH培養(yǎng)基[12]中的大量元素和微量元素及其鐵鹽+ MS維生素[13]+ 4.5 μmol/L 生物素 + 680μmol/L 谷氨酰胺+ 2 μmol/L脯氨酸 + 100mg/L 麥芽水解物 + 1.1 μmol/L NAA + 0.2 μmol/L 玉米素 + 0.5 μmol/L 激動素 + 0.7μmol/L 2-二甲基丙烯嘌呤+ 29 mmol/L 乳糖 + 130mmol/L 蔗糖 + 2 g/L Gelrite。具體方法參照魏岳榮的方法進(jìn)行[8],體胚誘導(dǎo)頻率=體胚總數(shù)/ml PCV ECS。

1.3 香蕉懸浮細(xì)胞培養(yǎng)液中的AGPs的含量測定

?GlcY-試劑的制備參照Yariv等的方法[14]進(jìn)行;懸浮細(xì)胞液體培養(yǎng)基中的AGPs濃度通過火箭瓊脂糖免疫電泳方法進(jìn)行測定[15]。

1.4 ?GlcY-試劑對香蕉懸浮細(xì)胞生長狀態(tài)和體胚發(fā)生能力的影響

將?GlcY-試劑按0、5、10、20、40 、60 μM的濃度加入到M2液體懸浮培養(yǎng)基中,龍牙蕉‘過山香’胚性懸浮細(xì)胞按照1.5%濃度分別接種到上述含有不同濃度?GlcY-試劑的培養(yǎng)基中。15 d后計(jì)算懸浮細(xì)胞的PCV(packed cell volume,細(xì)胞密實(shí)體積),并在顯微鏡視野下統(tǒng)計(jì)胚性和非胚性細(xì)胞(ECS/NECS)的比例。

將?GlcY-試劑按照下列濃度加入到M3培養(yǎng)基中: 0、5、10、20、40 μM、60 μM,將接種繼代7-10 d的大顆粒龍牙蕉‘過山香’品種品種懸浮細(xì)胞用于進(jìn)行體胚誘導(dǎo),30 d后統(tǒng)計(jì)體胚發(fā)生率和細(xì)胞總體積,體胚誘導(dǎo)頻率=體胚總數(shù)/ml PCV ECS。

2結(jié)果與分析

2.1不同基因型香蕉懸浮細(xì)胞培養(yǎng)液中的AGPs的含量與體胚發(fā)生的關(guān)系

表1不同基因型香蕉懸浮細(xì)胞的體胚發(fā)生能力與培養(yǎng)基中AGPs含量測定

Table 1 Quantification of thefrequency of somatic embryogenesis and AGPs content in liquid medium of cellsuspensions of different genotype of banana

 

不同基因類型香蕉

Different genotype of banana

AGPs含量(μg/mL)

AGPs content(μg/mL)

體胚發(fā)生頻率(105體胚/mL PCV ECS)

Frequency of somatic embryogenesis ( 105 embryos/mL PCV ECS)

龍牙蕉‘過山香’Musa AAB Silk cv. ‘Guoshanxiang’

56±2.1

3.7±0.7

大蕉Musa paradisiaca Linn.cv.Da Jiao(ABB)

48±1.9

2.6±0.5

貢蕉Musa acuminata cv. Mas (AA)

36±1.5

第8篇:細(xì)胞技術(shù)論文范文

學(xué)生直接進(jìn)入課題組,被要求完成所分配的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,看似繞過選題、立項(xiàng)直接進(jìn)入課題的實(shí)施階段,但因標(biāo)書在描述方面較為概括,某些實(shí)驗(yàn)內(nèi)容或?qū)嶒?yàn)方案在執(zhí)行過程中發(fā)現(xiàn)不盡合理甚至方向偏斜,這就需要發(fā)揮學(xué)生的科研主觀能動性及創(chuàng)新精神。在選題立項(xiàng)方面,課題負(fù)責(zé)人要特別注重個(gè)人科研經(jīng)驗(yàn)的傳授,并將此作為科研規(guī)律性的東西與學(xué)生分享,比如個(gè)人專業(yè)興趣、大量文獻(xiàn)閱讀、相關(guān)領(lǐng)域跨學(xué)科學(xué)習(xí)(如視網(wǎng)膜是腦的延伸組織,中樞神經(jīng)系統(tǒng)學(xué)科領(lǐng)域的發(fā)展對視網(wǎng)膜疾病的研究常常起引領(lǐng)作用)、前期工作基礎(chǔ)及從同行尤其國際前沿會議中獲得靈感,找出興趣領(lǐng)域的熱點(diǎn)及空白,與自己的專業(yè)實(shí)踐及專業(yè)背景相結(jié)合并充分考慮其創(chuàng)新性及可行性。學(xué)生在課題實(shí)施中遇到的具體問題主要通過在科研實(shí)踐中體會、思考與解決,筆者利用自己的科研思維給學(xué)生以啟示。

2提高文獻(xiàn)查閱及文獻(xiàn)處理能力

科研課題的新穎性要求必須查閱相關(guān)的文獻(xiàn)資料,以了解本研究課題的國內(nèi)外研究現(xiàn)狀。文獻(xiàn)檢索、閱讀及處理能力是科研能力的重要一環(huán),對于基礎(chǔ)研究尤其強(qiáng)調(diào)英文文獻(xiàn)的查讀。筆者首先要求學(xué)生精讀基金申請報(bào)告中羅列的參考文獻(xiàn)(主要是英文文獻(xiàn)),透徹理解課題的研究背景及研究目的。在閱讀中發(fā)現(xiàn)問題,進(jìn)一步自行查考相關(guān)文獻(xiàn)并綜合分析信息內(nèi)容?,F(xiàn)階段大部分學(xué)生都能較好使用電子圖書館及網(wǎng)上資源,但英文閱讀能力仍需重點(diǎn)訓(xùn)練及提高,這是從事科研工作重要的基本功,無捷徑可走,只有大量的閱讀。

3掌握基本實(shí)驗(yàn)室技能并與臨床實(shí)踐相結(jié)合

筆者課題常用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)包括視網(wǎng)膜組織切片及鋪片的制作與染色、免疫組織化學(xué)及免疫熒光技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)(包括定量PCR及免疫印記技術(shù))、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞轉(zhuǎn)染等。學(xué)生根據(jù)所安排課題有目的有針對性學(xué)習(xí)上述實(shí)驗(yàn)技能,在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)問題、通過各種途徑解決問題、在反復(fù)的成功與失敗中總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)。經(jīng)過一段時(shí)間的實(shí)踐,他們不但逐漸熟悉并掌握了這些基本實(shí)驗(yàn)技術(shù),其科研思維及科研意志也得到了磨練.這是其他科研培訓(xùn)方式所不能比擬的。需要特別指出的是,由于這些碩士研究生多來自眼科臨床專業(yè),筆者要求他們必須掌握不同層次視網(wǎng)膜的組織和病理學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、不同神經(jīng)元的分類及排列,毛細(xì)血管及各種膠質(zhì)細(xì)胞在視網(wǎng)膜不同層次的分布特點(diǎn)及功能,尤其是視網(wǎng)膜色素上皮與BRUNCH膜及脈絡(luò)膜毛細(xì)血管層的毗鄰特點(diǎn)。以筆者自身的經(jīng)驗(yàn),熟悉視網(wǎng)膜微觀的組織病理學(xué)特點(diǎn)將對今后在臨床中學(xué)習(xí)紛繁復(fù)雜的容易使人產(chǎn)生畏難情緒的視網(wǎng)膜疾病大有裨益。

4實(shí)驗(yàn)結(jié)果匯報(bào)與論文撰寫

第9篇:細(xì)胞技術(shù)論文范文

【關(guān)鍵詞】 免疫學(xué); 實(shí)驗(yàn)技術(shù); 醫(yī)學(xué)碩士生

醫(yī)學(xué)碩士生學(xué)習(xí)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的目的是加深對免疫學(xué)理論知識的理解,驗(yàn)證結(jié)論;提高實(shí)際動手能力以及觀察、思考和分析問題的能力;培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度、創(chuàng)造性思維和科研能力。本文就實(shí)驗(yàn)室教師如何指導(dǎo)碩士生學(xué)好免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)談幾點(diǎn)體會。

1 熟悉實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備

免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的許多儀器和設(shè)備對醫(yī)學(xué)碩士生來說都是第一次接觸。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,首先應(yīng)向?qū)W生詳細(xì)介紹各種儀器設(shè)備,如離心機(jī)、凝膠電泳裝置、CO2培養(yǎng)箱、相差顯微鏡、紫外分光光度計(jì)、蛋白質(zhì)純化層析儀等的使用方法以及注意事項(xiàng),使每一位學(xué)生對儀器的性能與功用都做到心中有數(shù)、操作熟練自如。

2 注重預(yù)實(shí)驗(yàn)的作用

2.1 合理安排預(yù)實(shí)驗(yàn) 每個(gè)實(shí)驗(yàn)出臺之前都必須經(jīng)過預(yù)實(shí)驗(yàn),因?yàn)閷?shí)驗(yàn)材料的廠家、批號不同,可能造成實(shí)驗(yàn)條件的差異而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。只有經(jīng)過預(yù)實(shí)驗(yàn)才能做到心中有數(shù),才能為實(shí)驗(yàn)成功打好基礎(chǔ)。由于醫(yī)學(xué)碩士生要在半年內(nèi)同時(shí)完成幾個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)室教師要根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)統(tǒng)籌安排好實(shí)驗(yàn)時(shí)間、試劑采購和實(shí)驗(yàn)動物訂購等。

2.2 改進(jìn)實(shí)驗(yàn)步驟,做好實(shí)驗(yàn)記錄 實(shí)驗(yàn)前對所有實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行全面的檢查,以保證學(xué)生操作不會因試劑、儀器設(shè)備等質(zhì)量問題而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。同時(shí)為減少影響因素,可對一些實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行適當(dāng)改良,既能優(yōu)化步驟,又可提高實(shí)驗(yàn)的可操作性。另外,實(shí)驗(yàn)室教師要注意對預(yù)實(shí)驗(yàn)的各種條件做好記錄,以備查證。

2.3 做好示范教學(xué) 實(shí)驗(yàn)室教師在操作前要注意做好示教,如通過細(xì)胞培養(yǎng)的示教,學(xué)生可在無菌間近距離地觀看到組織塊的處理、細(xì)胞計(jì)數(shù)等,學(xué)會在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及其生長狀況,注意培養(yǎng)液的顏色變化,及時(shí)換液、傳代等,學(xué)生自己操作時(shí)就不會感到茫然而無從下手。

2.4 分析不同實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因 帶教過程中,教師發(fā)現(xiàn)研究生實(shí)驗(yàn)水平參差不齊,導(dǎo)致不同實(shí)驗(yàn)組的結(jié)果差異很大。實(shí)驗(yàn)室教師應(yīng)針對結(jié)果的不同,和學(xué)生一起分析產(chǎn)生差異的原因,有助于學(xué)生日后獨(dú)立開展研究工作。如在純化鈣調(diào)素時(shí),操作要領(lǐng)掌握不好,電泳結(jié)果就基本不出條帶,實(shí)驗(yàn)室教師要講透提取的步驟與操作要領(lǐng),同時(shí)幫助學(xué)生找出實(shí)驗(yàn)失敗的原因。

3 改革實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容,提高其先進(jìn)性和實(shí)用性

邀請免疫學(xué)專家、任課教師、生物技術(shù)專業(yè)在校生與畢業(yè)生以及參與實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備的技術(shù)人員等,針對免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教材,廣泛征求意見,集思廣益,結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室的條件、經(jīng)費(fèi)、承擔(dān)的科研課題等具體情況,精選一些具有先進(jìn)性和實(shí)用性的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目用于教學(xué),如動物模型的制備、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞培養(yǎng)、蛋白質(zhì)純化等[1]。

4 加強(qiáng)學(xué)生觀察、思考和分析問題能力的培養(yǎng)

結(jié)合實(shí)驗(yàn)室的科研課題,加強(qiáng)學(xué)生觀察、思考和分析問題能力的培養(yǎng),能力培養(yǎng)對提高實(shí)驗(yàn)的成功率是至關(guān)重要的。如通過讓學(xué)生參與慢性應(yīng)激性抑郁癥大鼠模型的制備,使他們在實(shí)踐中學(xué)會動物的飼養(yǎng)、觀察水迷宮、開場試驗(yàn)儀的使用。很多免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)是在體外進(jìn)行的酶催化的生化反應(yīng),而酶促反應(yīng)與溫度密切相關(guān),溫度每升高10℃,反應(yīng)速度大約增加1倍,但溫度超過一定數(shù)值后,酶受熱變性,反應(yīng)速度隨溫度上升而減慢[2]。如在酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)中,加酶標(biāo)抗體后溫度應(yīng)控制在37℃,過高或過低都會影響顯色效果。通過讓學(xué)生參與此類實(shí)驗(yàn)過程,培養(yǎng)其細(xì)致觀察和獨(dú)立分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的能力。

5 培養(yǎng)學(xué)生的科研論文寫作能力

學(xué)生一進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,就將撰寫論文的任務(wù)布置給他們。隨著課題的推進(jìn),學(xué)生逐步經(jīng)歷論文寫作的各個(gè)過程,包括文獻(xiàn)檢索、資料收集、選題、設(shè)計(jì)等,同時(shí)引導(dǎo)學(xué)生理解實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的巧妙所在。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,要求每名學(xué)生進(jìn)行一次論文報(bào)告。此種做法,使學(xué)生的邏輯思維、推理能力等得到了鍛煉,也提高了其科研論文的寫作能力。

參考文獻(xiàn)