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【關(guān)鍵詞】戲劇影視表演;藝術(shù)教育;精神文明
戲劇影視表演對于培養(yǎng)學(xué)生健康的審美觀念和審美能力,陶冶道德情操,培養(yǎng)全面發(fā)展的人才,具有其他學(xué)科所不能替代的重要作用。近幾年來,全國二百多所大學(xué)開設(shè)了戲劇影視表演的相關(guān)課程,戲劇影視表演教育已經(jīng)進(jìn)入大眾化發(fā)展階段。雖然戲劇影視表演的教育普及程度與高等教育的發(fā)展存在差距并難于滿足大學(xué)生的需求,但戲劇影視表演在藝術(shù)教育、特別是高校藝術(shù)教育中的重要性仍不容忽視,本文旨在分析戲劇影視表演在藝術(shù)教育不斷發(fā)展中的有利條件,討論戲劇藝術(shù)表演在藝術(shù)教育乃至綜合人才培養(yǎng)中的可行性。
一、戲劇影視表演的作用
藝術(shù)的美的呈現(xiàn)形式分為形式美和蘊(yùn)含美,戲劇影視表演展現(xiàn)給人美感,是通過畫面、色彩、聲音、結(jié)構(gòu)等形式來表達(dá)的。戲劇影視表演教育不是簡單地組織學(xué)生觀看戲劇、電影、電視,提供娛樂,而是通過戲劇影視表演使學(xué)生辨別真善美和假惡丑,積累文化知識,提高道德觀念和價值觀念,進(jìn)而提高學(xué)生的綜合素質(zhì)。戲劇影視表演教育很大程度上影響著學(xué)生的審美心理,促進(jìn)其審美能力的提高。戲劇影視表演可以有機(jī)的將歷時思維與藝術(shù)思維相互融合,大歷時感知和形象的體驗融合在審美活動中,使人們的思想啟迪、人生感受、情感陶冶和審美享受更加深刻。戲劇影視表演增強(qiáng)人們審美情感的同時,能夠起到良好審美教育作用。這種審美教育可以使人感知人性、生活等的善惡,促進(jìn)生活狀態(tài)的提高。
戲劇影視表演教育對社會整體有積極的教育作用。戲劇影視表演以最大眾化的形式,把故事情節(jié)真實、生動地呈現(xiàn)給人們,使得其受到感動并引起反響。因此,戲劇影視表演教育對整個社會又巨大的影響,能有效促進(jìn)社會精神文明的提高。
二、戲劇影視表演在藝術(shù)教育發(fā)展中的有利條件
我國近現(xiàn)代的藝術(shù)教育,已有近百年的歷史。1912年,先生提出并積極倡導(dǎo)“美育”教育,但是在中國急劇變化的社會條件下,“美育”教育并沒有作為一項長期的國策延續(xù)下去。改革開放以來。隨著我國教育事業(yè)的發(fā)展,應(yīng)試教育已逐步向素質(zhì)教育轉(zhuǎn)軌,為藝術(shù)教育帶來了新的發(fā)展機(jī)遇。
(一)教育對象普及化為戲劇影視表演的發(fā)展提供了教育環(huán)境。各發(fā)達(dá)國家把藝術(shù)教育作為教育中一項必不可少的內(nèi)容認(rèn)真抓好,他們在制訂現(xiàn)代課程計劃時,均把藝術(shù)教育納入其中。例如,美國在地方當(dāng)局有關(guān)規(guī)定的范圍內(nèi),自小學(xué)的課程開始一般都設(shè)有閱讀、寫作、數(shù)學(xué)、社會、科學(xué)、音樂、美術(shù)、體育等課程,而音樂、美術(shù)等屬于必修的基礎(chǔ)課程。在課程設(shè)計中,因戲劇影視表演以最大眾化的形式,把故事情節(jié)真實、生動地呈現(xiàn)給人們,使得其受到感動并引起人們對善惡的思考和判斷,為將戲劇影視鑒賞與表演引入到普遍教育對象上提供了有利的環(huán)境因素。
(二)藝術(shù)教育目標(biāo)整體化為戲劇影視表演的發(fā)展提供了推動力。包括我國在內(nèi)的許多國家從提高人才整體素質(zhì)高度提出了藝術(shù)教育的目標(biāo)要求,大致以將學(xué)生從“純粹藝術(shù)”教育中解脫出來,使學(xué)生在創(chuàng)造藝術(shù)形式和美的感覺的過程中獲得美感體驗為主。藝術(shù)教育的最終目標(biāo)并不是藝術(shù)活動有的形結(jié)果,而“真正重要的是要喚起創(chuàng)造的熱忱,幫助人們提高到一個更高的生活水平。”(《學(xué)會生存》教育科學(xué)出版社P96) 因為戲劇影視表演的作用與藝術(shù)教育目的地趨同性,使得藝術(shù)教育目標(biāo)整體化為戲劇影視表演的發(fā)展提供了推動力。
(三)藝術(shù)教育途徑多元化為戲劇影視表演的發(fā)展提供了空間。實施藝術(shù)教育的途徑是多渠道、多層次的,在藝術(shù)學(xué)科教學(xué)、滲透性藝術(shù)教育、藝術(shù)課外活動等方面,戲劇影視影視教育所具有的影響著學(xué)生的審美心理,促進(jìn)其審美能力的提高的優(yōu)勢借助藝術(shù)教育途徑的多元化得以不斷發(fā)展,藝術(shù)教育的多元趨勢為其健康發(fā)展提供了廣闊的空間。
(四)藝術(shù)師資隊伍專業(yè)化為戲劇影視表演的健康發(fā)展提供了保障:隨著中國教育改革與發(fā)展,推動音樂、美術(shù)、戲劇影視表演等專業(yè)列入必修的人文學(xué)科,大量藝術(shù)人才的引進(jìn),為合理的課程設(shè)計與教學(xué),引導(dǎo)受眾在通過藝術(shù)教育不斷提高自身素質(zhì),確保包括戲劇影視表演等課程的健康發(fā)展上提供了保障。
三、戲劇影視表演與藝術(shù)教育作用的趨同性
戲劇影視表演作為藝術(shù)教育的重要部分和分支,在作用上與藝術(shù)教育有強(qiáng)烈的趨同性,主要表現(xiàn)在:
(一)源于生活,不斷促進(jìn)人在觀察中的思考能力:生活是藝術(shù)的源泉,受眾通過觀察生活、感受生活,體驗來自生活的情感和樂趣,表達(dá)自己的想法和感受。讓學(xué)生通過對生活的參與交流,模仿和表現(xiàn),使學(xué)生表達(dá)自己的情感和愿望,學(xué)生在仿制生活的活動中通過交流,體驗集體游戲的樂趣,懂得相互欣賞和共同分享,既體現(xiàn)了人文精神的培養(yǎng),又符合學(xué)生身心發(fā)展的需要。戲劇影視表演與藝術(shù)教育一樣,不斷促進(jìn)人在觀察中的思考能力。
(二)注重人文,不斷提升人對生活的美感:教育特別是注重情感體驗,提高審美情趣,注重藝術(shù)交流的人文教育。人文主題與知識技能的關(guān)系是統(tǒng)領(lǐng)與被統(tǒng)領(lǐng)的關(guān)系。藝術(shù)課程要求把知識技能的學(xué)習(xí)同音樂能力和人文素養(yǎng)的提高形成有機(jī)的結(jié)合。其別重要的是知識技能只有在情感的激發(fā)下才能夠成為智慧。藝術(shù)教育到任何時候都不能丟棄藝術(shù)的本質(zhì)、特征。藝術(shù)是情感的藝術(shù),失掉了情感,藝術(shù)也無從談起。在藝術(shù)課程的教學(xué)中,只有讓情感得到充分的體驗、感受和理解,才能接觸到藝術(shù)的本質(zhì),也才能讓學(xué)生領(lǐng)會和掌握必要的知識和技能。在不斷學(xué)習(xí),區(qū)分善惡,掌握知識和技能的過程中,注重人文修養(yǎng)、提升生活美感等方面,影視表演與藝術(shù)教育都有不可替代的作用。
(三)專通相融,促進(jìn)智能的發(fā)展:藝術(shù)課的學(xué)習(xí),除了美術(shù)課、音樂課之外,更應(yīng)當(dāng)滲透到其他學(xué)科之中進(jìn)行。一方面,藝術(shù)活動本身離不開其他智能的支撐。另一方面,融入在其他學(xué)科學(xué)習(xí)中的藝術(shù)活動,具有鮮明的形式和豐富的內(nèi)容,使學(xué)生有了更多的接觸和深入理解藝術(shù)的機(jī)會,尤其可以使能力特長不同的學(xué)生都有可能在自己的優(yōu)勢領(lǐng)域內(nèi)增強(qiáng)對藝術(shù)的興趣,促進(jìn)自身各方面智能的發(fā)展。在各科教學(xué)中,選擇合適的美術(shù)、音樂內(nèi)容,表達(dá)各種情緒,使人得到放松,從而使藝術(shù)與其他學(xué)科的整和,發(fā)揮出獨(dú)特的作用。在戲劇影視表演課程恰符合了藝術(shù)教育的這一特征,它把社會、歷史等多方面影視融合為一種藝術(shù),使得人們在不同方面觀察、思考,不斷將知識融合起來,促進(jìn)了智能的發(fā)展。
一、實驗性動畫的概念界定
(一)實驗性動畫的特點
當(dāng)代社會,在各類型電影中,動畫已成為不可忽視的一個重要組成部分,無論是夢工廠、皮克斯?fàn)帄Z奧斯卡最佳動畫長片的年度之戰(zhàn),還是歐洲歷史上最為悠久同時也是最具影響力的動畫節(jié)――薩格勒布國際動畫節(jié)上實驗動畫所占比例的大幅度提升,動畫藝術(shù)多元化進(jìn)程的發(fā)展無一不在昭示著動畫早已脫離了高嶺之花的最初印象,成為貼近人們生活的真實寫照。實驗動畫作為動畫的一個重要分類,在動畫藝術(shù)中具有至關(guān)重要的地位,其創(chuàng)造性的思維構(gòu)想和多種多樣的表現(xiàn)技法給觀眾留下了深刻的印象。最早的一部抽象性動畫是1908年的《Fantasmagorie》,短短一分鐘的影像里,導(dǎo)演EmileCohl用清晰流暢的線條為觀者做了多次變形:例如人變成酒瓶,轉(zhuǎn)而畫面就變?yōu)榫破?、花朵等,形象地闡釋了動畫所帶來的無法單用膠片實現(xiàn)的視覺奇跡。
動畫作為一種新型藝術(shù)形式發(fā)展到今天,早已脫離了最初的漫畫或連環(huán)畫概念,成為一門獨(dú)立的藝術(shù)。隨著科技的不斷推進(jìn),動畫作為傳播媒介的一種新型表現(xiàn)方式,結(jié)合了傳播學(xué)、美學(xué)、建筑學(xué)等諸多藝術(shù)領(lǐng)域的精髓,漸漸深入到人們的生活當(dāng)中,并潛移默化地改變著我們的生活。相較于越來越成熟的商業(yè)動畫,實驗動畫在發(fā)展初期,是由個體來進(jìn)行探索與開發(fā)的,因此實驗動畫保留了個體創(chuàng)作者的自我風(fēng)格、形式及表現(xiàn)主題,且隨著這種現(xiàn)象的不斷推動,如今的實驗動畫無論是內(nèi)涵還是形式都更傾向于創(chuàng)作者本身的極限發(fā)揮。創(chuàng)作者們對實驗動畫的不斷探索、創(chuàng)新,為經(jīng)濟(jì)市場上商業(yè)動畫的發(fā)展開辟了全新的創(chuàng)作方向,提供了源源不斷的技術(shù)支持?;趯嶒瀯赢嫪?dú)具魅力的表現(xiàn)形式和畫面風(fēng)格,在過去的百余年間,誕生了大量具有創(chuàng)造性構(gòu)思和極強(qiáng)個人風(fēng)格化的優(yōu)秀實驗動畫短片,這同時也是實驗動畫完全不同于商業(yè)動畫的標(biāo)志性旗桿。
(二)實驗動畫產(chǎn)生的理論背景
英國美學(xué)家克萊夫?貝爾曾提出這樣一個著名的美學(xué)命題――“在每件作品中,以某種獨(dú)特的方式組合起來的線條和色彩、特定的形式和形式關(guān)系激發(fā)了我們的審美情感。我把線條和顏色的這些組合和關(guān)系,以及這些在審美上打動人的形式稱作‘有意味的形式’,它就是所有視覺藝術(shù)作品所具有的那種共性?!盵1]克萊夫?貝爾一生都致力于研究形式主義,他的這一觀點便是從審美情感中領(lǐng)悟出來的,并創(chuàng)立了自己的一套理論體系――“有意味的形式”。藝術(shù)家在創(chuàng)造作品的時候,自然追求形式美,而形式美又以抽象美作為前提、指導(dǎo)。在此之后,李澤厚先生在《美的歷程》一書中對克萊夫?貝爾的“有意味的形式”作出了自己的解讀,他認(rèn)為也許最古老最傳統(tǒng)的“藝術(shù)形式”最能引發(fā)大眾最普遍的對于美的感受,巧妙的是,這與克萊夫?貝爾的觀點不謀而言――“按照某種不為人知的神秘理解排列和組合的形式,會以某種特殊的方式感動我們?!痹趧赢嫷亩潭虤v史進(jìn)程中,從早期迪斯尼式的黑白動畫到現(xiàn)今皮克斯、夢工廠的商業(yè)動畫,不管是動畫場景風(fēng)格,還是最后呈現(xiàn)的藝術(shù)表達(dá)形式都由一開始寥寥幾筆的單根線條到最終唯美細(xì)致的刻畫,這之間的任何突破都是幾代動畫創(chuàng)作者的不懈努力才最終達(dá)成的。在此期間,又有人不斷嘗試探索何種形式的動畫才能讓觀眾獲得全新的觀感體驗,而此時,一些體現(xiàn)創(chuàng)作者探索精神及創(chuàng)新思維意識,在工藝、技術(shù)等方面有所改進(jìn)的動畫作品應(yīng)時而生,這就是實驗動畫產(chǎn)生的背景。通常來說,實驗動畫的創(chuàng)作者通常為個人或小團(tuán)隊,思維不再受限于商業(yè)動畫的固有模式,更能開展天馬行空的想象力,更好地掌握較為全面的專業(yè)技能。
二、實驗性動畫的獨(dú)特藝術(shù)風(fēng)格
(一)實驗性動畫的材質(zhì)表現(xiàn)
在當(dāng)代的實驗動畫中,材質(zhì)作為一種藝術(shù)表現(xiàn)載體,成為建立畫面美術(shù)風(fēng)格不可或缺的一個重要因素,而動畫的藝術(shù)魅力也在于創(chuàng)作者瞬間的思維爆發(fā)力和材質(zhì)藝術(shù)感染力的結(jié)合。與之相輔相成的是,動畫創(chuàng)作者的想象力和表現(xiàn)力越多元化,就越能促進(jìn)藝術(shù)家們在追求材質(zhì)美的道路上走的越遠(yuǎn)。
實驗動畫的先鋒喬治?史威茲貝爾曾對動畫下過這樣一段定義:“動畫應(yīng)該有它自己的先鋒性,無須過謙,也不是迎合審查的,更不是為了黃金時段的,不應(yīng)該是主流的,而完全應(yīng)該是另類的?!睂嶒瀯赢嫷囊淮蟪删途褪窃趧赢嫴馁|(zhì)上取得了突破,拓展了現(xiàn)代綜合性藝術(shù)材料的界限,運(yùn)用各種材料不同的肌理、質(zhì)感,以及光影甚至是自然界的客觀物體。作為創(chuàng)造性思維的象征性符號,實驗動畫的材質(zhì)在表達(dá)動畫創(chuàng)作者個人藝術(shù)語言風(fēng)格上有著得天獨(dú)厚的優(yōu)勢,它將藝術(shù)家的創(chuàng)造力發(fā)揮到極致,更加突出創(chuàng)作者的風(fēng)格意識。例如,喬治?史威茲貝爾筆下的動畫,主要工具是水粉以及丙烯顏料,喬治打破傳統(tǒng)動畫場景表現(xiàn)的重重約束,將它們?nèi)我饣旌贤磕?,逐幀畫在半透明的賽璐珞片上,寥寥幾筆構(gòu)成有張有弛的幾何線條,或者用顏料堆砌,造成油畫般厚重的涂抹肌理,并使用影像轉(zhuǎn)描技術(shù),使畫面具有強(qiáng)烈的流動感和節(jié)奏感,造成一定的視覺沖擊,突顯了實驗動畫的藝術(shù)表現(xiàn)力。與此同時,這些短片不加對白,配合各種器樂甚至是風(fēng)雨蟲鳴聲,營造出畫面的荒誕感。喬治?史威茲貝爾開創(chuàng)了實驗動畫的多樣表現(xiàn)形式和表現(xiàn)畫面外的深意,成為實驗動畫歷史上旗幟鮮明的標(biāo)桿。
(二)實驗性動畫的裝置空間表現(xiàn)
裝置藝術(shù)也被成為“環(huán)境藝術(shù)”,始于上世紀(jì)60年代,簡而言之就是“空間+材料+情感”的綜合展示藝術(shù)。上世紀(jì)80年代末,裝置藝術(shù)才進(jìn)入中國大眾的視野,其發(fā)展初期是與現(xiàn)代藝術(shù)聯(lián)系在一起,直到近幾年才將動畫元素融入其中,對動畫產(chǎn)業(yè)的創(chuàng)新與發(fā)展起到了推動作用。合理運(yùn)用裝置,不僅可以體現(xiàn)短片的創(chuàng)新構(gòu)思,而且能進(jìn)一步烘托場面氣氛,交代空間結(jié)構(gòu),對影片所呈現(xiàn)出的內(nèi)涵也起著重要的作用。眾多實驗動畫中,以空間設(shè)計為切入點,發(fā)揮設(shè)計初期的創(chuàng)意認(rèn)知的動畫不計其數(shù),例如《Weiss Short Film》就是利用光與影的變化來衍生出不同的空間,直至完成整個動畫短片的創(chuàng)意空間和視覺感受。在整部影片中,創(chuàng)作者只利用極致的黑白來營造出空間,通過劇中主角投射在地上的倒影來表現(xiàn)“障礙”這個概念,使二維換面呈現(xiàn)出三維效果,表現(xiàn)物體的形狀和質(zhì)感。這部實驗動畫打破了實驗動畫之前的局限性,給觀眾塑造出畫面外的空間感,把空間在視覺中的變換與認(rèn)知、角色推動空間變化的關(guān)系充分展現(xiàn)出來,來實現(xiàn)空間與空間之間不同的轉(zhuǎn)換,從而讓觀眾能通過畫面的形象感知空間的不同造型,使展示空間突破傳統(tǒng)的限制,由有限轉(zhuǎn)向無限。
波普藝術(shù)的代表人物草間彌生,更是將裝置與實驗動畫碰撞出激烈的火花。例如她的代表作――“無限鏡屋”就是采取“鏡子”這個元素來構(gòu)成基本裝置,通過鏡子的“反射”特性,塑造出無盡的空間,表現(xiàn)了藝術(shù)的另一個層次,使藝術(shù)和觀者不再被限制在某一個區(qū)域中,在傳統(tǒng)的基礎(chǔ)上拓展了觀者和作品的交流互動方式,這將有助于觀者交互體驗,調(diào)動觀眾興趣。因此,合理的裝置空間的布置能夠駕輕就熟地幫助其營造空間氛圍,由傳統(tǒng)的影片播放形式轉(zhuǎn)向多媒體、綜合材料的展示形式,不僅讓展示和空間之間的內(nèi)涵產(chǎn)生新的意義,更能夠給作品的內(nèi)涵與觀眾的交流在更多層面產(chǎn)生可能,使觀者對作品的解讀能更深刻、更透徹。
三、實驗性動畫的社會性推動作用
(一)實驗動畫引發(fā)的社會反思
實驗動畫以其獨(dú)有的藝術(shù)先鋒性和本質(zhì)魅力獨(dú)立于世界動畫之林,正因為它不受商業(yè)動畫模式制約,不受條條框框的動畫規(guī)則束縛,甚至不要求物質(zhì)回報,更多的是創(chuàng)作者表現(xiàn)自我思維、拒絕平庸的一種精神。同時創(chuàng)作者們還對社會現(xiàn)象、社會風(fēng)氣作出了自己的理解,并將之融入到實驗動畫里。隨著科技的發(fā)展,電子產(chǎn)品不斷更新?lián)Q代,人際關(guān)系必然受社會發(fā)展的影響與制約,因此新媒體環(huán)境中人與人的陌生情緒已充斥著周遭,這無疑沖擊并加速著人們對整個社會道德現(xiàn)狀的深入思考,人與人之間的距離就在不斷的批判聲中越來越遠(yuǎn)。例如1989年奧斯卡最佳實驗動畫短片獎《平衡》,折射出的就是當(dāng)代社會人們在金錢、權(quán)力等利益的誘惑下成為犧牲者,隨之利益又帶來沖突,一直維系著社會道德規(guī)范的平衡被打破,人類對欲望的追求成為社會平衡失控的內(nèi)因,是得到還是失去,《平衡》這部實驗動畫短短幾分鐘,以開放式的結(jié)局引發(fā)觀眾的思考,引起整個社會的反思。由此可見,實驗動畫的魅力絕不僅僅在于畫面的創(chuàng)造性和先行性,更在于引起社會對種種現(xiàn)象的人文關(guān)懷。
1引言
在網(wǎng)頁設(shè)計過程中,相關(guān)設(shè)計人員必須要重視各類藝術(shù)形式的表現(xiàn),保證可以提高網(wǎng)頁設(shè)計效率,增強(qiáng)網(wǎng)絡(luò)設(shè)計效果,達(dá)到網(wǎng)站建設(shè)要求,形成較為良好的發(fā)展體系。
2網(wǎng)頁設(shè)計主要構(gòu)成要素
在網(wǎng)頁設(shè)計藝術(shù)之前,相關(guān)設(shè)計人員要想更好的表現(xiàn)出各類藝術(shù)形式,就要全面了解網(wǎng)頁設(shè)計的主要構(gòu)成要素,保證可以提高網(wǎng)頁設(shè)計質(zhì)量與效率。具體構(gòu)成要素包括以下幾點:
2.1網(wǎng)頁文字設(shè)計要素文字是網(wǎng)頁設(shè)計中信息傳達(dá)的主要手段,是網(wǎng)頁設(shè)計中不可缺少的核心要素,因此,在網(wǎng)頁設(shè)計中,文字將占據(jù)較大面積,網(wǎng)頁設(shè)計人員也可以通過文字的設(shè)計提高網(wǎng)頁設(shè)計質(zhì)量。因此,在
網(wǎng)頁設(shè)計期間,為了增強(qiáng)網(wǎng)頁文字編輯效果,為人們留下深刻的印象,必須要避免出現(xiàn)繁瑣、雜亂的文字,保證可以提高受眾度。同時,在文字編排與設(shè)計期間,還要根據(jù)信息內(nèi)容的特點,對風(fēng)格與文字相互融合,避免出現(xiàn)脫離主題或是與主題相互沖突的現(xiàn)象。例如:在對政府網(wǎng)站的網(wǎng)頁文字進(jìn)行設(shè)計的時候,必須要體現(xiàn)出規(guī)范的特性,字體造型歸正有序,不可以出現(xiàn)雜亂無章的現(xiàn)象;在對公司網(wǎng)站進(jìn)行設(shè)計的時候,網(wǎng)頁文字必須要體現(xiàn)出行業(yè)性質(zhì),或是公司產(chǎn)品特點,這樣,才能提高網(wǎng)頁設(shè)計效率;在對個人頁面進(jìn)行設(shè)計的時候,網(wǎng)頁文字必須要體現(xiàn)出個人的性格特點與追求。這樣,才能提高網(wǎng)頁設(shè)計效率,充分表現(xiàn)出網(wǎng)頁設(shè)計的藝術(shù)形式[1]。
2.2網(wǎng)頁圖形設(shè)計要素
在對網(wǎng)頁圖形進(jìn)行設(shè)計的時候,必須要對網(wǎng)頁讀者的需求進(jìn)行分析,進(jìn)而提高網(wǎng)頁圖形設(shè)計的受眾度。同時,網(wǎng)頁圖形的設(shè)計還要凸顯出網(wǎng)頁文字的主置,發(fā)揮襯托的作用。同時,網(wǎng)頁圖形設(shè)計具有兩重性特點,主要因為網(wǎng)頁圖形不是精彩的文字語言,需要讀者利用視覺理解圖形,使得網(wǎng)頁在整體設(shè)計上,展現(xiàn)出飽滿的優(yōu)勢。由此可見,在網(wǎng)頁圖形設(shè)計過程中,網(wǎng)頁設(shè)計人員必須要重視圖形設(shè)計的視覺效果,將圖形與文字整合在一起,為讀者提供更多的信息,另外,還可以達(dá)到美化網(wǎng)頁頁面的效果,提高網(wǎng)頁設(shè)計質(zhì)量與效率[2]。在網(wǎng)頁圖形設(shè)計期間,設(shè)計人員要注重圖形的分辨率,更好的對其尺寸與范圍進(jìn)行設(shè)計,這樣,才能提高網(wǎng)頁下載效率,更受讀者的歡迎[3]。
2.3網(wǎng)頁色彩設(shè)計要素
在網(wǎng)頁設(shè)計過程中,色彩要素是較為重要的,除了可以滿足人們的審美需求之外,還要提高技術(shù)的應(yīng)用質(zhì)量,全面掌握網(wǎng)站風(fēng)格,體現(xiàn)出配色與風(fēng)格藝術(shù),提高網(wǎng)頁設(shè)計質(zhì)量。在網(wǎng)站設(shè)計過程中,其屬于一種藝術(shù)品,主要因為網(wǎng)頁中不僅包含著優(yōu)美文字,還有新穎的圖片與色彩,可以產(chǎn)生較為良好的視覺效果,刺激讀者的感官,使得頁面更加生動。在此期間,網(wǎng)頁瀏覽者在瀏覽網(wǎng)頁的時候,會注重網(wǎng)頁的色彩設(shè)計,并且為其留下深刻的印象。這就需要網(wǎng)頁設(shè)計人員重點關(guān)注網(wǎng)頁色彩的設(shè)計,進(jìn)而提高網(wǎng)頁設(shè)計質(zhì)量。在網(wǎng)頁色彩設(shè)計期間,設(shè)計人員必須要遵循以下幾點原則:第一,遵循色彩選擇原則。就是根據(jù)網(wǎng)站主題的實際情況,選擇相應(yīng)的主色調(diào),當(dāng)前,部分網(wǎng)頁色彩設(shè)計中都是以淺顏色為主,例如:淺灰色、淺黃色等,可以有效突出網(wǎng)頁頁面的重點。第二,遵循背景色調(diào)搭配特點。就是在網(wǎng)頁設(shè)計期間,設(shè)計人員根據(jù)網(wǎng)站建設(shè)實際需求,對網(wǎng)頁背景進(jìn)行色調(diào)的搭配,在此期間,設(shè)計人員必須要注色調(diào)搭配的科學(xué)性,主要因為如果背景色調(diào)過于強(qiáng)烈,就會形成與網(wǎng)頁文字、圖片相互對立的顏色,導(dǎo)致讀者在閱讀的時候,過于重視網(wǎng)頁背景,不能更好的辨識網(wǎng)頁文字與圖片。由此可見,網(wǎng)頁設(shè)計人員在搭配背景顏色的時候,必須要應(yīng)用單純的顏色,以凸顯出網(wǎng)頁文字與圖形[4]。
3網(wǎng)頁版式設(shè)計措施
網(wǎng)頁是網(wǎng)站信息的傳遞系統(tǒng),設(shè)計人員在對其進(jìn)行設(shè)計的過程中,必須要全面了解網(wǎng)頁設(shè)計要素,將文字、圖形、圖象、標(biāo)志與色彩等繪制成為一個整體,然后對菜單與正文等進(jìn)行編排,這就需要設(shè)計人員在網(wǎng)頁設(shè)計過程中,重視版式的設(shè)計,保證可以提高其設(shè)計質(zhì)量。網(wǎng)頁版式設(shè)計主要就是對網(wǎng)頁頁面進(jìn)行布局,在有限的屏幕之內(nèi),形成良好的視聽多媒體元素排列組合形式,使得頁面設(shè)計個性化思維得以有效展現(xiàn)。然而,當(dāng)前很多網(wǎng)頁設(shè)計人員在執(zhí)行工作的過程中,還存在排版設(shè)計問題,無法對每個元素的尺寸與位置進(jìn)行設(shè)計,難以提高其設(shè)計效率。這就需要網(wǎng)頁設(shè)計人員根據(jù)網(wǎng)站建設(shè)工作特點與需求對網(wǎng)頁進(jìn)行排版,進(jìn)而提高排版的科學(xué)性與合理性,達(dá)到良好的排版效果[5]。
4網(wǎng)頁設(shè)計藝術(shù)特點
在網(wǎng)頁設(shè)計過程中,其藝術(shù)特點較為突出,是網(wǎng)頁設(shè)計人員需要全面了解的體系。首先,網(wǎng)頁設(shè)計具有主題鮮明的藝術(shù)特點。主要因為網(wǎng)頁是網(wǎng)站的信息傳達(dá)結(jié)構(gòu),只有設(shè)計較為鮮明,才能提高網(wǎng)頁設(shè)計效率與質(zhì)量。同時,色彩鮮明的網(wǎng)頁設(shè)計,可以滿足讀者心理需求,提高網(wǎng)站瀏覽效率。其次,網(wǎng)頁設(shè)計具有內(nèi)容形式統(tǒng)一的特點。主要因為網(wǎng)頁中的內(nèi)容與形式需要統(tǒng)一結(jié)合,將網(wǎng)頁主題與形象相互結(jié)合在一起。最后,網(wǎng)頁設(shè)計具有整體感較強(qiáng)的特點。就是在網(wǎng)頁設(shè)計過程中,適當(dāng)?shù)膶臻g環(huán)境進(jìn)行設(shè)計,并且突出網(wǎng)頁主題與意念,形成良好的設(shè)計風(fēng)格與整體性,進(jìn)而提高網(wǎng)頁設(shè)計質(zhì)量,凸顯出網(wǎng)頁設(shè)計的藝術(shù)形式。
5結(jié)語
在網(wǎng)頁設(shè)計過程中,相關(guān)設(shè)計人員必須要重視各類要素的應(yīng)用,并且逐漸提升網(wǎng)頁設(shè)計效率與質(zhì)量,增強(qiáng)網(wǎng)頁設(shè)計效果。在此期間,相關(guān)設(shè)計人員不可以一味的重視網(wǎng)頁色彩的設(shè)計,而是要突出網(wǎng)頁設(shè)計整體性,提高其設(shè)計效率。
引用:
[1]許玲玲.淺談網(wǎng)頁設(shè)計中的藝術(shù)表現(xiàn)形式——藝術(shù)與技術(shù)相結(jié)合[J].科技資訊,2013(26):29-30.
[2]盧思聰.游戲類網(wǎng)頁設(shè)計的視覺表現(xiàn)形式研究[D].中南民族大學(xué),2013.
[3]徐超.探究簡約主義的網(wǎng)頁設(shè)計[D].上海師范大學(xué),2012.
[4]張姝.國畫水墨元素在網(wǎng)頁設(shè)計中的應(yīng)用與研究[D].天津理工大學(xué),2014.
皮影戲的概述
皮影戲,又被稱為“活燈戲”“影子戲”“驢皮戲”。在很久以前,我國就開始出現(xiàn)了戲曲,而皮影戲就是最早出現(xiàn)的戲曲中的其中一種。華北地區(qū)的唐山皮影和西北地區(qū)的陜西東府皮影,他們都十分的受人喜愛且具有地方特色。北方的“皮影戲”在宋代開始形成,到民國年間已經(jīng)十分的鼎盛了。北方“皮影戲”是現(xiàn)在北方一種既獨(dú)特又稀有的戲種。皮影戲是一種利用燈光照射使人物在白布上投射出影子,再加上當(dāng)?shù)匾恍┍容^流行的曲調(diào)而形成的一種民間戲劇。因為它本身具有的藝術(shù)特色和它結(jié)合的那些北方地區(qū)特有的文化,使得皮影戲得到了大家的喜愛。皮影戲的制作非常的繁瑣,要經(jīng)過七個重要的步驟才能完成,其中雕鏤、著色等步驟都是十分難的,需要花費(fèi)大量的時間和精力才能完成。它結(jié)合了各個領(lǐng)域的文化,美術(shù)、音樂、繪畫幾乎都有涉及,可以說皮影戲是一樣值得我們深入探討的藝術(shù)。皮影戲的人物非常的鮮明,線條細(xì)致、活靈活現(xiàn),它在造型上包含了剪紙的裝飾表現(xiàn)手法,使其更加夸張生動,更具韻味。皮影戲在藝術(shù)的領(lǐng)域中具有很高的價值。皮影戲最早是起源于北方的,北宋末年,金兵攻打北宋之后,曾擄一部分的皮影藝人到北方,一部分為了躲避戰(zhàn)亂西出潼關(guān),另一部分藝人則是跟隨者宋都南遷而至南方各省。明代以前的皮影戲,那時全國范圍內(nèi)造型區(qū)域統(tǒng)一,至清代才逐漸形成了影偶的區(qū)域性特征。隨著時間的發(fā)展,皮影戲在制作方法、表演、造型和著色上就結(jié)合了當(dāng)?shù)氐奈幕惋L(fēng)俗習(xí)慣,造成了各地皮影戲的差異性。
北方皮影在造型上的特點
在不同的地區(qū)中,皮影都存在一定的差異,也因為這些差異而有了不一樣的色彩和名稱。華北皮影中以唐山皮影最為有名,而陜西東府皮影也在西北皮影中占據(jù)了一席之地。
唐山皮影又叫灤州皮影,唐山皮影是運(yùn)用了上好的驢皮制作而成的。驢皮是很好地制作皮影的材料,它的透明性和柔韌度比牛皮要好,在結(jié)實耐用等方面又要比羊皮好一些。這也是唐山皮影和其他皮影最大的區(qū)別之處。唐山皮影的造型主體很多都是運(yùn)用了驢皮雕刻技術(shù),因而很多的人都會稱它為“驢皮影”。在制作和設(shè)計造型時,唐山皮影還會運(yùn)用到雕刻、繪畫、剪紙等多門工藝技術(shù)和佛像、壁畫等事物。唐山影人雕刻十分的精細(xì),線條十分的流暢自然。唐山皮影造型主要包括了頭茬、身子、四肢、場景和道具。唐山皮影一般多用側(cè)面來表現(xiàn)人物形象的,一般以平視為主要的表現(xiàn)方式。從透視的角度看,可以清楚地知道它是運(yùn)用了散點透視的原理來進(jìn)行設(shè)計的。在唐山皮影制作和處理上,都會比較的夸張大膽、不拘小節(jié)、形態(tài)多樣,會兼顧俯視和仰視等多個角度。唐山皮影的人物造型很奇特,一般腦袋都會比較大,身體比較小,充分的滿足了觀眾的需求和喜好。但是為了可以更好地進(jìn)行表演,藝人在設(shè)計時都會手臂過膝,通過四肢的運(yùn)動來充分的表達(dá)藝人的思想感情和內(nèi)心的想法。唐山皮影的身型比較的渾厚,感覺十分的結(jié)實。唐山皮影在雕刻人物造型上也會根據(jù)不同人物的性格特色而進(jìn)行不同的設(shè)計,比如正面人物一般都會雕成鏤空臉,非常具有寫意性。它們從額頭開始到鼻尖幾乎成了一條傾斜的直線,它臉上的弧度是非常的小的,并且環(huán)眉細(xì)目、眼睛微微瞇起,它的造型與寺廟里的觀音菩薩的塑像很像。而在反面人物的設(shè)計上,很多都會表現(xiàn)的比較的詼諧,重點突出他們的眉眼部分,丑角的皮影還會在眼睛的地方加上一個圈來便于我們的辨認(rèn)和突出人物的性格。
雖然都是北方皮影,但是陜西東府皮影和唐山皮影在造型上面還是有一些不同的。東府皮影使用的是上等的牛皮做材料,經(jīng)過打磨、著色等工序制作而成的。所以也會被叫做“牛皮影”。而東府皮影之所以不使用驢皮,可能跟他所在的地域有關(guān)系。東府皮影造型也和唐山皮影有所不同。因為在那里觀看的一般的是富豪、官員、大家族,所以藝人在制作時造型都比較的精致小巧。它的主要特點就是小巧玲瓏、精細(xì)可愛,色彩對比十分的強(qiáng)烈,有一種視覺上的沖擊。東府皮影的正面人物造型大多都是正側(cè)面,通常只會看見一個眼睛,他的前額都比較的突出,這樣可以顯示出他們比較的有智慧和有才華。而反面人物都會選擇半側(cè)面,大多會看到兩個眼睛。眼睛是心靈的窗戶,所以東府皮影在人物的眉眼處會著重的表現(xiàn),會把眼睛做延長的處理,并且觀看者可以根據(jù)眉毛的不同來辨別人物的陰柔還是陽剛,一般平眉的皮影給人的感覺更加的陰柔和安詳。
但是兩種皮影并不是完全不同的,他們?yōu)榱烁玫乇磉_(dá)人物性格和特征,皮影人物的頭部一般都會比較的大,類似民間的大頭娃娃一樣,讓人在很遠(yuǎn)處也能清楚的看到人物的樣子。而且在丑角的設(shè)計上,他們也會采用比較詼諧的方式來表達(dá)人物的性格,既突出了人物的陰險狡詐,又具有一定的喜感。
北方皮影在著色上的特點
北方皮影不僅在造型上有差異,在皮影的著色上面也有不同。唐山皮影不僅在造型上與其他的皮影有不同,在著色上面也獨(dú)具一格。他們在人物的著色上結(jié)合了北方人的風(fēng)格和特點,皮影人偶都是非常的濃墨重彩。但是會在背景上顯得相對較暗,來突出皮影人物。唐山皮影的著色,很多都是運(yùn)用到了中國的民間傳統(tǒng)色彩,他的表現(xiàn)十分的大膽,顏色也較為艷麗,具有視覺沖擊力。唐山皮影的色彩跟中國的五行說也有一定的關(guān)系,運(yùn)用了紅、黃、綠、黑、白來表現(xiàn)人物的特征。其中的黃是指皮的本來顏色而白色是指皮影人物中鏤空的那部分。皮影的著色可以進(jìn)行暈染處理,來表現(xiàn)顏色的深淺,雖然不一定十分的協(xié)調(diào),但是卻有一種獨(dú)具特色的感覺,給人一種全新的視覺感受。不同的人物選用的顏色也不同紅色表示忠烈,白色表示狡猾,黑色表示剛烈,而綠色則是代表著魯莽和靈怪。
與唐山皮影相同的是東府皮影也是使用紅、黃、綠、黑、白五種顏色。也是比較的濃墨重彩,這點運(yùn)用到了中國的繪畫工筆。和唐山皮影一樣的是東府皮影也會使用到以鏤空的地方來代替白色和運(yùn)用牛皮的本來顏色來進(jìn)行設(shè)計。這是東府皮影和唐山皮影相同的地方。但是東府皮影的著色也會在一些細(xì)節(jié)上和唐山皮影有所不同。東府皮影以本來的顏色來進(jìn)行平涂,常常會選擇大紅或者大綠的顏色,來進(jìn)行強(qiáng)烈的對比。顏色亮麗但不妖艷。為了能夠更好地來表達(dá)人物的性格特征,東府皮影常常會使用到鏤線分色的方法,讓人物有更加濃烈的裝飾色彩。東府皮影和唐山皮影在背景上也有一些差異,相對于唐山皮影比較暗的背景,東府皮影的背景就要相對的亮堂一些。不同的顏色代表著不同的性格,不同的性格又組成了一個個鮮活的人物,這些人物在皮影戲中完美的搭配在一起,他們共同演繹著我們身邊所發(fā)生的一些故事,講述著我們這個時代的傳奇。
結(jié)語
我們都知道皮影戲是我們重要的文化遺產(chǎn),是我們寶貴的精神財富。它凝聚著我們世世代代人的智慧與勞動。我們有責(zé)任有義務(wù)把皮影戲很好地傳承和發(fā)展下去。但是現(xiàn)在因為地域的差異性,皮影人偶工藝的復(fù)雜等許許多多的因素。使得皮影戲在傳承和發(fā)展中遇到了困難。這時候,作為大學(xué)生的我們更應(yīng)該積極努力的投身到皮影戲的傳承與發(fā)展中去。我們應(yīng)該結(jié)合不同地區(qū)優(yōu)秀的文化,來對皮影戲進(jìn)行保護(hù)和創(chuàng)新,呼吁更多的人投身到皮影戲的傳承和發(fā)展中去,讓皮影戲可以更好地傳承與發(fā)展下去。
〔關(guān)鍵詞〕聲樂表演藝術(shù)碩士人才培養(yǎng)創(chuàng)新性
近年來,隨著創(chuàng)新型社會的建設(shè)與發(fā)展,我們對人才的綜合素質(zhì)也有了進(jìn)一步要求,培養(yǎng)高素質(zhì)的專業(yè)人才已逐漸成為我國現(xiàn)階段藝術(shù)教育的重點,而各藝術(shù)類高校只有不斷地對聲樂表演藝術(shù)碩士人才培養(yǎng)模式進(jìn)行相應(yīng)創(chuàng)新,才能達(dá)到聲樂表演人才的培養(yǎng)符合時展的總體目標(biāo)。
一、聲樂表演人才培養(yǎng)原則
1、以行業(yè)需求為培養(yǎng)導(dǎo)向。市場經(jīng)濟(jì)中的一項重要發(fā)展原則是供需平衡,在聲樂表演的人才培養(yǎng)中也應(yīng)遵循這一特點,達(dá)到市場的供求平衡[1]?,F(xiàn)階段,我國聲樂行業(yè)就業(yè)不僅局限于文藝表演演員,同時還包含高校的聲樂教學(xué)教師等行業(yè),因而,藝術(shù)高校在對其進(jìn)行培養(yǎng)時,應(yīng)按照市場經(jīng)濟(jì)發(fā)展需求對其進(jìn)行目標(biāo)結(jié)構(gòu)整合,建立完善的教育體制,不斷促進(jìn)開放式教學(xué)的發(fā)展,不閉門造車,逐步實現(xiàn)市場需求與教學(xué)供應(yīng)的相互結(jié)合與統(tǒng)一。
2、以聲樂演唱為教學(xué)重點,同時注重學(xué)生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。聲樂表演能力的培養(yǎng)是藝術(shù)專業(yè)培養(yǎng)的重點與核心,具有很強(qiáng)的實踐性與技能性。在藝術(shù)專業(yè)教育中,聲樂表演能力與實踐的相互結(jié)合,不僅是教學(xué)的課程要求,還是考核和評價專業(yè)學(xué)習(xí)的重要手段。因而,專業(yè)教師在對學(xué)生進(jìn)行實踐課程的教學(xué)時,應(yīng)注重對學(xué)生專業(yè)素養(yǎng)以及創(chuàng)新能力的培養(yǎng),這樣不僅可以使聲樂表演專業(yè)的教學(xué)效果事半功倍[2],同時還可以使其在其他教學(xué)活動中發(fā)揮積極效用,促進(jìn)教學(xué)水平的整體提高。
3、聲樂表演藝術(shù)碩士人才專業(yè)的培養(yǎng)目標(biāo)。聲樂表演專業(yè)培養(yǎng)目標(biāo)主要是將學(xué)生培養(yǎng)為現(xiàn)代化德智體等全面發(fā)展、掌握學(xué)科專業(yè)知識內(nèi)容,掌握演唱與表演專業(yè)技術(shù),具有較強(qiáng)音樂認(rèn)知度以及鑒賞能力的新型高素養(yǎng)的綜合性人才。具體要求是在馬克思理論的指導(dǎo)下進(jìn)行藝術(shù)實踐活動,同時具有正確的人生價值觀、良好的人文素養(yǎng)、專業(yè)知識以及創(chuàng)新能力,不斷提升自身的專業(yè)知識為社會主義現(xiàn)代化建設(shè)貢獻(xiàn)自身的力量;具備藝術(shù)教育的基礎(chǔ)素養(yǎng),掌握藝術(shù)專業(yè)的基礎(chǔ)理論知識,擁有基礎(chǔ)理論實踐能力[3];具有一定的外語交流能力,使自身擁有國際學(xué)術(shù)交流的基本能力。
二、聲樂表演藝術(shù)人才培養(yǎng)工作中存在的問題
1、人才培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置的問題?,F(xiàn)階段我國社會發(fā)展對聲樂表演專業(yè)人才培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)具有非常大的影響,人才標(biāo)準(zhǔn)的設(shè)置隨著社會的發(fā)展而不斷更改。隨著我國社會市場經(jīng)濟(jì)體制的不斷完善與發(fā)展,社會中各類型事業(yè)的發(fā)展都與市場建設(shè)發(fā)展有相應(yīng)的關(guān)聯(lián)性,聲樂表演專業(yè)的發(fā)展也逐漸由藝術(shù)性慢慢變得市場化,因而現(xiàn)代藝術(shù)高校在對人才進(jìn)行培養(yǎng)時根據(jù)市場的需求對其培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)做了相應(yīng)的調(diào)整。在對專業(yè)人才進(jìn)行教授的過程中不僅重視對其專職聲樂表演能力的培養(yǎng),還對學(xué)生的其他綜合能力進(jìn)行培養(yǎng),將聲樂表演專業(yè)人才打造為綜合性人才。
2、教育培養(yǎng)方式及手段落后等問題。聲樂表演專業(yè)教學(xué)落后首先表現(xiàn)在教師職業(yè)能力與教育理念的落后,教師綜合能力的欠缺導(dǎo)致聲樂表演專業(yè)教學(xué)無法與時代需求相融合,而年輕的教師雖接受新教學(xué)理念的熏陶,但卻缺乏一定的教學(xué)經(jīng)驗,無法對學(xué)生實施高效優(yōu)質(zhì)的教育。同時,教師教育理念的落后往往傳達(dá)給學(xué)生消極過時的教育觀念,這種落后的教育觀念會使學(xué)生過分崇尚外來聲樂表演文化,輕視本土優(yōu)秀的聲樂內(nèi)涵,這樣不僅不利于我國聲樂表演專業(yè)的發(fā)展[4],同時還對我國聲樂文化造成相應(yīng)的危害。
三、聲樂表演藝術(shù)碩士人才培養(yǎng)模式創(chuàng)新型研究
1、改變教學(xué)方式,增強(qiáng)實踐能力。作為現(xiàn)代聲樂表演藝術(shù)碩士人才的培養(yǎng)目標(biāo),在培養(yǎng)過程中不斷提升學(xué)生的實踐性,以及對聲樂表演專業(yè)的創(chuàng)造性,該專業(yè)的課程培訓(xùn)注重其實用性以及學(xué)術(shù)性,因此在對碩士生進(jìn)行培養(yǎng)計劃的制定過程中,應(yīng)該考慮知識體系的綜合調(diào)配與各內(nèi)容知識體系的銜接。具體教學(xué)方式如下所述:
導(dǎo)師在開展課程教授之前,應(yīng)該對開設(shè)的研究生課程進(jìn)行細(xì)心準(zhǔn)備,同時在課程教學(xué)結(jié)束后按照相應(yīng)的規(guī)定對學(xué)生的學(xué)習(xí)效果進(jìn)行考評。在制定教學(xué)計劃時,教師應(yīng)該根據(jù)各個研究生自身的具體情況,采取因材施教的原則,制定個人培養(yǎng)計劃。同時還可組織學(xué)生參加與專業(yè)相關(guān)的學(xué)術(shù)活動或者相關(guān)社會實踐,增強(qiáng)學(xué)生理論知識的實際應(yīng)用能力。教師在教學(xué)過程中,應(yīng)該充分尊重學(xué)生的思維自主性,避免將自己的思維觀點強(qiáng)加于學(xué)生,尊重學(xué)生在知識的探索中一步一步實現(xiàn)并獲取正確的觀點,這樣有利于研究生創(chuàng)新思維的進(jìn)一步拓展。
2、建立“雙師型”教學(xué)模式。聲樂表演專業(yè)教師的綜合素養(yǎng)直接影響教學(xué)活動的開展,所以各高校應(yīng)重視教師的特色發(fā)揮,提高教師團(tuán)隊的綜合素養(yǎng)。因此在教學(xué)培養(yǎng)過程中,可以采用“雙師制”形式實現(xiàn)對學(xué)生的綜合教育,將教師與社會藝術(shù)團(tuán)體相掛鉤,聘請校外的資深藝術(shù)家或者其他高校的導(dǎo)師,外聘的教師可以主要負(fù)責(zé)學(xué)生的校外實踐能力的培養(yǎng)教學(xué)。聲樂表演藝術(shù)碩士生可以不定期地進(jìn)行專業(yè)社會實踐,參與演出,增強(qiáng)其職業(yè)經(jīng)驗,在實踐中不斷提升自身的專業(yè)素養(yǎng)。
3、注重學(xué)生自主創(chuàng)新意識的培養(yǎng)。對于聲樂表演藝術(shù)碩士的培養(yǎng),需要注重學(xué)生專業(yè)知識的層次、技能以及綜合素養(yǎng)的培養(yǎng),其中創(chuàng)新思維以及創(chuàng)新能力的培養(yǎng)是非常重要的環(huán)節(jié)[6],可以不斷提高學(xué)生創(chuàng)新思維以及解決問題能力。
現(xiàn)階段,我國高校受到傳統(tǒng)藝術(shù)教育模式的影響,在對研究生的培養(yǎng)中缺乏一定的創(chuàng)新性,教育模式基本是依照傳統(tǒng)的本科教學(xué)模式進(jìn)行教學(xué),在課程設(shè)置方面缺乏對研究生教學(xué)內(nèi)容與方法的創(chuàng)新,因此學(xué)生只能被動接受本科教學(xué)內(nèi)容以及教學(xué)模式。在培養(yǎng)模式中,藝術(shù)研究生的培養(yǎng)模式與本科生有著本質(zhì)的區(qū)別,本科生注重對藝術(shù)基礎(chǔ)知識的學(xué)習(xí)與掌握,而藝術(shù)研究生是藝術(shù)的研究工作者,因此,應(yīng)將學(xué)生的自主創(chuàng)新能力貫穿于整個教育過程,教師應(yīng)強(qiáng)調(diào)專業(yè)知識的理論性與實際應(yīng)用性相互結(jié)合,對學(xué)生培養(yǎng)計劃的實施進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)控,注重學(xué)生之間合作能力的培養(yǎng),不斷培養(yǎng)學(xué)生對于實際問題的解決能力以及創(chuàng)新意識,體現(xiàn)自身的創(chuàng)新理念。
同時,教師應(yīng)該將創(chuàng)新能力的培養(yǎng)置于專業(yè)的重點培養(yǎng)計劃中,在教學(xué)中盡量避免傳統(tǒng)硬性的教學(xué)方式,加強(qiáng)與學(xué)生之間的互動,對于教學(xué)中產(chǎn)生的問題與學(xué)生進(jìn)行相互探討,這樣可以激發(fā)和引導(dǎo)學(xué)生對新觀點的探究,掌握最新的藝術(shù)發(fā)展趨向。學(xué)校還應(yīng)將促進(jìn)該地區(qū)的文化經(jīng)濟(jì)發(fā)展作為學(xué)生的培養(yǎng)基點,在對學(xué)生進(jìn)行招生調(diào)控與培養(yǎng)時,都應(yīng)將地方文化經(jīng)濟(jì)作為發(fā)展重心,并在此大的發(fā)展環(huán)境下制定研究生的培養(yǎng)計劃,不斷促進(jìn)藝術(shù)專業(yè)教學(xué)質(zhì)量的提升。
4、企業(yè)研究生研究工作站的建立。大學(xué)企業(yè)研究生工作站主要是學(xué)校與企業(yè)之間達(dá)成協(xié)議、共同合作建立的學(xué)生實踐基地,該基地的建立有利于研究生藝術(shù)專業(yè)能力的提高與創(chuàng)新,實現(xiàn)對研究生研究能力的不斷提升,不斷滿足社會對綜合人才的需求。藝術(shù)高校的全日制研究生在完成課程學(xué)分之后對企業(yè)工作站的相應(yīng)職位與工作進(jìn)行申請,之后在企業(yè)內(nèi)開展工作并在完成基礎(chǔ)工作的基礎(chǔ)之上獲得相應(yīng)的學(xué)分,同時,研究生在完成自身的基礎(chǔ)工作時,還可以對相關(guān)學(xué)位論文以及聲樂表演專業(yè)展開研究。
結(jié)語
現(xiàn)階段,聲樂表演人才的培養(yǎng)是我國藝術(shù)教育的重要任務(wù),我國聲樂表演藝術(shù)碩士人才的培養(yǎng)在課程設(shè)置以及教學(xué)模式上還存在著一定的缺陷,導(dǎo)致人才培養(yǎng)的質(zhì)量還不夠高。因此,我國各藝術(shù)高校應(yīng)該對其進(jìn)行不斷的探究,完善課程設(shè)置、對教學(xué)模式進(jìn)行相應(yīng)改革,在培養(yǎng)學(xué)生專業(yè)能力的基礎(chǔ)之上,注重對學(xué)生的實踐教學(xué),這樣才能促進(jìn)我國聲樂表演藝術(shù)碩士人才培養(yǎng)質(zhì)量不斷提高。(責(zé)任編輯:楊建)
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關(guān)鍵詞:水墨風(fēng)格;三維動畫;傳統(tǒng)藝術(shù)
以水墨風(fēng)格制作的三維動畫,是我國本土特有的動畫形式,并在全新的領(lǐng)域中散發(fā)著光彩,充分展示了我國傳統(tǒng)藝術(shù)的博大精深,并且在創(chuàng)作三維動畫的同時也為創(chuàng)作者帶來了更多的靈感。在20世紀(jì)60年代,我國第一部水墨風(fēng)格動畫片《牧笛》成功問世,給我國水墨動畫產(chǎn)業(yè)創(chuàng)造了發(fā)展之機(jī)。隨著社會的不斷發(fā)展,動畫產(chǎn)業(yè)也隨著科技的不斷進(jìn)步穩(wěn)步向前,通過引進(jìn)大量的外國動畫,形成了多種動畫形式。目前,我國水墨風(fēng)格的三維動畫已發(fā)展到了瓶頸階段,為適應(yīng)現(xiàn)代觀眾日益提高的審美情趣,水墨風(fēng)格的三維動畫必須找到新的發(fā)展途徑,為我國動畫產(chǎn)業(yè)的發(fā)展貢獻(xiàn)自己的力量。
1 水墨畫的藝術(shù)元素體現(xiàn)
水墨畫風(fēng)格的藝術(shù)元素主要體現(xiàn)在以下幾點:第一,制作的構(gòu)思;第二,人物、自然造型的規(guī)律;第三,構(gòu)圖與色彩的法則;第四,作品整體所要表達(dá)的意境。以上幾點是水墨畫的主要表現(xiàn)形式,彼此相輔相成并不可分割。畫中體現(xiàn)的不僅僅是物體的“形”,更重要的在于表達(dá)物體的神韻,使得簡單的線條表現(xiàn)出真實的觸感。從構(gòu)想方面來說,首先需明確構(gòu)圖的意義,只有明確了意義才能開始創(chuàng)作。其次,是整體作品的造型規(guī)律,以簡單的線條勾勒出畫作的真題造型,并滿足“以形寫神”的創(chuàng)作原則。因此,在創(chuàng)作過程中,不僅要體現(xiàn)形,還要通過潤色等方式使畫作與實物更為接近。再者,構(gòu)圖與色彩的表現(xiàn)法則,首先是構(gòu)圖法則,雖只是在平面進(jìn)行畫作,但也要體現(xiàn)出物體的立體動態(tài),為了使畫作的真實性得以更好地表達(dá),需將畫作中的物體以合理的比例進(jìn)行分配,以增強(qiáng)立體型。然后是色彩法則,通常情況下,水墨畫的結(jié)構(gòu)以水墨為主,輔以水的潤澤,使得墨色可以以不同的色號進(jìn)行區(qū)分,形成專業(yè)成分更高的水墨畫。例如,花鳥魚蟲一類的畫作,配色則相對更加復(fù)雜,并且墨色需要事先進(jìn)行調(diào)和,使墨色從整體上看更加和諧。最后也是最重要的部分,便是畫作所要表達(dá)的意境,水墨畫的意境擔(dān)負(fù)著體現(xiàn)畫作神韻的職責(zé)。在古代,水墨畫要求著重體現(xiàn)畫作的氛圍,也就是意境,只有擁有意境的水墨畫才能給人真實的感覺。
2 水墨三維動畫特點及效果設(shè)計
2.1 水墨三維動畫分析
山水是水墨風(fēng)格的三維動畫常用的題材之一,其濃濃的畫面感將水墨的穿透力,以及唯美的意境展現(xiàn)得淋漓盡致。通過筆墨來表達(dá)動畫的語意。雖在創(chuàng)作方式上與傳統(tǒng)水墨畫有著明顯的差別,但仍保留了水墨畫的基本特征:第一,將三維技術(shù)運(yùn)用到水墨畫的構(gòu)圖過程中,將墨與水結(jié)合后的變干、變淡現(xiàn)象形象地渲染出來,以此讓觀眾產(chǎn)生水墨暈染的視覺感受;第二,將優(yōu)美的意境以抽象的方式進(jìn)行表達(dá),表現(xiàn)了繪畫對象的虛實交替;第三,采用我國傳統(tǒng)文化的特色,并將民俗特點加入其中進(jìn)行敘事,充分展示了我國古典藝術(shù)的博大精深。通過上述特征的比對,我們不難發(fā)現(xiàn),水墨三維動畫也有著自身獨(dú)有的特質(zhì):第一,在制作過程中,充分發(fā)揮了現(xiàn)代技術(shù)的優(yōu)勢,簡化了分層渲染等繁雜的步驟,節(jié)省了制作水墨動畫的時間,相對也節(jié)約了人力物力,提升了動畫的產(chǎn)量;第二,傳統(tǒng)水墨畫在處理畫面方面有著非常嚴(yán)格的要求,水墨三維動畫的出現(xiàn)成功省略了三點透視,而是依循三維透視的原則進(jìn)行處理,并且通過現(xiàn)代化的技術(shù)有段,增強(qiáng)鏡頭的表現(xiàn)力,使得特殊的詩意感在空話變化中得以充分展示,效果也符合創(chuàng)作的基本原則,充分展示了動畫最基本的組成要素“動”。
2.2 水墨三維動畫水墨效果設(shè)計
水墨三維動畫的精髓在于立意。在創(chuàng)造過程中,首先應(yīng)確立設(shè)計作品的含義,才能將實際生活中的點點滴滴完美地融入創(chuàng)作之中,才能完美定位三維動畫中的角色設(shè)計。在設(shè)計過程中,應(yīng)先在腦海中勾勒出設(shè)計的基本輪廓,包括角色和角色的定位等。在設(shè)計水墨三維動畫效果時,不但要求在形狀上精益求精,還要充分地展現(xiàn)出內(nèi)在的精神和蘊(yùn)含的情感。要有良好的創(chuàng)新意識,為水墨畫中的景物找準(zhǔn)定位,在經(jīng)由軟件的加工,為模型增添神韻。在設(shè)計畫面過程中,不再是傳統(tǒng)單一的色彩,而是充分滿足每一處的色彩需求,進(jìn)而使畫面與色彩完美結(jié)合。
2.3 三維水墨動畫的制作工藝
水墨三維動畫與普通三維動畫的設(shè)計流程基本一致。首先便是建立相應(yīng)的模型,并通過分析、畫貼圖、調(diào)節(jié)動作、后期處理等來完成。其中,不一樣的地方在于,傳統(tǒng)三維動畫在建模過程中,所依憑的是真實的對象,而水墨三維動畫是通過筆墨的關(guān)系完成建模。并且,在接下來的畫貼圖步驟中,有著嚴(yán)格的筆觸要求,結(jié)合現(xiàn)代軟件并圍繞水墨畫的特點進(jìn)行繪圖,渲染效果則是以不同的筆刷來完成。在三維的世界中,想要以三維的形式來建模,進(jìn)而渲染中國古老藝術(shù),是具有一定難度的。從古至今,人們對水墨畫的理解仍停留在二維世界,因此,要想以三維的方式進(jìn)行展示,僅憑貼圖和渲染是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的,還需體現(xiàn)水墨畫所蘊(yùn)含的內(nèi)在精神。
以三維動畫的形式展現(xiàn)水墨畫,是我國動畫發(fā)展的必然趨勢,也是推廣與發(fā)展我國水墨畫的重要途徑。對此,我們應(yīng)加強(qiáng)培養(yǎng)三維動畫人才的力度,充分挖掘相關(guān)的優(yōu)秀人才。與此同時,也應(yīng)加大對制作三維動畫財政方面的支持力度,保證三維動畫產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定發(fā)展。除此之外,還要積極采用國內(nèi)外的先進(jìn)技術(shù)手段,這也是提高我國動畫產(chǎn)業(yè)競爭力的重要手段。綜上所述,我們應(yīng)積極采取措施,幫助我國動畫在競爭激烈的世界動畫市場中取得先機(jī)。
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論文摘要:在民族、民間歌曲中,襯詞襯腔的運(yùn)用最能體現(xiàn)民族風(fēng)格和地方特色。襯詞作為一種情感表達(dá)語言,其表現(xiàn)力是十分豐富的。它不但可以強(qiáng)化歌曲的抒情性,也可以使歌曲形象化、生活化。由于襯詞的結(jié)構(gòu)類型、表現(xiàn)形式的各異以及在歌中所處位置的不同,其音樂中的表現(xiàn)性是不一樣的。因此,研究民族、民間歌曲中“襯詞”語言的結(jié)構(gòu)類型與表現(xiàn)形式,對繼承和發(fā)揚(yáng)民族音樂傳統(tǒng),提高民族音樂演唱水平以及對民族音樂創(chuàng)作是十分有意義的。
民族音樂是我國民族文化中的瑰寶。民族音樂在長期的歷史發(fā)展過程中,形成了自己鮮明的民族風(fēng)格和地方特色。作為民族音樂文化的重要組成部分——民歌,它是勞動人民集體智慧的結(jié)晶。自它誕生起就始終伴隨勞動人民的生產(chǎn)與生活實踐,反映他們的生活,表達(dá)他們的情感。民歌中襯詞的運(yùn)用十分廣泛,由于它的表現(xiàn)力十分豐富,因此,在民間和民族歌曲創(chuàng)作中占有十分重要的地位。它對歌曲情感的抒發(fā)、演唱的流暢、風(fēng)格的形成、形象的塑造、意境的刻畫、歌詞的表達(dá)都是不可缺少的。從“襯詞”的特點(用語習(xí)慣,表情達(dá)意的方式)以及運(yùn)用的規(guī)律來看,襯詞的結(jié)構(gòu)類型與表現(xiàn)形式主要有三種:單音節(jié)襯詞、雙音節(jié)襯詞、多音節(jié)襯詞。由于襯詞的結(jié)構(gòu)類型與表現(xiàn)形式的各異,以及在歌曲中運(yùn)用方法、位置的不同,它在音樂中的表情性是各不相同的,就是同一結(jié)構(gòu)的襯詞在不同的曲調(diào)中也能傳遞各不相同的情感信息。因此,研究民族、民間歌曲中“襯詞”語言的結(jié)構(gòu)類型與表現(xiàn)形式,對繼承和發(fā)揚(yáng)民族音樂文化,提高民族音樂演唱水平以及對民族歌曲創(chuàng)作是十分有意義的。
一、單音節(jié)結(jié)構(gòu)襯詞
由一個音節(jié)結(jié)構(gòu)組成的襯詞,稱單音節(jié)襯詞(也叫“襯字”)。在漢族民歌中,演唱時在正詞中加“襯詞”(虛字)的現(xiàn)象非常普遍。幾乎每首歌、每句詞都有加虛詞襯字的現(xiàn)象,我們稱之為“習(xí)慣性用語”襯詞,或者叫“語氣輔助”襯詞。常見的襯詞有:“啊”“哪”“呀”“啦”“哇”“哎”“嗨”“喲”“咿”“喂”“耶”等。這些襯詞多用于歌詞的詞或詞組中間、句讀助詞之后以及句末之后。其作用有三種:一是調(diào)劑節(jié)奏。在正詞中加虛詞襯字,使詞或詞組之間增加字?jǐn)?shù),促成節(jié)奏細(xì)分,使歌曲的節(jié)奏產(chǎn)生變化,從而達(dá)到輕快活潑的藝術(shù)效果。二是保字、行腔。使語音中的閉口音(清音或濁音)變化成張口音(元音)來增強(qiáng)歌詞的可唱性和潤腔。特別是在句末有拖腔時促使字音純正、收韻完美、行腔圓潤。三是起感嘆詞、語氣助詞的作用。
1.用于單音節(jié)詞中的表現(xiàn)形式
這種表現(xiàn)形式靈活多樣,它可以插在正詞的中間,借正詞的歌腔見縫插針,與正詞裹在一起唱,且時值較短,沒有獨(dú)立的表現(xiàn)意義,必須依附正詞而發(fā)揮作用,起著墊字和華彩的作用。
如湖南嘉禾民歌片斷:
歌中“送”是一個動詞,“姐”是一個名詞,同屬單音節(jié)詞,在單音節(jié)詞中加上一個語氣襯詞“那”,促成了節(jié)奏的細(xì)分,產(chǎn)生了輕快活潑的藝術(shù)效果,也增加了歌曲的韻味。
2.用于詞或詞組之間的表現(xiàn)形式
這種表現(xiàn)形式也是靈活多樣,除了調(diào)劑節(jié)奏、起烘托的作用外,能使正詞中的閉口音變?yōu)閺埧谝?,很好地起到了保字行腔的作用?/p>
歌中襯字“呀”用在一更的時間名詞之中,“啊”用在時間名詞“一更”和方位名詞“里”所組成的詞組之中,使正詞中的閉口音變?yōu)榱藦埧谝?,不但使歌曲中的?jié)奏起到了變化,同時也較好地起到了潤腔的作用,使歌曲更具地方特色。
3.用于句間停頓處與句尾的表現(xiàn)形式
這種表現(xiàn)形式,能擴(kuò)充樂句和襯托色彩性襯腔來抒發(fā)歌曲情感。特別是在拖腔時,促使字音純正、收韻完滿、行腔圓潤,是句尾拖腔收潤不可少的。
歌中襯詞“啰”用在“一塘蓮”的名詞之中與之后,“喲”用在句間停頓處,即形容詞“紅紅綠綠”之后與“水上”名詞之后,使拖腔收韻圓滿、行腔圓潤,不但擴(kuò)充了樂句,而且較好地抒發(fā)了歌中情感。
二、雙音節(jié)結(jié)構(gòu)襯詞
雙音節(jié)結(jié)構(gòu)襯詞是由兩個音節(jié)構(gòu)成的。其表現(xiàn)形式是經(jīng)常出現(xiàn)在句中或者句尾,往往詞組中第一個襯詞都與語氣襯詞相聯(lián)系,使之唱起來順口、聽起來自然。歌中運(yùn)用雙音節(jié)襯詞能使樂句擴(kuò)展、句幅延伸,有一定的結(jié)構(gòu)意義。常見的雙音節(jié)襯詞有:“哎喲”“哎嗨”“喲嗬”“呀嘛”“哼嗨”“唉呀”“那個”“那么”“哈咳”“里格”“喲喂”等等。雙音節(jié)襯詞的運(yùn)用,可增強(qiáng)民歌的地方特色和趣味性。
1.用于句中的表現(xiàn)形式
這種表現(xiàn)形式,大多是在傳承演變過程中延留下來的,并形成了固定的格式和規(guī)范,遇詞即可套用。它們起著對正詞的陪襯和烘托的作用,使音樂地域化、生活化、口語化。
歌中每句詞中都加了“那個”雙音節(jié)襯詞,很具地域特色。這種“襯詞”是在傳承演變過程中延留下來的,如果說詞中“那個”襯詞用在句中是為了體現(xiàn)口語化、生活化,順應(yīng)節(jié)奏的話,那么歌中“哎呀”這個雙音節(jié)襯詞用在句頭處,效果實在是好。它不但承上啟下,更為重要的是生動地表現(xiàn)了一種期盼、一種深情,較好地表現(xiàn)了熱戀中的姑娘急切盼望情哥歸來的質(zhì)樸情感。這是實詞都難以達(dá)到的藝術(shù)效果。
2.用于句尾的表現(xiàn)形式
這類襯詞的表現(xiàn)形式大多都是用在句尾處,起收字歸韻的作用,體現(xiàn)生活化、口語化。如:
歌中每句詞的結(jié)尾處都用到了襯詞“喲喂”,體現(xiàn)了一種生活化、語氣化,擴(kuò)大了句子結(jié)構(gòu),使旋律自然流暢,道盡了“女兒”的思念之情。
三、多音節(jié)結(jié)構(gòu)襯詞
多音節(jié)結(jié)構(gòu)襯詞是由三個以上的音節(jié)構(gòu)成。這種襯詞的表現(xiàn)形式是多種多樣的,有語氣式襯詞,如“哎嗨哎嗨呀”;口彩式襯詞,如“嘚兒嘚兒”;擬聲式襯詞,如“七不龍冬鏘冬鏘”等以及多種類型的襯詞混合在一起使用的“混合型襯詞”。這類襯詞有較強(qiáng)的結(jié)構(gòu)意義,它可以拓展成大段的襯詞、襯腔,甚至可以發(fā)展到一個樂段,它的作用主要是補(bǔ)充完善樂意、深化強(qiáng)調(diào)主題、增強(qiáng)歌曲的表現(xiàn)力與藝術(shù)感染力,使歌曲表現(xiàn)得更加形象生動。它一般常用于樂句的開頭,樂句中部以及句尾處等。
1.用于句首的表現(xiàn)形式
多音節(jié)襯詞用于歌曲首句的開始處,有的是作意境描述,起引子作用,有的是作感嘆語,起“引腔”作用,無論起什么作用,它對歌曲情感的表現(xiàn)達(dá)到了很好的藝術(shù)效果。
《打支山歌過橫排》是一首江西興國的客家山歌。這類山歌有一個明顯的特點,即開始的多音節(jié)襯詞“哎呀嘞哎”是當(dāng)?shù)厝粘I钪械囊环N感嘆語,在這里是起“引腔”作用的,凡是以“哎呀嘞哎”作“話引子”,即表示他要講話了。歌中開始處運(yùn)用“襯詞”,使旋律明顯具有粗放豪邁的山野氣息,很好地起到了“引腔”的作用。
2.用于句中的表現(xiàn)形式
多音節(jié)襯詞用于句中,其目的是擴(kuò)大句子結(jié)構(gòu),烘托、渲染正詞,增強(qiáng)歌中歡快熱烈的氣氛。 歌中運(yùn)用襯詞“哎咳哎咳喲”較好地起到了情緒渲染的作用,不但陪襯、烘托了正詞,還擴(kuò)大了句子的結(jié)構(gòu),體現(xiàn)了地域風(fēng)格,使歌中的情緒表現(xiàn)得更加熱烈歡快。
3.用于句尾的表現(xiàn)形式
句尾運(yùn)用多音節(jié)“襯詞”是起補(bǔ)充作用的,其目的是使正詞的樂段旋律繼續(xù)和發(fā)展,把主題思想予以深化和加強(qiáng),使歌曲的表現(xiàn)更深入一步,形象更豐滿。這是山西左權(quán)民歌“開花調(diào)”的代表曲目之一。描寫了戀人專一、思念以及思念中略帶幽怨的情節(jié)。襯詞“呀啊個呀呀朵”是“開花調(diào)”特有的襯詞形式,大都用于歌曲的結(jié)尾,它不但補(bǔ)充了詞意,擴(kuò)大了句式,而且形象生動、俏麗嬌美。
總之,民族、民間歌曲中“襯詞”的結(jié)構(gòu)類型與表現(xiàn)形式是多種多樣的,這里只是從一般規(guī)律進(jìn)行分析。我國民族、民間歌曲中“襯詞”語言的運(yùn)用相當(dāng)廣泛,且表現(xiàn)力十分豐富。了解、掌握“襯詞”語言藝術(shù)的結(jié)構(gòu)類型與表現(xiàn)形式,對于繼承和發(fā)展民族音樂以及對民族音樂創(chuàng)作是十分重要的,而且也是十分有意義的。
參考文獻(xiàn)
【摘要】 目的 檢測反流性食管炎大鼠食管黏膜IL23p19、IL17表達(dá)水平的變化,探討IL23/IL17軸在反流性食管炎發(fā)病中的作用。方法 將30只SD大鼠隨機(jī)分為3組:空白組、假手術(shù)組、模型組。通過半幽門結(jié)扎聯(lián)合賁門肌切開術(shù)制備反流性食管炎模型,模型制備后,各組動物繼續(xù)禁食24h(但不禁水),術(shù)后24h給予進(jìn)食,繼續(xù)喂養(yǎng)4周后處死大鼠,HE染色法觀察病理變化;實時熒光定量RTPCR檢測食管組織IL23p19和IL17的mRNA表達(dá);ELISA法檢測食管組織IL17蛋白的含量。結(jié)果 4周后,與正常組比較,模型組大鼠食管黏膜組織有不同程度的炎癥表現(xiàn)。模型組食管組織IL23p19、IL17mRNA表達(dá)水平和IL17蛋白的含量明顯高于正常對照組、假手術(shù)組,后兩者之間無統(tǒng)計學(xué)差異?!〗Y(jié)論 IL23/IL17軸是參與反流性食管炎發(fā)病的重要的細(xì)胞因子,可能參與了反流性食管炎的慢性炎癥過程。
【關(guān)鍵詞】 反流性食管炎;IL23;IL17
ABSTRACT: Objective To detect the expressions of interleukin17 (IL17) and interleukin23 (IL23) in esophageal tissues of rats with reflux esophagitis (RE) and explore the role of IL23/IL17 axis in the pathogenesis of RE.Methods Thirty SD rats were randomly pided into 3 groups, namely, control group, shamoperated group and model group. RE was induced by adopting partial pyloric ligation plus cardiomyotomy. Then rats in each group were fasted for 24h but had free access to water. They were fed 24h after operation. Four weeks later, rats were killed and pathological changes of esophagus mucous membrane were observed by HE staining in each group. The expressions of IL23p19 and IL17 mRNA in esophageal tissues were examined by realtime fluorescent quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction (RTFQPCR). IL17 protein content in esophageal tissues was measured by ELISA.Results After four weeks, compared with control group, model group had significant pathological changes of esophagus mucous membrane. Expressions of IL23p19 and IL17 mRNA in the esophageal tissues of model group were significantly higher than those of the other two groups; the content of IL17 protein was significant higher in model group than in the other two groups. There were no significant differences between control group and shamoperated group.Conclusion IL23/IL17 axis is an important cellular factor involved in the pathogenesis of RE and may be involved in the chronic inflammation of RE.
KEY WORDS: reflux esophagitis; interleukin23; interleukin17
反流性食管炎(reflux esophagitis, RE)是由多種原因?qū)е碌氖彻莛つけ┞对诜戳魑?胃酸、胃蛋白酶、膽鹽和胰酶)的作用下出現(xiàn)特異性癥狀或黏膜損傷的一種疾病。最新的國外研究[1]發(fā)現(xiàn),RE食管黏膜的損害可能是由免疫介導(dǎo)的炎癥引發(fā)的結(jié)果,而不是最初直接由酸、胃蛋白酶、膽汁造成的腐蝕性化學(xué)損傷。近來研究[24]發(fā)現(xiàn),IL23/IL17炎癥軸能更科學(xué)地闡明慢性炎癥疾病的發(fā)病機(jī)制。該學(xué)說認(rèn)為由炎癥細(xì)胞產(chǎn)生的IL23刺激Th0細(xì)胞向一種過去不為人知的新Th細(xì)胞亞型(命名為Th17)分化,Th17細(xì)胞產(chǎn)生致炎性細(xì)胞因子IL17,后者具有強(qiáng)烈的致炎作用,從而導(dǎo)致多種炎癥性疾病發(fā)生。IL23/IL17軸在RE發(fā)病過程中的作用尚無文獻(xiàn)報道。本研究通過檢測IL23/IL17軸在RE中的表達(dá),探討IL23/IL17軸在此病發(fā)病中的作用,以期對RE的發(fā)病機(jī)制和防治對策提供新的認(rèn)識。
1 材料與方法
1.1 實驗材料
1.1.1 動物 清潔級健康SD大鼠,雌雄各半,體質(zhì)量(220±20)g。由甘肅中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。以上動物飼養(yǎng)于代謝籠中,自由攝食和飲水。
1.1.2 試劑 總RNA提取試劑(Trizol)購自大連寶生物有限公司,逆轉(zhuǎn)錄試劑盒為TaKaRa公司生產(chǎn)。IL17定量酶聯(lián)免疫試劑盒購自上海森雄科技實業(yè)有限公司。戊巴比妥鈉由Sigma公司生產(chǎn),配制成3g/L的溶液。
1.1.3 主要儀器 大鼠代謝籠,Rotorgene3000熒光定量PCR儀,DJ500電子天平(常熟市衡器廠),分析天平,722型分光光度儀(上海精密科學(xué)儀器有限公司),LG52A低速離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠),恒溫箱,冰箱,普通光學(xué)顯微鏡(OlympusVanox),顯微照相系(OlympusC35ADⅡWINDING),計算機(jī)圖像分析系統(tǒng)(北航)等。
1.2 實驗方法
1.2.1 分組和喂養(yǎng) 30只SD大鼠運(yùn)用隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分組,設(shè)空白組、模型組、假手術(shù)組,每組10只。分籠飼養(yǎng)于代謝籠內(nèi),每籠4只,每組3籠,自由取食。
1.2.2 反流性食管炎模型的建立 參照文獻(xiàn)許樹長等[5]的方法造模(造模前24h禁食,不禁水):應(yīng)用3g/L的戊巴比妥鈉麻醉(30mg/kg腹腔注射)后,大鼠固定于手術(shù)臺,取上腹正中切口進(jìn)腹。行半幽門結(jié)扎聯(lián)合賁門肌切開術(shù):半幽門縫扎,縫扎時充分暴露幽門,用細(xì)針及細(xì)線縫扎一半幽門,并避開血管,并于食管胃交界處縱行切開賁門肌約1cm,分離至黏膜層完全暴露于視野中,以加強(qiáng)胃反流,后關(guān)腹。假手術(shù)組行假手術(shù),即進(jìn)腹后不進(jìn)行任何手術(shù)再關(guān)腹。造模過程中因部分大鼠不能耐受實驗而死亡,造模結(jié)束時,每組各留8只。
1.2.3 取材方法 模型制備后,各組動物繼續(xù)禁食24h(但不禁水),術(shù)后24h給予進(jìn)食,各組相同條件下喂養(yǎng),自由攝食、飲水,室溫控制在18~22℃。繼續(xù)喂養(yǎng)4周后處死大鼠,自胃食管交界部位向上1cm處(向咽喉方向)取一段長約1cm的食管,固定于3mol/L的福爾馬林中,HE染色后光鏡觀察病理改變。同時取食管下段組織兩部分,一部分用于制備組織勻漿并儲存于-80℃?zhèn)溆茫徊糠钟糜谶M(jìn)行實時PCR檢查。
1.2.4 大鼠食管黏膜組織的病理改變 參照1999年8月全國反流性食管病研討會制定的“反流性食管病(炎)診斷及治療方案(試行)[6]”中反流性食管炎分級標(biāo)準(zhǔn):鱗狀上皮增生、黏膜固有層延伸、上皮細(xì)胞層內(nèi)炎細(xì)胞浸潤為輕度;輕度基礎(chǔ)上出現(xiàn)黏膜糜爛為中度;輕度基礎(chǔ)上有潰瘍形成和(或)Barrett食管改變?yōu)橹囟取?/p>
1.2.5 RealtimePCR 檢測IL23p19、IL17基因的表達(dá) 引物參照GenBank序列,應(yīng)用Primer Express5.0軟件合成,由大連寶生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成。IL23p19上游引物5′CTA AAAATAATGTGCCCCGT3′,下游引物5′AGTCCTAGTAGGAGGTGT3′,擴(kuò)增片段為202bp。IL17上游引物5′CCTCAGACTACCTCAACCGT3′,下游引物5′CTTTCCCTCCGCATTGACA3′,擴(kuò)增片段為129bp。βactin上游引物5′GGAGATTACTGCCCTGGCTCCTA3′,下游引物5′GACTCATCGTACTCCTGCTTGCTG3′,擴(kuò)增片段為150bp。熒光定量PCR儀為RotorGene3000型實時熒光定量PCR儀,用熒光染料SYBR GreenⅠ嵌合熒光法進(jìn)行PCR擴(kuò)增。采用30μL反應(yīng)體系,包括2μL cDNA溶液,特異性上下游引物各0.5μL(20μmol),SYBR Premix Ex TaqTM(2×)10μL,ddH2O(滅菌蒸餾水)17μL。采用三步法PCR擴(kuò)增標(biāo)準(zhǔn)程序:預(yù)變性94℃ 5min,PCR反應(yīng)94℃ 20s,53℃ 30s,72℃ 30s,共40個循環(huán),歷時60min。Ct值反映了模板擴(kuò)增到一定量拷貝數(shù)時(處于指數(shù)上升期)所需反應(yīng)循環(huán)數(shù)大小,Ct值越大,起始模板量就越小,反之則越大。陰性對照為ddH2O。熒光定量PCR結(jié)果2-Ct數(shù)據(jù)分析法進(jìn)行相對定量計算[78]。2-Ct代表食管組織樣本中IL23p19、IL17與βactin的mRNA表達(dá)水平的比值,而ΔCt=Ctspecific gene-Ctβactin。因此,ΔCt值越低表示該基因在組織中表達(dá)水平越高。
1.2.6 ELISA法測定食管組織IL17的含量 切取部分食管下端組織并稱重,每50mg加1mL PBS(pH 6.0,內(nèi)含1μL抑肽酶、亮肽素、胃酶抑素A)用剪刀剪碎在冰上用玻璃勻漿器制勻漿,4℃離心15min,取上清液,按ELISA試劑盒說明書檢測IL17的濃度。
1.2.7 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件,計量數(shù)據(jù)以
±s表示,多組間比較采用OneWay方差分析,兩兩比較采用q檢驗,P
2 結(jié) 果
2.1 大鼠食管黏膜組織的病理改變 造模4周后正常組與假手術(shù)組食管黏膜除上皮細(xì)胞層內(nèi)間或存在少量炎細(xì)胞外,無其他異常表現(xiàn);模型組大鼠黏膜可見明顯鱗狀上皮增生,黏膜固有層延伸,成纖維細(xì)胞增多,出現(xiàn)炎癥細(xì)胞浸潤,以中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞為主,嚴(yán)重者出現(xiàn)黏膜糜爛,多數(shù)屬于中度改變(圖1)。
2.2 各組大鼠食管組織IL23p19、IL17基因的表達(dá) 模型組食管組織IL23p19、IL17的mRNA表達(dá)水平顯著高于正常對照組、假手術(shù)組(P
2.3 各組大鼠食管組織IL17的蛋白含量 模型組食管組織中IL17的蛋白含量均顯著高于正常對照組、假手術(shù)組(P
2.4 組內(nèi)各指標(biāo)間的相關(guān)性分析 模型組食管組織IL23p19 mRNA基因表達(dá)的Ct值與IL17 mRNA基因表達(dá)的Ct值呈正相關(guān)(r=0.864)。
模型組IL17 mRNA基因表達(dá)的Ct值與IL17蛋白表達(dá)水平(組織學(xué))呈負(fù)相關(guān)(r=-0.779)。表明IL23p19 mRNA基因表達(dá)水平越高,IL17蛋白表達(dá)水平就越高。
3 討 論
RE是一種慢性炎癥性疾病,發(fā)病因素尚不十分明確,以往研究表明多種因素參與了RE的發(fā)病過程,主要包括抗返流的防御機(jī)制下降導(dǎo)致酸性胃液或酸性胃液加膽汁反流對食管黏膜的腐蝕作用、食管的清除能力下降、局部組織的防御能力減弱、胃排空障礙、返流物的質(zhì)和量等。SOUZA等[1]研究認(rèn)為,RE食管黏膜的損害可能是由免疫介導(dǎo)的炎癥引發(fā)的結(jié)果。在RESNICK的研究[9]中,針對以往對RE患者食管上皮細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞(CTL)的表達(dá)及細(xì)胞活性情況研究較少的問題,通過收集RE患者食管上皮組織標(biāo)本,利用免疫組化方法對食管上皮細(xì)胞內(nèi)CTL的表型、TLA1和顆粒酶B的表達(dá)情況進(jìn)行了檢測,結(jié)果證實,在RE患者的食管上皮內(nèi)存在淋巴細(xì)胞的細(xì)胞毒表型和CTL的激活,從而證明在RE患者的食管上皮組織中,不僅存在淋巴細(xì)胞數(shù)目的增加,其功能狀態(tài)也發(fā)生了顯著變化[10]。在RE的炎癥過程中,細(xì)胞因子被認(rèn)為具有重要作用,以往研究發(fā)現(xiàn)IL1、TNFα、IL12、IL6、IL8等在RE的炎癥中和病變的維持中發(fā)揮了重要的作用[1112]。
IL23是一種異源二聚體蛋白,是IL12細(xì)胞因子家族的成員,除了具有與IL12相同的p40亞基外,還具有特殊的p19亞基[13]。p19mRNA可見于各種組織和細(xì)胞,包括內(nèi)皮細(xì)胞、髓樣細(xì)胞和活化的巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等,而p40卻表達(dá)受限,由于有生物活性的異二聚體的形成需要兩種亞單位共同表達(dá)在同一細(xì)胞內(nèi),因而IL23主要來源于活化的巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞,作為IL12家族的新成員,IL23主要作為一種前炎癥細(xì)胞因子而發(fā)揮作用,還具有影響免疫反應(yīng)和潛在的抗腫瘤、抗感染作用。IL23主要刺激一種以產(chǎn)生IL17為特點的特殊的T細(xì)胞亞單位即Th17細(xì)胞生長和存活,通過IL23/IL17軸途徑發(fā)揮作用[14]。MURPHY等[15]對IL23的致病機(jī)制進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)IL23主要是通過促進(jìn)炎性細(xì)胞因子IL17的分泌,致使小鼠發(fā)生炎癥性疾病。IL17在多種慢性炎癥中發(fā)揮了重要作用,如:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、IBD、MS、結(jié)腸炎、支氣管哮喘等。IL17是促進(jìn)炎癥發(fā)生過程中的一種重要的可溶性因子[1618]。它的生物學(xué)作用主要包括:①IL17可通過不同的途徑直接或間接作用于中性粒細(xì)胞,趨化中性粒細(xì)胞在食管中募集,促進(jìn)中性粒細(xì)胞發(fā)育成熟和活化[19]。中性粒細(xì)胞在趨化、激活和吞噬過程中不僅可向吞噬溶酶體內(nèi)釋放產(chǎn)物,而且還可將產(chǎn)物釋放到細(xì)胞外間質(zhì)中,中性粒細(xì)胞釋放的產(chǎn)物包括溶酶體酶、活性氧自由基、前列腺素和白細(xì)胞三烯。這些產(chǎn)物可引起內(nèi)皮細(xì)胞和組織損傷,加重原始致炎因子的損傷作用。②IL17通過與上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、纖維母細(xì)胞等間質(zhì)細(xì)胞表面的IL17R結(jié)合而激活NFκB和MAPK途徑。從而促使這些細(xì)胞產(chǎn)生復(fù)雜的前炎癥細(xì)胞因子,包括IL6、TNFα、IL1β、IL8、粒細(xì)胞集落刺激因子、前列腺素E2、化學(xué)增活劑和金屬蛋白酶等[16],以及增加纖維母細(xì)胞表面細(xì)胞間黏附分子1的表達(dá)[20],從而誘導(dǎo)炎癥的發(fā)生。③IL17可刺激巨噬細(xì)胞聚集于局部的炎癥區(qū)域,被細(xì)菌毒素或組織壞死產(chǎn)物或炎癥介質(zhì)激活后,參與炎癥反應(yīng)及免疫反應(yīng),可產(chǎn)生IL1β、TNFα、IL6,而IL6、TNFα、IL1β等能增加膠原蛋白聚集、抑制細(xì)胞外基質(zhì)分解、刺激成纖維細(xì)胞的增殖,在纖維組織形成和平滑肌增生中起重要作用[2022]。④IL17可促進(jìn)補(bǔ)體的產(chǎn)生[17],C3和C5是重要的炎癥介質(zhì)。因此,IL17在免疫炎癥性疾病的發(fā)生中有可能起到關(guān)鍵性的作用。目前,研究發(fā)現(xiàn)其與機(jī)體多種疾病相關(guān), 特別是肺部感染、哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、器官移植、腸道炎癥等炎癥性疾病關(guān)系密切,但與RE的相關(guān)研究目前尚少。
本研究成功的復(fù)制了與人類RE相似的胃內(nèi)容物反流所致的大鼠食管炎模型,實驗結(jié)果顯示,在RE大鼠食管組織中IL23p19和IL17 mRNA表達(dá)均較正常大鼠增高,在RE食管組織中IL17的蛋白含量均顯著高于正常對照組。結(jié)合我們的實驗結(jié)果可推測,IL23、IL17是參與大鼠RE發(fā)病的重要的細(xì)胞因子,以及它們所發(fā)揮的作用提示IL23/IL17軸有可能成為免疫治療這類疾病的新靶點。
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【關(guān)鍵詞】 實驗性自身免疫性腦脊髓炎; 多發(fā)性硬化; TIM-3; TIM-1; 阿托伐他汀
實驗性自身免疫性腦脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE)是以中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘為特征的疾病,是研究MS的理想動物模型[1]。T細(xì)胞免疫球蛋白和黏液域蛋白(TIM)家族是一類具有免疫調(diào)節(jié)作用的蛋白,可以作為Th細(xì)胞的分化標(biāo)志[2]。TIM-3是TIM家族中的一員,Monney等[3]研究發(fā)現(xiàn),在體內(nèi)運(yùn)用TIM-3特異性抗體使EAE小鼠疾病死亡率增加,中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥病灶增多,增加和激活CD11b+細(xì)胞。TIM-1最先被發(fā)現(xiàn)與變應(yīng)性哮喘的發(fā)生有關(guān)[4]。TIM-1選擇性表達(dá)于Th2細(xì)胞上,在Th1細(xì)胞及Th17細(xì)胞上沒有表達(dá)[5]。目前研究提示,在人體中,TIM-1不僅與過敏性疾病和哮喘有關(guān),在自身免疫性疾病中也起著調(diào)節(jié)作用,如在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的產(chǎn)生與TIM-1的外顯子4相關(guān),C反應(yīng)蛋白與類風(fēng)濕因子的水平與TIM-1基因的啟動子多態(tài)性相關(guān)[6]。在MS緩解期患者腦脊液單核細(xì)胞上可檢測到TIM-1 mRNA的表達(dá),提示TIM-1對MS的恢復(fù)具有有益作用,其機(jī)制可能與免疫耐受有關(guān)[7]。
目前各種能夠緩解EAE病情的免疫調(diào)節(jié)藥物在MS的治療作用仍在試驗階段,且存在相關(guān)的副作用及潛在的毒性作用[8]。最近發(fā)現(xiàn),他汀類藥物除了其調(diào)脂作用外,亦存在免疫調(diào)節(jié)作用使之用于治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘疾病,如MS的研究越來越多[9]。他汀類藥物運(yùn)用于MS以及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等得臨床試驗也已經(jīng)得到有前景的結(jié)果[10]。他汀類藥物的免疫調(diào)節(jié)作用包括有保護(hù)血腦屏障的完整性[11],抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥細(xì)胞浸潤[11],促進(jìn)Th1細(xì)胞反應(yīng)向Th2細(xì)胞反應(yīng)偏移等[9]。最近發(fā)現(xiàn)除外其免疫調(diào)節(jié)作用外,他汀類藥物對EAE還具有神經(jīng)保護(hù)和促進(jìn)神經(jīng)再生的作用[12]。
本實驗從免疫誘導(dǎo)第1天開始予以阿托伐他汀藥物治療,根據(jù)國外文獻(xiàn)報道,選擇8 mg/(kg·d)作用治療劑量,觀察阿托伐他汀對EAE的治療作用。并通過檢測TIM-3及TIM-1 mRNA的表達(dá)情況檢測阿托伐他汀是否通過影響其表達(dá)對EAE起治療作用。
1 材料與方法
1.1 實驗動物 Wistar大鼠30只,6~8周齡,體重(200±20)g,雌性;豚鼠10只,300~400 g,雌雄不限。購于湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院實驗動物養(yǎng)殖場。在中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院動物實驗中心分籠飼養(yǎng),每籠5只。喂食本醫(yī)院動物實驗中心配置的大鼠飼料,飲自來水,保持室溫(18±2)℃,相對濕度(50±10)%,人工光照時間12 h/d,自動抽風(fēng),每日上午更換食、水和墊料1次,飼養(yǎng)觀察3 d,能正常進(jìn)食和飲水者納入實驗用鼠。
1.2 主要試劑 阿托伐他汀購自大連輝瑞制藥有限公司,卡介苗(BCG)凍干粉購自北京生物制品研究所,醫(yī)用羊毛脂購自重慶化學(xué)試劑廠,羅可沙爾堅牢藍(lán)購自Sigma公司,RT-PCR試劑盒由Fermentas公司生產(chǎn),EDTA、Tris購自Sigma公司,引物由上海生物工程技術(shù)有限公司生產(chǎn)。
1.3 抗原制備 完全福氏佐劑(CFA)的配制:取醫(yī)用的石蠟油40 ml,醫(yī)用羊毛脂10 g,于三角瓶內(nèi)充分混合,高溫滅菌30 min,制成不完全福氏佐劑。將失活的卡介苗凍干粉60 mg用少量生理鹽水溶解加入不完全福氏佐劑中充分混合均勻,制成含卡介苗為6 mg/ml的完全福氏佐劑,置于4 ℃冰箱保存。豚鼠脊髓勻漿(guinea pig spinal cord homogenate, GPSCH)提取和免疫抗原制作:用10%水合氯醛(3 ml/kg)腹腔注射麻醉豚鼠處死后,剝出脊髓,去掉馬尾與脊膜并稱重,加入少量無菌冰生理鹽水,用手動勻漿器將其制成50%(質(zhì)量濃度)的豚鼠脊髓勻漿。取等體積的GPSCH與CFA混勻制成穩(wěn)定的油包水型乳劑,置于4 ℃的冰箱保存并于12 h內(nèi)用于誘發(fā)EAE。
1.4 實驗動物分組及干預(yù)處理 將30只雌性Wistar大鼠隨機(jī)分為三組:佐劑組(CFA)(n=10),用生理鹽水代替免疫抗原,常規(guī)飼養(yǎng),即日開始灌服0.1% PBS溶液,每次灌服液體量1.5 ml/只,1次/d;EAE組(n=10),無菌操作下,在Wistar大鼠雙后肢足墊皮下注射GPSCH-CFA乳劑(0.2 ml/100 g),EAE模型建立后,常規(guī)飼養(yǎng),即日開始灌服0.1% PBS溶液,每次灌服液體量1.5 ml/只,1/d次。阿托伐他汀組(n=10),EAE模型建立后常規(guī)飼養(yǎng),即日開始灌服含阿托伐他汀的0.1% PBS溶液,1次/d,劑量為8 mg/(kg·d)。
1.5 動物行為觀察和神經(jīng)功能障礙評分 將免疫抗原注射日定為第0天,每日稱體重觀察病情并進(jìn)行神經(jīng)功能障礙評分。從出現(xiàn)臨床癥狀開始至實驗終止每天按照Benson評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分(如下),2次/d。1級:尾部無力或跋踞步態(tài)伴尾部有力;2級:蹣跚步態(tài)伴尾部無力(共濟(jì)失調(diào));2.5級:共濟(jì)失調(diào)伴部分單肢麻痹;3級:單肢完全麻痹;3.5級:單肢完全麻痹伴另一肢體部分麻痹;4級:雙肢完全麻痹;4.5級;四肢麻痹;5級:死亡。
1.6 動物處死時間和標(biāo)本處理 于大鼠免疫后第13天(相當(dāng)于EAE組發(fā)病高峰期)終止實驗,處死所有大鼠,無菌條件下迅速取出完整腦,留左腦后放入RNase-free的凍存管于液氮環(huán)境下保存,以作為提取RNA用。右腦標(biāo)本放入4%多聚甲醛固定,進(jìn)行HE染色和LFB染色。
1.7 RT-PCR法檢測Tim-3 mRNA、Tim-1 mRNA表達(dá) 取保存液氮中的腦組織采取Trizol法提取各樣本總RNA,紫外分光光度計測定濃度并定量后逆轉(zhuǎn)錄,逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進(jìn)行PCR反應(yīng)。根據(jù)GenBank中目的基因所對應(yīng)的cDNA表達(dá)序列和提供的相關(guān)資料,利用軟件Primer Premier 5.0設(shè)計上下游引物:TIM-3:上游引物:5′-CAATTCCCTGGCCCAATGAATGA-3′,下游引物:5′-ACTTCCCTCAGTGGTTAGGGTTCT-3′ Tm 60 ℃,產(chǎn)物長度為150 bp。TIM-1:上游引物5′-TGGTTGTCACCAGGTACATCA
TTATA-3′,下游引物:5′-TGCGTTCTGCAAAGCTCTACTC-3′ Tm 56 ℃,產(chǎn)物長度為170 bp。GAPDH:上游引物:5′-TCCTCTGACTTCAACAGCGACACC-3′,下游引物:5′-GTCTCTCTCTTCCTCTTGTGCTCTTGC-3′ Tm 58 ℃,產(chǎn)物長度為450 bp。PCR反應(yīng)條件見表1。
通過PCR最后確定TIM-3、TIM-1退火溫度(Tm)分別為60 ℃、56 ℃,最后按照此條件進(jìn)行所有樣品的PCR擴(kuò)展。產(chǎn)物于1%瓊脂凝膠電泳;凝膠成像系統(tǒng)下觀察。
1.8 數(shù)據(jù)分析 將圖片采集,并用Quality one軟件對圖像進(jìn)行灰度分析。
1.9 統(tǒng)計學(xué)處理 所有統(tǒng)計分析均用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件包完成,計量資料以(x±s)表示,多組計量資料均數(shù)比較用單因素完全隨機(jī)方差分析(ANOVA),并做多組間兩兩均數(shù)比較(LSD-t檢驗法)。P
2 結(jié)果
2.1 實驗大鼠的發(fā)病率、體重及神經(jīng)功能評分變化 佐劑組無大鼠發(fā)病。EAE組共有8只大鼠發(fā)病,發(fā)病率為80%,有1只大鼠死亡。阿托伐他汀組共有3只大鼠發(fā)病,發(fā)病率為30%。佐劑組大鼠體重逐步增加。EAE組各亞組大鼠的體重?fù)p失隨病情加重而增加,在發(fā)病高峰時體重?fù)p失達(dá)到最高值。阿托伐他汀組大鼠體重?fù)p失較EAE組減少,比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P
2.2 實驗大鼠腦組織的病理學(xué)變化 佐劑組大鼠CNS HE染色結(jié)構(gòu)清晰,無炎性細(xì)胞浸潤(圖3)。EAE組大鼠腦實質(zhì)內(nèi)可見血管“袖套”樣改變,亦可見膠質(zhì)細(xì)胞及一定數(shù)量的巨噬細(xì)胞(圖4)。阿托伐他汀組大鼠腦組織炎性細(xì)胞浸潤的程度較EAE組減少(圖5)。LFB染色EAE組可見大片或融合的脫髓鞘灶,甚至軸索染色亦缺失,呈空泡樣改變(圖2)。阿托伐他汀組未見明顯髓鞘脫失。
圖5 阿托伐他汀組大鼠側(cè)腦室周圍組織未見炎性細(xì)胞浸潤×400
2.3 RT-PCR結(jié)果 與佐劑組比較,EAE組TIM-3 mRNA上升(P
3 討論
以往EAE被認(rèn)為是針對自身髓鞘的Th1型反應(yīng)為主的自身免疫性疾病。近年來越來越多的證據(jù)提示,Th17細(xì)胞亦參與該疾病的病理過程。最初認(rèn)為,CD4+效應(yīng)T細(xì)胞分為Th1和Th2細(xì)胞兩類。Th1/Th2平衡在EAE的發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用。大多數(shù)學(xué)者認(rèn)為,Th1/Th2平衡的偏移導(dǎo)致Th1細(xì)胞增多是造成MS發(fā)病的關(guān)鍵。TIM家族是一類具有免疫調(diào)節(jié)作用的蛋白,因為其在T細(xì)胞上表達(dá)情況的不同可以作為Th細(xì)胞的分化標(biāo)志。TIM-3被發(fā)現(xiàn)特異性的表達(dá)于Th1細(xì)胞上,而在Th2細(xì)胞上無表達(dá)。TIM-1選擇性表達(dá)與Th2細(xì)胞上,在Th1細(xì)胞及Th17細(xì)胞上沒有表達(dá)。在MS緩解期患者腦脊液單核細(xì)胞上可檢測到TIM-1mRNA的表達(dá),提示TIM-1對MS的恢復(fù)具有有益作用,其機(jī)制可能與免疫耐受有關(guān)。綜上所述,TIM-3可作為Th1細(xì)胞的分化標(biāo)志,而TIM-1可作為Th2細(xì)胞的分化標(biāo)志。本實驗通過檢測上述兩個指標(biāo)間接反應(yīng)EAE大鼠中Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞的變化。在EAE大鼠中TIM-3 mRNA上升,TIM-1 mRNA下降,符合EAE發(fā)病過程中Th1型反應(yīng)增多,同時Th2型反應(yīng)有所下降,與文獻(xiàn)報道結(jié)果一致。
目前大量研究發(fā)現(xiàn),他汀類藥物在體內(nèi)抑制膽固醇生物合成同時,還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎及神經(jīng)保護(hù)作用,對某些神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病如MS,EAE等有治療作用。本實驗中筆者使用阿托伐他汀干預(yù)EAE,結(jié)果發(fā)現(xiàn),干預(yù)后的EAE大鼠發(fā)病率、神經(jīng)功能損傷評分、體重變化等較佐劑組和EAE組大鼠明顯減輕或延遲,病理方面炎性細(xì)胞浸潤及脫髓鞘病變亦較EAE組明顯減少。以上結(jié)果均證實阿托伐他汀對EAE大鼠的治療作用。HE染色顯示炎性細(xì)胞明顯減少,推測其與抑制抑制T淋巴細(xì)胞向中樞神經(jīng)系統(tǒng)遷移,保護(hù)BBB完整性,從而減少CNS系統(tǒng)炎性細(xì)胞浸潤有關(guān)。LFB染色結(jié)果脫髓鞘病變少見,證實了阿托伐他汀的神經(jīng)保護(hù)作用,推測其機(jī)制可能與抑制促炎性細(xì)胞因子誘導(dǎo)的細(xì)胞毒素釋放,增強(qiáng)少突膠質(zhì)干細(xì)胞的存活和分化,抑制反應(yīng)性神經(jīng)膠質(zhì)增生,形成有利于髓鞘再生的環(huán)境。本實驗還通過測定TIM-3及TIM-1mRNA發(fā)現(xiàn),與EAE比較阿托伐他汀干預(yù)后TIM-3表達(dá)下降,TIM-1表達(dá)上升,提示其能通過減少Th1型反應(yīng)減少EAE中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng),并使之向Th2型反應(yīng)轉(zhuǎn)化,從而使EAE病情緩解,對EAE產(chǎn)生治療作用。
綜上所述,阿托伐他汀可能是一種有前景的多發(fā)性硬化治療藥物。
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