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關(guān)鍵詞:紅細(xì)胞 白細(xì)胞 顯微鏡檢查
Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.03.547
【中圖分類號(hào)】R9 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801(2014)03-0353-01
尿液檢查是診斷腎臟疾病和泌尿道疾病的重要方法。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展,尿干化學(xué)法因其靈敏度高、快捷、標(biāo)本用量少、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn),已逐步在基層醫(yī)院普及。但是尿干化學(xué)法還不能完全替代顯微鏡檢查。在一些情況下,如管型、紅細(xì)胞、白細(xì)胞等可能導(dǎo)致假陽(yáng)性或假陰性。這兩種方法均為臨床上常用的檢測(cè)方法,各有其優(yōu)點(diǎn)及不足。本文分別用干化學(xué)法顯微鏡檢法對(duì)180例尿樣進(jìn)行檢測(cè),以探討尿液檢驗(yàn)中顯微鏡檢查尿液紅細(xì)胞、白細(xì)胞的重要性。
1 材料與方法
1.1 樣本來源。取自住院患者晨尿中段尿液樣本160份,進(jìn)行尿干化學(xué)分析和顯微鏡檢。
1.2 檢測(cè)儀器。采用優(yōu)利特-500B尿液干化學(xué)分析儀和配套尿11項(xiàng)試紙;Olympus光學(xué)顯微鏡。
1.3 檢測(cè)方法。按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第三版進(jìn)行操作,用一次尿杯留取晨尿約30mL,取10mL置于特制的塑料離心管中,將試紙條浸入2s后取出,放于分析儀上作干化學(xué)檢測(cè)。完畢后將尿液于1500r/min離心5min,棄去上清,剩余0.2mL左右,混勻,先用低倍鏡觀察全片,再以高倍鏡仔細(xì)觀察,并計(jì)數(shù)每個(gè)視野內(nèi)紅細(xì)胞、白細(xì)胞的數(shù)目,記錄方式為:×個(gè)細(xì)胞/HP,×個(gè)管型/LP。
1.4 參考范圍及結(jié)果判定。連續(xù)鏡檢10個(gè)視野:WBC:0~5個(gè)/HP,RBC:0~3個(gè)/HP,超出此范圍則判定為陽(yáng)性。假陰性:干化學(xué)法正常,鏡檢異常。假陽(yáng)性:干化學(xué)異常,鏡檢正常。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法。采用SPSS16.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組間的陽(yáng)性率比較采用X2檢驗(yàn),以P
2 結(jié)果分析
對(duì)180例尿液樣本進(jìn)行干化學(xué)法和顯微鏡法檢驗(yàn)分析。干化學(xué)法RBC陽(yáng)性94例,占58.75%,顯微鏡法陽(yáng)性63例,占39.38%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=2.532,P
3 討論
3.1 目前,干化學(xué)法尿液分析儀以其方法簡(jiǎn)捷、檢測(cè)快速、靈敏度高、重復(fù)性較好,一般可檢測(cè)10項(xiàng)及以上等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛地應(yīng)用。但由于干化學(xué)分析儀原理是試劑帶墊呈色反應(yīng)與光、電學(xué)相結(jié)合而檢測(cè)紅細(xì)胞和白細(xì)胞,從而對(duì)有形成分的檢測(cè)具有一定局限性。由于尿液成分復(fù)雜,干化學(xué)項(xiàng)目繁多,其檢測(cè)原理各不相同,所以影響因素很多,易出現(xiàn)假陰性和假陽(yáng)性結(jié)果;而尿沉渣鏡檢雖操作繁瑣,但標(biāo)準(zhǔn)化的顯微鏡檢查仍是尿沉渣分析的“金標(biāo)準(zhǔn)”,其通過顯微鏡的放大作用,直接將紅細(xì)胞、白細(xì)胞等有形成分直觀、真實(shí)地呈現(xiàn)于鏡下。
3.2 干化學(xué)法檢測(cè)紅細(xì)胞原理:血紅蛋白類過氧化物作用催化分解過氧化物,釋放出氧使鄰聯(lián)甲苯胺氧化而呈色。其色澤的深淺與尿中的血紅蛋白或紅細(xì)胞量呈正比。多數(shù)情況下可以真實(shí)反映尿中紅細(xì)胞的情況,但某些情況下與鏡檢結(jié)果不一致。尿路感染而出現(xiàn)的分泌物和某些氧化物的污染如次氯酸鹽可引起干化學(xué)法假陽(yáng)性,一些疾患如腎病引起尿中紅細(xì)胞破壞、溶血性疾病導(dǎo)致血紅蛋白尿等都能產(chǎn)生假陽(yáng)性。尿液pH值低、比重低、放置時(shí)間長(zhǎng),尿中紅細(xì)胞就會(huì)開始溶解,也會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果產(chǎn)生。維生素C具有還原性,可競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng),若尿中含有大量的維生素C,可使干化學(xué)法檢測(cè)紅細(xì)胞呈現(xiàn)假陰性。
3.3 對(duì)于白細(xì)胞的檢測(cè)而言,干化學(xué)法的檢測(cè)原理是基于中性粒細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有特異性酯酶,而這種酯酶在紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、血小板、血清、腎臟及尿液中均不存在,試紙反應(yīng)基質(zhì)是吲哚酚羥基酸酯,在酯酶作用下將其轉(zhuǎn)變?yōu)檫胚岱樱俳?jīng)氧化而產(chǎn)生靛藍(lán),以其顏色深淺換算成白細(xì)胞數(shù)。但這只能檢測(cè)胞質(zhì)內(nèi)含酯酶的粒細(xì)胞,而不與淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞反應(yīng)。因此,當(dāng)尿液中只有淋巴細(xì)胞或單核細(xì)胞時(shí),對(duì)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞會(huì)漏診,從而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。
本文研究結(jié)果顯示,干化學(xué)法尿液白細(xì)胞陽(yáng)性率為23.15%,低于顯微鏡檢尿液白細(xì)胞的35.62%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=3.218,P
3.4 要加強(qiáng)尿常規(guī)檢測(cè)的規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化,必須把干化學(xué)法和尿沉渣鏡檢結(jié)合起來,相互補(bǔ)充,如果兩種方法結(jié)果明顯不符,必須結(jié)合臨床綜合分析,只有這樣才能提高尿液檢測(cè)的準(zhǔn)確性,為臨床提供準(zhǔn)確的診斷和治療依據(jù)。通過本研究證實(shí),兩種操作方法有各自的優(yōu)缺點(diǎn),只有將兩種方法有機(jī)結(jié)合,綜合分析,才能提高尿液檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性,為臨床提供準(zhǔn)確的參考、診斷和治療依據(jù)。
4 結(jié)語(yǔ)
尿液紅細(xì)胞、白細(xì)胞的檢查對(duì)腎疾病的檢測(cè)有重要意義,是泌尿系統(tǒng)疾病必不可少的診斷手段之一。目前,無(wú)論多么先進(jìn)的尿分析儀,都無(wú)法完全取代尿液的顯微鏡檢查,而只能起到篩出的作用。中華醫(yī)學(xué)會(huì)多次專家研討之后也指出:在化學(xué)試劑帶的質(zhì)量合格和尿液分析儀運(yùn)轉(zhuǎn)正常的情況下,實(shí)驗(yàn)結(jié)果中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、蛋白和亞硝酸鹽中若有一項(xiàng)結(jié)果為陽(yáng)性,就必須同時(shí)進(jìn)行顯微鏡檢查。這表明了顯微鏡檢查是尿常規(guī)檢查中不可或缺的,也無(wú)法替代。只有結(jié)合顯微鏡檢查,才能提高尿液檢查的準(zhǔn)確度和靈敏度,從而為臨床診斷及治療提供準(zhǔn)確的依據(jù)。
參考文獻(xiàn)
[1] 叢玉隆,王淑娟.今日臨床檢驗(yàn)學(xué)[M].北京:中國(guó)科技出版社,1997:236-239
【關(guān)鍵詞】 顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù); 尿液分析儀潛血檢驗(yàn); 假陽(yáng)性率; 假陰性率
中圖分類號(hào) R446.12 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805(2016)1-0064-02
doi:10.14033/ki.cfmr.2016.1.035
患者進(jìn)入醫(yī)院門診后需要進(jìn)行血、尿常規(guī)的檢測(cè),在尿常規(guī)中潛血檢查有著非常顯著的重要性。常用的潛血檢查法有如下兩種,一種是借助尿液分析儀進(jìn)行潛血檢查,另一種是借助顯微鏡檢驗(yàn)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)[1]。這兩種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),尿液分析儀法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單快捷,缺點(diǎn)是容易受到諸多因素干擾;鏡檢RBC法可靠直觀,可以直接分辨出血尿的來源是否為腎小球,缺點(diǎn)是操作難度大、耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)。本研究選擇尿液分析儀法和鏡檢RBC法,試探析兩者在臨床診斷中的價(jià)值表現(xiàn)。
1 資料與方法
1.1 一般資料
擇取2013年6月-2014年6月在筆者所在醫(yī)院接受尿液潛血檢驗(yàn)的160例患者,其中男88例,女72例。年齡最小的11歲,年齡最大的75歲,平均(42.58±4.67)歲。所屬門診科室的分布為:兒科16例、外科32例、婦科44例、內(nèi)科68例。將這160例患者按照隨機(jī)數(shù)字表法分為兩組,分別給予不同檢驗(yàn)方法,借助尿液分析儀行以潛血檢驗(yàn)(簡(jiǎn)稱尿液分析儀)的80例患者歸入研究組,借助顯微鏡行以紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(簡(jiǎn)稱鏡檢RBC)的80例患者歸入對(duì)照組。兩組患者基線資料,年齡、所屬科室分布以及性別構(gòu)成比等差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。
1.2 檢測(cè)方法
研究組:采取尿液分析儀法進(jìn)行潛血檢驗(yàn)。取患者晨尿10 ml,將其置入干凈的試管內(nèi),取試紙,將其完全浸入患者尿液標(biāo)本,1 s后將試紙取出,將其放置到尿液分析儀上進(jìn)行潛血檢查。
對(duì)照組:采取鏡檢RBC法進(jìn)行潛血檢驗(yàn)。取患者晨尿10 ml,將其抽吸到離心試管中,并行以時(shí)長(zhǎng)為5 min、轉(zhuǎn)速為1500 r/min的離心處理。離心后將上清液撇除,將0.2 ml的沉渣液留下,混合攪拌均勻后將其置于載玻片上,并將蓋玻片覆蓋其上。再使用顯微鏡進(jìn)行紅細(xì)胞觀察。在觀察過程中,顯微鏡的倍數(shù)逐漸加大,以保證切實(shí)地觀察到標(biāo)本中是否存在紅細(xì)胞。
1.3 觀察指標(biāo)
統(tǒng)計(jì)兩種方法的檢測(cè)結(jié)果并進(jìn)行陰性率與陽(yáng)性率的對(duì)比。將鏡檢RBC法結(jié)果設(shè)為基準(zhǔn),對(duì)比尿液分析儀法結(jié)果的假陰性率及假陽(yáng)性率。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
采用SPSS 19.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料用均數(shù)計(jì)數(shù)資料比較采用字2檢驗(yàn),P
2 結(jié)果
2.1 兩組方法檢查結(jié)果對(duì)比
研究組80例患者在行以了尿液分析儀檢驗(yàn)后,其陽(yáng)性率為32.50%,陰性率為67.50%。對(duì)照組80例患者在行以了鏡檢RBC的檢驗(yàn)后其陽(yáng)性率為25.00%,陰性率為75.00%。經(jīng)對(duì)比,尿液分析儀法陽(yáng)性率更高,鏡檢RBC法陰性率更高,但綜合看來,兩種方法的檢測(cè)結(jié)果比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(字2=1.10,P>0.05),具體見表1。
2.2 假陰性率及假陽(yáng)性率的對(duì)比
以鏡檢RBC法的檢測(cè)結(jié)果作為基準(zhǔn)來對(duì)比尿液分析儀法的假陰性率及假陽(yáng)性率,分別為13.33%和10.00%,具體見表2。
3 討論
3.1 鏡檢RBC法
這種方法依托于顯微鏡的方法功能,對(duì)患者尿液沉渣中含有的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行最為直觀的檢查。鑒于直觀這一特色,可以直接判別患者的血尿原因是否為腎小球疾病所導(dǎo)致。由于該方法可以實(shí)現(xiàn)對(duì)紅細(xì)胞的準(zhǔn)確計(jì)數(shù),因此在尿液紅細(xì)胞檢測(cè)中一直為視為“金標(biāo)準(zhǔn)”,其優(yōu)越性無(wú)法被尿液分析法頂替[2]。然而,鏡檢RBC法也有著非常明顯的缺點(diǎn)。在進(jìn)行高倍顯微觀察之前,必須經(jīng)歷復(fù)雜的離心操作與玻片制備操作,工作量較大、難度也較高。顯微鏡倍數(shù)的調(diào)節(jié)需要緩緩進(jìn)行,因此所耗費(fèi)的檢查時(shí)間也比較長(zhǎng)。對(duì)于血尿病因是否為腎小球性的判斷,也必須由專業(yè)人員進(jìn)行判別。若操作人員經(jīng)驗(yàn)不足或?qū)I(yè)性不夠,則很可能造成檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)較大的誤差,從而影響到患者的檢測(cè)結(jié)果[3]。
3.2 尿液分析儀法
本方法主要借助于對(duì)試紙的變色狀況進(jìn)行分析。本研究所選用的試紙其成分包括過氧化氫茴香素,而尿中的血紅蛋白則含有亞鐵血紅素,其遇到過氧化氫酶將會(huì)出現(xiàn)活性上的變化[4]。將試紙放入尿液標(biāo)本中,這兩種成分密切接觸,就會(huì)使茴香素發(fā)生分解反應(yīng),產(chǎn)生出游離氧,游離氧再與鄰甲苯胺發(fā)生氧化反應(yīng),鄰甲苯胺便會(huì)出現(xiàn)顏色變化。試紙變化后的顏色與血紅蛋白含量密切相關(guān),血紅蛋白含量低則試紙呈黃色;血紅蛋白含量較高,則試紙呈深藍(lán)色。即隨著含量增加,試紙顏色從黃色過渡到綠色,再過渡到藍(lán)色。
本方法的優(yōu)點(diǎn)在于操作簡(jiǎn)單迅速,不必進(jìn)行復(fù)雜的離心操作,難度要比鏡檢RBC法低得多。操作人員也不必是專業(yè)水平非常高的醫(yī)師,要比鏡檢RBC法省時(shí)省力得多。當(dāng)然,尿液分析儀法的缺點(diǎn)也比較顯著,即受干擾性非常高,外界的各種因素都會(huì)使得檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)不同。
以下幾種情況可能導(dǎo)致檢查結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性:(1)患者發(fā)生心肌損傷或者骨骼發(fā)生嚴(yán)重傷害,血漿中肌紅蛋白水平將會(huì)明顯升高,而肌紅蛋白與尿液中的血紅蛋白一樣,遇到過氧化酶其活性將會(huì)增加,使得檢查出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。(2)患者發(fā)生尿路感染,會(huì)使尿液中的細(xì)菌產(chǎn)生氧化物,氧化物與試紙發(fā)生反應(yīng),就會(huì)使檢查結(jié)果呈現(xiàn)出假陽(yáng)性。(3)第三種情況是尿液標(biāo)本沒有及時(shí)送檢,存放時(shí)間超過2 h;或者標(biāo)本放置的環(huán)境溫度過高,都會(huì)使?jié)撗Y(jié)果呈現(xiàn)出(假)陽(yáng)性。(4)尿液標(biāo)本保存不當(dāng),進(jìn)入或存在一些會(huì)導(dǎo)致檢查結(jié)果為(假)陽(yáng)性的成分。如外來的氧化物、尿液中本來就存在的無(wú)法耐受高溫的酶等。(5)試紙受到了污染或者超過使用期限,也會(huì)使檢測(cè)結(jié)果為(假)陽(yáng)性。而如下兩種情況則會(huì)使檢測(cè)結(jié)果呈現(xiàn)為(假)陰性:(1)尿液中黏液成分過多,紅細(xì)胞被其包裹起來,試紙放入這樣的尿液標(biāo)本中,血紅蛋白無(wú)法與試紙直接接觸,尿液將呈現(xiàn)出(假)陰性結(jié)果。(2)第二種情況是尿液中維生素C的含量過高,會(huì)對(duì)茴香素分解產(chǎn)生的游離氧進(jìn)行優(yōu)先反應(yīng),鄰甲苯胺得不到游離氧的接觸,自然無(wú)法呈色,這時(shí)檢查結(jié)果就會(huì)變成(假)陰性[5]。
鑒于鏡檢RBC具有更高的準(zhǔn)確率,本研究暫以鏡檢法結(jié)果作為基準(zhǔn),將尿液分析儀法的檢驗(yàn)結(jié)果與其對(duì)照。通過對(duì)照可以發(fā)現(xiàn),尿液分析儀法的假陰性率和假陽(yáng)性率分別為13.33%和10.00%,仍在可允許范圍內(nèi)。雖然其準(zhǔn)確率稍低于鏡檢法,但因其操作簡(jiǎn)單的特點(diǎn),可以將其用于機(jī)關(guān)單位的普通體檢。若患者需要復(fù)診或確診,則需要在尿液分析儀法的基礎(chǔ)上聯(lián)合使用鏡檢RBC法,這樣可以確保診斷的準(zhǔn)確,避免誤診和漏診的情況[6]。
綜上所述,門診為患者行以尿常規(guī)的尿液潛血檢測(cè),優(yōu)作較難的鏡檢RBC法。選操作簡(jiǎn)單的尿液分析儀法,若患者有復(fù)診與確診的需要,則可聯(lián)合應(yīng)用準(zhǔn)確率更高但操作較難的鏡檢RBC法。
參考文獻(xiàn)
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【關(guān)鍵詞】 臨床免疫學(xué); 免疫檢驗(yàn); 實(shí)踐; 探索
臨床免疫學(xué)是免疫學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)的重要連接環(huán)節(jié)。免疫學(xué)檢驗(yàn)是以免疫學(xué)原理為基礎(chǔ),利用各種具有敏感特性的標(biāo)記技術(shù),對(duì)各種病理和生理的免疫學(xué)指標(biāo)行特異性、超微量地分析,包括細(xì)胞的、體液的診治及預(yù)后評(píng)估[1]。就免疫學(xué)檢驗(yàn)進(jìn)行準(zhǔn)確定位,是臨床醫(yī)生依據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)疾病進(jìn)行診治和防控的有效技術(shù)手段,具有非常重要的研究?jī)r(jià)值。本文就臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)的相關(guān)實(shí)施與探索進(jìn)行綜述如下。
1 臨床免疫學(xué)概念
臨床免疫學(xué)屬重要的免疫學(xué)分支部分,為免疫學(xué)應(yīng)用到臨床醫(yī)學(xué)的途徑。免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展和進(jìn)步與臨床免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展進(jìn)步有著密切相關(guān)性,為臨床及時(shí)、科學(xué)的應(yīng)用免疫學(xué)新技術(shù),在疾病的治療、監(jiān)測(cè)、確診、預(yù)后中均發(fā)揮重要的引導(dǎo)及參考作用[2]。隨著醫(yī)療科技的不斷進(jìn)步,臨床上多種免疫學(xué)技術(shù)已被普遍開展應(yīng)用,如流式細(xì)胞式和免疫細(xì)胞檢測(cè)及分類技術(shù)、血清蛋白電泳技術(shù)及各種肽類物質(zhì)、激素、細(xì)胞因子、腫瘤標(biāo)志的檢測(cè)技術(shù)等[3]。隨著目前檢驗(yàn)項(xiàng)目在臨床的不斷增多,臨床醫(yī)務(wù)人員及患者自身都對(duì)臨床檢驗(yàn)有更高的期待和要求,各種免疫學(xué)技術(shù)均需緊跟醫(yī)療科技發(fā)展步伐,更全面、迅速的發(fā)展,以盡快的與臨床應(yīng)用適宜,進(jìn)而開展臨床免疫學(xué)技術(shù)的嶄新局面。
2 臨床免疫學(xué)促進(jìn)新技術(shù)發(fā)展
技術(shù)的產(chǎn)生、發(fā)展和創(chuàng)新基礎(chǔ)均需有相應(yīng)的理論,如PCR技術(shù)、分子克隆技術(shù)等均為遺傳學(xué)或分子生物學(xué)重要的具有劃時(shí)代意義的技術(shù)。而這些技巧中,理論基礎(chǔ)為DNA的雙螺旋。同時(shí)免疫學(xué)的抗體理論與抗原對(duì)多種臨床免疫學(xué)新技術(shù)的產(chǎn)生也起到了推動(dòng)作用,如標(biāo)記技術(shù)、沉淀、凝集等的發(fā)展進(jìn)展[4]。近年來,受細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)的不斷滲透及免疫學(xué)的飛速積習(xí)難改展,使免疫學(xué)在理論上獲得了較大的突破。
3 臨床免疫學(xué)新技術(shù)發(fā)展特點(diǎn)分析
3.1 多學(xué)科交融 臨床免疫學(xué)經(jīng)典技術(shù)包括免疫標(biāo)記技術(shù)、溶血技術(shù)、中和技術(shù)、沉淀技術(shù)、凝集技術(shù)等。以上技術(shù)為臨床免疫學(xué)基礎(chǔ),在臨床免疫學(xué)傳統(tǒng)及現(xiàn)代的理論中均占有較重要的地位。以上技術(shù)或其基礎(chǔ)上發(fā)展創(chuàng)新的技術(shù)至今仍在科學(xué)研究和臨床檢驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。但生命科學(xué)在不斷發(fā)展,不同學(xué)科間漸較難明確區(qū)分和界定,形成廣泛的滲透和交叉的局面,而遺傳學(xué)和分子生物學(xué)的適體技術(shù)、分子雜交技術(shù)、PCR技術(shù)、染色質(zhì)沉淀技術(shù)等免疫學(xué)新技術(shù),使免疫應(yīng)用范圍和理論不斷拓展。另外,臨床免疫檢驗(yàn)中,組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)中的顯微鏡技術(shù)也為一項(xiàng)重要的技術(shù)手段。如由普通顯微鏡與免疫組織化學(xué)技術(shù)聯(lián)合對(duì)抗原進(jìn)行檢測(cè),自身抗體采用熒光顯微鏡與熒光標(biāo)記技術(shù)聯(lián)合進(jìn)行檢測(cè)。且電子顯微鏡對(duì)細(xì)胞間的相互作用和免疫細(xì)胞的行為可直接行動(dòng)態(tài)觀察。以上技術(shù)的應(yīng)用,使臨床免疫學(xué)技術(shù)得到了較大豐富,為發(fā)展提供了動(dòng)力及方向[5]。同時(shí)免疫學(xué)檢測(cè)數(shù)據(jù)顯著多,用日益復(fù)雜,有效分析數(shù)據(jù)和正確應(yīng)用結(jié)果顯得較為重要故臨床免疫學(xué)與生物信息學(xué)、醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)等學(xué)科的合作與交流也漸趨深入。
3.2 高通量、智能化、自動(dòng)化的免疫新技術(shù) 臨床免疫學(xué)檢測(cè)具有同步化、智能化、自動(dòng)化的特點(diǎn),與傳統(tǒng)手工操作有較大的區(qū)別,如微粒子酶免疫技術(shù)、電化學(xué)發(fā)學(xué)分析技術(shù)等,毛細(xì)管電泳技術(shù)也在臨床廣泛應(yīng)用,目的,生物芯片技術(shù)使整個(gè)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)檢測(cè)實(shí)現(xiàn)了大規(guī)模、平行化、高通量的要求。同時(shí),組學(xué)技術(shù)、后基因技術(shù)、酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)的研究也不斷深入,極大的滿足了臨床免疫學(xué)需要。
4 免疫學(xué)檢驗(yàn)定義
4.1 臨床免疫學(xué)中免疫學(xué)檢驗(yàn)為重要組織部分 以基礎(chǔ)免疫學(xué)理論作指導(dǎo),臨床免疫學(xué)對(duì)免疫學(xué)方法及技術(shù)不斷創(chuàng)新,在對(duì)疾病研究,特別是自身免疫病、腫瘤、傳染病、血液病、免疫缺陷病、變態(tài)反應(yīng)性疾病的病發(fā)機(jī)制、診治、預(yù)后評(píng)估中發(fā)揮著重要作用,屬免疫學(xué)分支學(xué)科,是基礎(chǔ)免疫學(xué)內(nèi)容與臨床免疫學(xué)內(nèi)容的中間環(huán)節(jié),為臨床醫(yī)師對(duì)疾病進(jìn)行研究的相關(guān)技術(shù)方法。
4.2 免疫學(xué)檢驗(yàn)的相關(guān)定義 依據(jù)免疫學(xué)原理,特別是抗體與抗原反應(yīng)原理,對(duì)各種敏感標(biāo)記進(jìn)行利用,如熒光素、發(fā)光物質(zhì)、放射性同位素等,特異地、超微量的對(duì)各種病理和生理免疫學(xué)指標(biāo)進(jìn)行分析,包括細(xì)胞的和體液應(yīng)用,行疾病診治和評(píng)估的一組醫(yī)學(xué)臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目[6]。其要點(diǎn)為即對(duì)抗原抗體反應(yīng)原理加以利用,又可對(duì)免疫學(xué)參數(shù)的各種內(nèi)容進(jìn)行檢測(cè)。
5 免疫學(xué)檢驗(yàn)存在的問題
5.1 定位 目前,有一定數(shù)量的醫(yī)療單位中,尚未設(shè)立免疫學(xué)檢驗(yàn)專業(yè),無(wú)專業(yè)的檢驗(yàn)設(shè)備,無(wú)實(shí)驗(yàn)室,無(wú)固定的專業(yè)的檢驗(yàn)人員,免疫學(xué)檢驗(yàn)中的一些項(xiàng)目被分散在微生物實(shí)驗(yàn)室和生化實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn),對(duì)專業(yè)的發(fā)展造成了一定影響。
5.2 質(zhì)量管理分析 雖免疫學(xué)檢驗(yàn)中大部分項(xiàng)目在各大醫(yī)學(xué)中已參加了國(guó)家衛(wèi)生部相關(guān)室間質(zhì)量評(píng)估活動(dòng),但在對(duì)室內(nèi)質(zhì)量進(jìn)行控制的環(huán)節(jié)中,仍較為薄弱。對(duì)于大部分免疫學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目,在質(zhì)控品和標(biāo)準(zhǔn)品上,國(guó)內(nèi)尚未做到有效統(tǒng)一,雖部分有供應(yīng),但項(xiàng)目不全,價(jià)格昂貴[7]。故多數(shù)試驗(yàn)室質(zhì)量控制不達(dá)標(biāo),導(dǎo)致檢驗(yàn)質(zhì)量不穩(wěn)定。目前,尚普遍存在試劑缺乏統(tǒng)一的現(xiàn)象,檢驗(yàn)結(jié)果中的假陰性、假陽(yáng)性較難杜絕,為質(zhì)量管理及標(biāo)準(zhǔn)化檢查帶來了一定難度[8]。同時(shí),專業(yè)的免疫學(xué)檢驗(yàn)人員較少,缺乏高素質(zhì)、高學(xué)歷的帶頭人,同時(shí)也缺乏嫻熟操作的技術(shù)人員[9]。此外,還存在研究?jī)?nèi)容與臨床缺乏有效結(jié)合等,在疾病診治中未發(fā)揮有效作用[10]。
6 發(fā)展建議
針對(duì)免疫檢驗(yàn)的重要性,醫(yī)院領(lǐng)導(dǎo)和檢驗(yàn)科需重視免疫學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的設(shè)置,設(shè)備引進(jìn)、項(xiàng)目定位和人員配備,加強(qiáng)培訓(xùn),建全室內(nèi)質(zhì)量控制[11],同時(shí)成立免疫檢驗(yàn)學(xué)小組,就相關(guān)問題進(jìn)行分析并制定解決方案,各級(jí)質(zhì)量部分需加強(qiáng)參考品、質(zhì)控品的管理,以提高檢驗(yàn)效果,使臨床免疫學(xué)作用落到實(shí)處[12]。
7 小結(jié)
綜上,臨床檢驗(yàn)為臨床免疫學(xué)的重要組成部分,各項(xiàng)技術(shù)的研發(fā)為臨床檢驗(yàn)學(xué)發(fā)展提供了機(jī)遇,有效縮短了檢測(cè)時(shí)間,節(jié)約了樣本用量,實(shí)現(xiàn)了疾病準(zhǔn)確、快速、無(wú)創(chuàng)的診斷。同時(shí)也需正視存在的困難,對(duì)復(fù)雜的數(shù)據(jù)行合理和有效的應(yīng)用,以減輕患者負(fù)擔(dān),控制成本。同時(shí)加強(qiáng)基礎(chǔ)研究的合作與交流,讓從業(yè)者加強(qiáng)各種技術(shù)的培養(yǎng)和學(xué)習(xí),提高自身綜合素質(zhì),以滿足臨床免疫檢驗(yàn)的要求。
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關(guān)鍵詞:凝聚胺技術(shù);臨床輸血;檢驗(yàn);重要性;應(yīng)用途徑
中圖分類號(hào):R826.2+6 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B 文章編號(hào):1005-0515(2013)3-026-02
隨著臨床醫(yī)學(xué)的發(fā)展,輸血在醫(yī)學(xué)和搶救中起著極為重要的作用。輸血有治療和搶救生命的作用,同時(shí)會(huì)產(chǎn)生有害的作用,如何發(fā)揮輸血的有效治療作用,預(yù)防其有害作用,保證輸血安全,是臨床輸血的重要課題。
交叉配血試驗(yàn)是輸血前必要的步驟,主要是檢查受血者血清中有無(wú)能破壞供血者紅細(xì)胞的抗體。主要目的是為了防止輸血后產(chǎn)生溶血性反應(yīng)。盡可能確保對(duì)人和一個(gè)病人來說,輸了供血者的血不會(huì)引起有害反應(yīng),并且使紅細(xì)胞在輸注后能保持最長(zhǎng)的存活時(shí)間[1]。
交叉配血實(shí)際上是檢查不配合性,使病人,獻(xiàn)血者血液之間沒有可測(cè)到的不相配合的抗原,抗體成分,試驗(yàn)應(yīng)在37°C下進(jìn)行。試驗(yàn)方法除作鹽水介質(zhì)外,還有抗球蛋白試驗(yàn)法、酶法、凝聚胺法或其改良法。在配血的任何步驟中均不產(chǎn)生溶血或凝集鮮血者的血液才能給予病人輸注[2]。
本文為了探討凝聚胺技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的重要性和應(yīng)用價(jià)值,做一系列研究,現(xiàn)報(bào)告如下:
1材料和方法
1.1試劑和器材:凝聚胺試劑盒;生理鹽水;小試管;滴管;試管架;記號(hào)筆;顯微鏡;離心機(jī)。
1.2操作:供受者紅細(xì)胞用生理鹽水配成3-5%的細(xì)胞懸液。加樣量均為:血清100微升,紅細(xì)胞懸液50微升。取試管兩支,表明主側(cè)次側(cè),主側(cè)管加受血者血清(血漿)1滴,和供血者3-5%紅細(xì)胞懸液(洗滌或不洗滌均可)1滴,次側(cè)管受血者3-5%紅細(xì)胞懸液加供血者血清(血漿)1滴。各加LIM溶液3滴,混合均勻后,再各加凝聚胺溶液1滴,并混合均勻,置室溫1分鐘或參照說明書,普通離心機(jī)1000轉(zhuǎn)離心15秒,然后把上清液倒掉,不要瀝干,讓管底殘留約0.1液體。輕輕搖動(dòng)試管,目測(cè)紅細(xì)胞有無(wú)凝集,如無(wú)凝集,則必須重做。最后加入凝聚胺2滴,輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管混勻并同時(shí)觀察結(jié)果。
1.3結(jié)果判定:如果在30秒內(nèi)(或按說明書)凝集散開,代表是由凝聚胺引起的非特異性聚集,配血結(jié)果相合;如凝集不散開,則為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng),配血結(jié)果不想合。如反應(yīng)可疑,可進(jìn)一步倒在玻片上用顯微鏡觀察。
1.4注意事項(xiàng):可以用EDTA抗凝血漿代替血清使用;若受血者血清含肝素,如洗腎患者,須多加4-6滴凝聚胺溶液以中和肝素;試劑使用前請(qǐng)放置至室溫平衡后再行操作。在冬天室溫極低的情況下進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)操作,由于某些受血者血清中可能含有寒冷凝集素等因素,而導(dǎo)致假陽(yáng)性的結(jié)果出現(xiàn),建議進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)操作時(shí)室溫保持在22°C左右,不同的凝聚胺試劑盒操作方法各不相同,實(shí)驗(yàn)時(shí)請(qǐng)嚴(yán)格按照說明書操作。離心后結(jié)果觀察注意事項(xiàng),將試管呈30-45°C角拿在手上,細(xì)胞扣朝上,手腕輕輕用力,用液體去沖細(xì)胞扣,如果為陰性,則細(xì)胞成細(xì)沙狀沿試管壁流下,如果為陽(yáng)性,細(xì)胞呈塊狀脫落細(xì)胞壁或呈齒狀沿試管壁留下。切不可用力使勁搖試管,那樣凝集顆粒會(huì)被搖散,弱凝集則會(huì)誤判為陰性[3]。
2結(jié)果
3討論
鹽水法原理:鹽水介質(zhì)中紅細(xì)胞上的抗原決定族與相應(yīng)抗體分子上的抗原結(jié)合位點(diǎn)結(jié)合,交叉連接形成肉眼可見的凝集塊。鹽水介質(zhì)凝集試驗(yàn)用于IGM抗體的檢出、鑒定、鹽水配血試驗(yàn)以及用鹽水抗體鑒定的血型抗原,如ABO、MN、P等血型系統(tǒng)的抗原。當(dāng)IGG抗A、抗B的濃度足夠大時(shí),在鹽水介質(zhì)里也能與相應(yīng)的紅細(xì)胞發(fā)生凝集反應(yīng)。
鹽水法只能檢出不相配合完全抗體,不能檢出不相配合的不完全抗體[4]。
凝聚胺交叉配血法的原理:凝聚胺分子是帶高價(jià)陽(yáng)離子多聚季銨鹽,溶解后帶有很多正電荷可以中和紅細(xì)胞表面負(fù)電荷,有利于紅細(xì)胞凝聚,低離子強(qiáng)度溶液也能降低紅細(xì)胞的Zeta電位,可進(jìn)一步增加抗原抗體間的吸引力。當(dāng)血清中存在IGM或IGG類血型抗體時(shí),與紅細(xì)胞發(fā)生緊密結(jié)合,此時(shí)加入枸櫞酸鹽解聚液以消除聚凝胺的正電荷,使IGM或IGG類血型抗體與紅細(xì)胞產(chǎn)生的凝集不散開;如果血清中不存在IGM或IGG類血型抗體,加入解聚液可使非特異性凝集消失[5]。
該法提高了凝集反應(yīng)的速度,使原來在鹽水介質(zhì)中不能凝集RBC的抗體發(fā)生凝集,提高反應(yīng)靈敏度。用此法可以檢查出能引起溶血性輸血反應(yīng)的幾乎所有規(guī)則與不規(guī)則抗體,適合于各類輸血病人的配血,目前此法已被廣泛應(yīng)用,在一定程度上取代了傳統(tǒng)的鹽水測(cè)定法[6]。
通過17例標(biāo)本血清抗體效價(jià)的測(cè)定,凝聚胺法的靈敏度較鹽水法的靈敏度高1-5個(gè)滴度。凝聚胺法的檢出率為70.6%,鹽水介質(zhì)配血法的檢出率為52.9%,兩組對(duì)比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P
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方法:尿分析儀法使用優(yōu)利特-300B型尿液分析儀及配套試紙條。尿沉渣鏡檢法按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》操作。
結(jié)果:2817例尿液標(biāo)本經(jīng)尿分析儀和尿沉渣鏡檢檢查結(jié)果均異常,即過篩實(shí)驗(yàn)正確的例數(shù)為1180例,陽(yáng)性率為42%。尿分析儀正常,尿沉渣鏡檢異常,即假陰性408例,假陰性率為14.48%;尿分析儀異常,尿沉渣鏡檢正常,即假陽(yáng)性314例,假陽(yáng)性率為11.15%。
結(jié)論:尿沉渣鏡檢法是診斷腎臟,泌尿系統(tǒng)相關(guān)疾病的重要指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)室工作人員要認(rèn)真對(duì)待,提高檢驗(yàn)基本技能,降低漏檢率,為臨床診斷提供科學(xué)準(zhǔn)確的依據(jù)。
關(guān)鍵詞:尿液分析儀法 尿沉渣鏡檢法 漏檢率
【中圖分類號(hào)】R9 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801(2013)10-0579-01
文章選取筆者所在醫(yī)院2010年2月至2013年6月2817例門診患者尿液標(biāo)本經(jīng)優(yōu)力特-300B型尿液分析儀測(cè)定和尿沉渣鏡檢后,二者結(jié)果作回顧性分析,現(xiàn)總結(jié)報(bào)道如下。
1 材料與方法
1.1 標(biāo)本收集。用一次性潔凈尿杯收集門診患者新鮮中段尿液,1h內(nèi)完成常規(guī)檢查,并及時(shí)準(zhǔn)確的記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
1.2 儀器及試劑。
1.2.1 尿分析儀法。使用優(yōu)利特-300B型尿十一項(xiàng)分析儀及配套試劑帶,嚴(yán)格按儀器及試劑帶操作規(guī)程操作。
1.2.2 尿沉渣鏡檢法。按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》操作,準(zhǔn)確量取10ml尿液置于離心管內(nèi),1500r/min,離心5min,棄去上清液,取0.2ml沉淀物充分混勻后置于玻片上,于顯微鏡下檢測(cè)。先在低倍鏡下觀察全片,后在高倍鏡下仔細(xì)計(jì)數(shù)每一個(gè)視野下WBC、RBC的數(shù)量,一般計(jì)數(shù)10個(gè)視野即可,尿蛋白用10g/dl的磺基水楊酸測(cè)定。
1.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)[1]。把紅細(xì)胞大于0~3/HP,白細(xì)胞大于0~3/HP作為尿沉渣鏡檢法的陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn);把紅細(xì)胞≥10/μL,白細(xì)胞≥25/μL,蛋白≥0.25g/L作為尿分析儀法陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)。如果尿分析儀結(jié)果和相應(yīng)的鏡檢結(jié)果都異常,就認(rèn)為同一份結(jié)果沒有差異,過篩實(shí)驗(yàn)正常;反之,如果尿分析儀結(jié)果正常,而相應(yīng)的鏡檢結(jié)果異常,便把此視為假陰性;如果尿分析儀結(jié)果異常,而相應(yīng)的鏡檢結(jié)果正常,把此視為假陽(yáng)性。
2 結(jié)果
對(duì)2817例門診患者新鮮中段尿液進(jìn)行常規(guī)檢查,分別用尿分析儀法,尿沉渣鏡檢法同時(shí)測(cè)定,二者結(jié)果都異常即過篩實(shí)驗(yàn)正確的例數(shù)為1180例,陽(yáng)性率為42%;尿分析儀結(jié)果異常,尿沉渣鏡檢結(jié)果正常,即假陽(yáng)性為314例,假陽(yáng)性率為11.15%;尿分析儀正常,而尿沉渣鏡檢異常,即假陰性為408例,假陰性率為14.48%。2817例尿沉渣鏡檢中發(fā)現(xiàn)管型40例,滴蟲20例,霉菌18例。尿分析儀檢查中膽紅質(zhì)1+及以上者共8例,尿膽原1+及以上者共26例,酮體1+及以上者共40例,尿糖1+及以上者共84例,亞硝酸鹽還原試驗(yàn)陽(yáng)性者共14例。2817例中BLD,WBC,PRO的假陰性率分別為1.37%,7.21%,4.12%。單純BLD≥10/μL1427例中,有244例鏡檢紅細(xì)胞正常,假陽(yáng)性率為17.1%;單純WBC≥25μL有488例,為鏡檢白細(xì)胞正常的10倍,假陽(yáng)性率為10.0%;單純PRO≥0.25g/L有160例,使用磺基水楊酸法檢測(cè)19例正常,假陽(yáng)性率為11.9%。其中,有159例PRO與WBC兩項(xiàng)指標(biāo)均異常,有235例WBC與BLD兩項(xiàng)指標(biāo)均異常,有169例的BLD與PRO兩項(xiàng)指標(biāo)異常,有122例PRO與WBC及BLD三項(xiàng)指標(biāo)均異常。
3 討論
本實(shí)驗(yàn)中2817例尿液標(biāo)本中單純WBC,RBC,PRO陽(yáng)性者都在一定程度上存在著不同程度的假陽(yáng)性,而結(jié)果中有兩項(xiàng)或三項(xiàng)指標(biāo)異常者,假陽(yáng)性的結(jié)果幾乎沒有。本研究中假陰性率結(jié)果高達(dá)14.48%,故實(shí)驗(yàn)人員普遍認(rèn)為尿沉渣鏡檢非常重要,每個(gè)標(biāo)本都需要做鏡檢。尿液用試紙條檢測(cè)的結(jié)果常受尿液中藥物因素的干擾,如臨床用大劑量青霉素,常導(dǎo)致試紙條對(duì)尿蛋白的檢測(cè)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。尿液中維生素C濃度過高會(huì)對(duì)尿液隱血、尿糖、亞硝酸鹽的試紙條測(cè)試產(chǎn)生負(fù)干擾,導(dǎo)致假陰性的結(jié)果。大量食入含大量色素的蔬菜、水果,如:橘子、橙子、筧菜等也會(huì)產(chǎn)生尿膽紅素致假陽(yáng)性[2]。由此可見尿沉渣鏡檢結(jié)合認(rèn)真詢問病史,必要時(shí)與臨床醫(yī)師及時(shí)溝通就能發(fā)現(xiàn)和糾正尿液分析儀檢測(cè)報(bào)告中的一些錯(cuò)誤結(jié)果。尿液分析儀檢測(cè)易受到儀器的穩(wěn)定性、靈敏度及試紙條質(zhì)量等因素的影響[3],如BLD的檢測(cè)是利用過氧化物酶的活性,氧化還原而顯色的,而顯微鏡鏡檢必須有完整的紅細(xì)胞,才能檢測(cè)到。所以當(dāng)尿液中的紅細(xì)胞破裂時(shí),尿液分析儀可以檢測(cè)到尿液中的血紅蛋白,這也給解釋了為什么運(yùn)動(dòng)后體檢會(huì)異常。研究還發(fā)現(xiàn)尿液污染后細(xì)菌能釋放過氧化物酶等活性物質(zhì),也可能由于細(xì)菌代謝繁殖過程中合成了觸酶,過氧化物酶而使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性[4]。如發(fā)現(xiàn)亮氨酸、酪氨酸結(jié)晶,腫瘤細(xì)胞或寄生蟲(如絲蟲,陰道滴蟲)則更有診斷價(jià)值。由于上皮細(xì)胞中含有與粒細(xì)胞相似的吲哚酶,吲哚酶最終導(dǎo)致了分析儀檢測(cè)尿液中WBC結(jié)果呈假陽(yáng)性。送檢尿液必須為中段尿,留取尿液標(biāo)本必須及時(shí)送檢。這一點(diǎn)檢驗(yàn)人員必須與患者及家屬甚至病區(qū)工勤人員講清楚,因?yàn)樽≡夯颊叩哪蛞憾嘤刹^(qū)工勤人員直接送到檢驗(yàn)科檢查。尿蛋白檢測(cè)的常用方法是蛋白誤差法,尿液pH值對(duì)此法的影響很大,當(dāng)尿液pH>8時(shí),易出現(xiàn)假陽(yáng)性,當(dāng)pH
參考文獻(xiàn)
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抗生素的誕生和發(fā)展與科學(xué)家們前赴后繼的探索密不可分。17世紀(jì),荷蘭顯微鏡學(xué)家列文虎克首次通過自制的顯微鏡觀察微生物世界;20世紀(jì)40年代,抗生素之父塞爾曼?瓦克斯曼及其團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)鏈霉素,拯救了數(shù)百萬(wàn)肺結(jié)核和其他疾病患者的生命;而今天,人類已經(jīng)生產(chǎn)出了高效的抗菌藥物――廣譜抗生素??股氐陌l(fā)現(xiàn)拯救了無(wú)數(shù)生命,它是醫(yī)學(xué)對(duì)人類的最大貢獻(xiàn)之一。
微生物與疾病的聯(lián)系
荷蘭人列文虎克是世界上第一個(gè)觀察到細(xì)菌和單細(xì)胞生物組成的微生物世界的人,被公認(rèn)為“微生物學(xué)之父”。1670年左右,他用自制的顯微鏡發(fā)現(xiàn)了微生物。列文虎克曾是荷蘭著名的綢布商人,盡管缺少正規(guī)的科學(xué)訓(xùn)練,但他在1668年左右,對(duì)布商用來檢驗(yàn)布匹質(zhì)量的放大鏡產(chǎn)生了及其濃厚的興趣,并且開始將磨制透鏡作為自己的一項(xiàng)愛好。之后,他把磨制的透鏡放在銅版的一個(gè)小孔上,組裝了自己的第一臺(tái)顯微鏡。勤勞加上天賦,他磨的透鏡越來越好,透鏡放大的倍數(shù)也越來越高。他一生共磨出了近250塊這樣的玻璃鏡片。
大約在1670年,列文虎克使用自己磨制的一塊透鏡,觀察到了微生物。他和英國(guó)皇家學(xué)會(huì)取得了聯(lián)系,通過數(shù)百封信件陸陸續(xù)續(xù)地將自己的發(fā)現(xiàn)報(bào)告給這個(gè)學(xué)會(huì),他的很多發(fā)現(xiàn)都被發(fā)表在《皇家學(xué)會(huì)哲學(xué)學(xué)報(bào)》上。1673年,英國(guó)皇家學(xué)會(huì)發(fā)表了他用顯微鏡觀察到的蜜蜂的口器和蜇刺。1680年,列文虎克被選為該學(xué)會(huì)的會(huì)員。
1822年,法國(guó)化學(xué)家路易?巴斯德出生在法國(guó)東部小城多勒。1855年,他開始了具有劃時(shí)代意義的發(fā)酵研究。他用試驗(yàn)表明,牛奶變質(zhì)是因?yàn)榕D讨挟a(chǎn)生了乳酸。他提出假設(shè):這是由于牛奶中有微生物。巴斯德對(duì)紅酒發(fā)酵和變酸的實(shí)驗(yàn)研究表明,酵母菌的存在,使得葡萄中的糖分分解成了酒精。盡管同時(shí)代的化學(xué)家嘲笑他的研究,但是他關(guān)于微生物世界的這些見解后來被證明都是正確的。
路易?巴斯德也是第一位用實(shí)驗(yàn)表明傳染病是由微生物造成的科學(xué)家。到了1862年,巴斯德通過不斷地實(shí)驗(yàn),斷言微生物是發(fā)酵和腐敗的“元兇”。在提出這一著名理論的同時(shí),他還補(bǔ)充道:“關(guān)于微生物的研究給我們提供了很多的實(shí)例,表明動(dòng)物和植物疾病與細(xì)菌之間有某種聯(lián)系。毫無(wú)疑問,這將會(huì)是我們對(duì)談之色變的傳染病進(jìn)行更深入研究的第一步?!甭芬?巴斯德還是第一個(gè)表明微生物可以通過空氣傳播的科學(xué)家。他說:“經(jīng)過高溫消毒的有機(jī)物一旦接觸空氣,這種有機(jī)物就會(huì)開始腐敗變質(zhì),這都是空氣中的微生物造成的。”
這個(gè)論斷成了巴斯德提出的著名的“病原菌學(xué)說”的基礎(chǔ),這個(gè)學(xué)說認(rèn)為,傳染病是由微生物引起的。
德國(guó)醫(yī)學(xué)家和細(xì)菌學(xué)家羅伯特?科赫成功地從奶牛身上分離出了導(dǎo)致炭疽熱的炭疽桿菌,這一發(fā)現(xiàn)促使巴斯德提出一個(gè)更加大膽的設(shè)想,并且急于在實(shí)驗(yàn)中加以證明。巴斯德本人對(duì)炭疽桿菌也極感興趣,因?yàn)槿槠樊a(chǎn)業(yè)曾在法國(guó)經(jīng)濟(jì)中占有重要地位。他讓四頭奶牛感染炭疽熱,然后讓獸醫(yī)對(duì)其中的兩頭注射炭疽疫苗。然而,注射過疫苗的奶牛,一頭存活一頭死亡;另外兩頭未注射疫苗的奶牛也是一頭死亡,一頭存活。這讓對(duì)疫苗滿懷期待的巴斯德心灰意冷,稱這次實(shí)驗(yàn)中他設(shè)計(jì)的“治療方法沒有任何效果”。在幾乎就要放棄實(shí)驗(yàn),承認(rèn)失敗的時(shí)候,巴斯德又想到了一個(gè)新的實(shí)驗(yàn)方式。他從炭疽熱病牛體內(nèi)提取了最具活性的炭疽桿菌,并將這種桿菌注射進(jìn)兩頭存活下來的奶牛體內(nèi),注射的劑量完全足以使健康的奶牛致命。然后他等待觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果,令人吃驚的是,兩頭奶牛都安然無(wú)恙。
在成功地實(shí)現(xiàn)了牛炭疽熱疫苗接種后,他還用同樣的方法實(shí)現(xiàn)了雞霍亂的疫苗接種,注射疫苗的雞也全部存活了下來。在設(shè)計(jì)這個(gè)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,他將足以致命的鮮活霍亂病菌涂在面包上,并將面包喂給雞雛吃,雞吃后并不會(huì)患霍亂。在研究炭疽疫苗和雞霍亂的疫苗的過程中,巴斯德都采用了英國(guó)醫(yī)生愛德華?詹納治療天花的牛痘接種方法的原則,并且都取得了成功。他甚至分離并培養(yǎng)了狂犬病疫苗,在眾多被瘋狼咬傷的沙俄貧農(nóng)身上進(jìn)行試驗(yàn),除了19例沒有取得成功外,其他的人都轉(zhuǎn)危為安。為表彰他的功勞,俄國(guó)沙皇授予他圣安妮十字勛章,并獎(jiǎng)勵(lì)他十萬(wàn)法郎,用于建立巴斯德研究所。這個(gè)研究所1888年正式開放,是世界上首個(gè)專門致力于微生物研究的實(shí)驗(yàn)室。
漸漸地,巴斯德的研究得到越來越多的人認(rèn)可。醫(yī)學(xué)界因此也能按照他的研究,將一種疾病的起因與某種微生物聯(lián)系起來,而尋找治療的藥物因此也有了可能。疫苗的開發(fā),使得人體自然防御機(jī)制得到增強(qiáng),進(jìn)而抵御疾病的侵襲。巴斯德晚年的一個(gè)宏大愿景就是為每種疾病找到有效的疫苗。
不期而遇的奇跡:發(fā)現(xiàn)青霉素
1928年8月底,在結(jié)束休假返回倫敦圣瑪麗醫(yī)院工作后,英國(guó)科學(xué)家亞歷山大?弗萊明發(fā)現(xiàn),自己實(shí)驗(yàn)室中的培養(yǎng)皿里長(zhǎng)出了一些奇怪的東西。他的同事墨林?普萊斯走進(jìn)他的實(shí)驗(yàn)室,和剛剛度假回來的弗萊明打招呼,順便詢問研究進(jìn)展。弗萊明順手遞給普萊斯一個(gè)盆子,后者發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)皿底部布滿了黃色的葡萄球菌,而葡萄球菌上則長(zhǎng)滿了毛茸茸、藍(lán)綠色的真菌一樣的菌絲。當(dāng)弗萊明仔細(xì)觀察時(shí),他發(fā)現(xiàn)菌絲四周沒有任何的活的細(xì)菌,只有死亡的細(xì)胞。
1929年,亞歷山大?弗萊明把自己的這個(gè)菌絲汁液稱為“盤尼西林”,因?yàn)檫@種汁液是從紅色青霉(Penicillium rubrum)的菌絲中提取的。他開始了試驗(yàn)這種神奇的霉菌,發(fā)現(xiàn)它不僅能殺死葡萄球菌,還能殺死造成鏈球菌感染、肺炎、梅毒、淋病、氣性壞蛆、腦膜炎和白喉的致病菌。更讓人驚奇的是,這種霉菌對(duì)人體沒有毒性。他請(qǐng)教同事拉圖什,這位同事將其描述為紅色青霉(Penicillium rubrum)。幾年之后,這種霉菌被定名為特異青霉(Penicillium notatum)。
弗萊明原本是想要在自己的實(shí)驗(yàn)中尋找能夠抗菌的溶菌酶。因此,人類發(fā)現(xiàn)青霉素,完全可以說是一個(gè)幸運(yùn)的意外。不過,他充分認(rèn)識(shí)到自己這個(gè)發(fā)現(xiàn)的重大價(jià)值。他把接下去的一年時(shí)間都用在尋找有這種霉菌的樣本上,這些樣本五花八門,包括舊書籍,繪畫作品,奶酪,面包和果醬,目的就是為了更深入了解這種霉菌的抗菌效果。他甚至問朋友有沒有長(zhǎng)時(shí)間扔在一邊不用、已經(jīng)發(fā)霉的臭鞋子。1929年2月,他把自己發(fā)現(xiàn)的這種霉菌汁液命名為青霉素(盤尼西林,Penicillin)。
盡管弗萊明是青霉素的發(fā)現(xiàn)者,但是他并不是化學(xué)家,而青霉素的任何醫(yī)療應(yīng)用,還必須首先對(duì)這種霉菌進(jìn)行分離、凝縮,并進(jìn)行化學(xué)提純。另外由于天然狀態(tài)下的青霉菌一周之后就會(huì)死亡,因此必須采取措施確保其穩(wěn)定性。1938年,劍橋大學(xué)的科學(xué)家霍華德?佛羅里和恩斯特?錢恩攻克了這一難題,并試制出了純度極高、晶體狀的青霉素,濃度達(dá)到了弗萊明最初樣本的四萬(wàn)倍以上。
1941年,佛羅里獲得了美國(guó)科研機(jī)構(gòu)和制藥公司的資助,開始大規(guī)模生產(chǎn)青霉素,這些青霉素在二戰(zhàn)中發(fā)揮了重要作用。自從佛羅里從青霉菌中提純青霉素開始,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)了許多類似青霉素的其他抗生素,這些抗生素的發(fā)現(xiàn)使得細(xì)菌感染在二十世紀(jì)下半葉極大地降低了。1945年,瑞典皇家科學(xué)院將諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)?lì)C發(fā)給了弗萊明、錢恩和佛羅里,以表彰他們?cè)谇嗝顾匕l(fā)現(xiàn)和應(yīng)用過程中的貢獻(xiàn)。
神奇藥物:百浪多息
1936年11月,美國(guó)總統(tǒng)羅斯福的公子患上了鏈球菌咽喉炎和急性鼻竇炎。醫(yī)生甚至推測(cè)他可能得了溶血性鏈球菌感染,而這種細(xì)菌感染一旦進(jìn)入血液,病人就將時(shí)刻有生命危險(xiǎn)。他的醫(yī)生小托比給小羅斯福注射了一針百浪多息(Prontosil),一種又稱為磺胺柯衣定的全新藥物,外加讓其口服普羅脫林(Protolyn),一種口服性的百浪多息。小羅斯福竟然奇跡般地康復(fù),連《紐約時(shí)報(bào)》都在當(dāng)年12月17日拋出頭條,盛贊這一挽救了總統(tǒng)小兒子姓名的“神奇藥物”。這一事件,以及之后媒體連篇累牘地報(bào)道,使得美國(guó)掀起了一場(chǎng)持久不衰的磺胺類藥物熱。
1935年,德國(guó)病理學(xué)家和細(xì)菌學(xué)家格哈德?多馬克發(fā)明了百浪多息,開啟了磺胺類藥物的未來。百浪多息,作為磺胺類藥品中的第一種藥物,是多馬克合成的。不過,它首先并不是作為抗生素使用,而是作為工業(yè)染料使用。在20世紀(jì)30年代,格哈德?多馬克是法本化學(xué)工業(yè)股份公司巴伐利亞實(shí)驗(yàn)病理學(xué)研究所所長(zhǎng)。他決心生產(chǎn)出一種能夠在殺死病菌的同時(shí)又不會(huì)對(duì)病人產(chǎn)生副作用的抗生素藥物。多馬克對(duì)能夠使細(xì)菌著色并吸附在細(xì)菌表面上的染料非常感興趣。逐漸地,他對(duì)偶氮染料產(chǎn)生了異常濃厚的興趣。在他的實(shí)驗(yàn)中,他首先測(cè)試了一種紅色染料對(duì)鏈球菌的效果。鏈球菌能造成猩紅熱、風(fēng)濕熱、鏈球菌性咽喉炎和肺炎。他將鏈球菌注入實(shí)驗(yàn)白鼠體內(nèi),然后對(duì)白鼠注射紅色染料。結(jié)果發(fā)現(xiàn),這種紅色染料對(duì)白鼠產(chǎn)生的非洲睡眠病似乎有效果。不過,這種染料對(duì)人體的鏈球菌感染效果非常有限。在經(jīng)過上千次失敗的實(shí)驗(yàn)后,1932年10月初,多馬克的同事約瑟夫?克拉雷爾將含硫的側(cè)鏈合成在染料上。這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)立刻取得了成功,含硫側(cè)鏈和染料合成后,立即改變了后者的效果,原來不穩(wěn)定甚至無(wú)效的藥品立刻成了高效的抗鏈球菌藥物。
就這這段時(shí)間,多馬克的小女兒患上了嚴(yán)重的鏈球菌感染,情急之下,他給女兒注射了一劑還從未在人體身上臨床試驗(yàn)過的百浪多息。他女兒奇跡般地康復(fù)了。在關(guān)于這種藥物藥效的報(bào)告中,多馬克并未提及自己在女兒身上的成功試驗(yàn)。一直到1935年,當(dāng)其他醫(yī)生在其他病人身上進(jìn)行這種藥物的臨床試驗(yàn)并取得成功后,他才公布了自己在女兒身上進(jìn)行的藥物試驗(yàn)。隨著百浪多息以及其他磺胺類藥物的發(fā)現(xiàn),醫(yī)學(xué)界又多了一件對(duì)付傳染性疾病的有效武器。
11號(hào)實(shí)驗(yàn)――鏈霉素的發(fā)現(xiàn)
1943年,烏克蘭裔美國(guó)化學(xué)家、土壤微生物學(xué)家塞耳曼?瓦克斯曼開始尋找一種化學(xué)物質(zhì),希望能借此殺滅結(jié)核分歧桿菌。這種病菌是當(dāng)時(shí)死亡率幾乎百分之百的肺結(jié)核的元兇。他已經(jīng)成功地找到了鏈絲菌,一種在實(shí)驗(yàn)中能有效殺滅革蘭氏陰性菌的細(xì)菌,而一般的磺胺類藥物和青霉素對(duì)革蘭氏陰性菌都是無(wú)效的。這一發(fā)現(xiàn)能幫助人類醫(yī)治諸如傷寒,兔熱癥,波狀熱等的疾病,這些疾病在此之前沒有任何藥物可以治療。
疫苗和此前的抗生素治療對(duì)付肺結(jié)核無(wú)效,是因?yàn)檫@些治療手段無(wú)法溶解結(jié)核桿菌的蠟質(zhì)莢膜。許多科學(xué)家,包括瓦克斯曼和他的研究團(tuán)隊(duì),都一度開始質(zhì)疑,他們是否真的能發(fā)明一種能穿透這種蠟質(zhì)莢膜并且發(fā)揮藥效的藥物。
1943年,瓦克斯曼和他的研究團(tuán)隊(duì)在新澤西的實(shí)驗(yàn)室中成功地找到了可以治療肺結(jié)核的鏈霉素。他帶領(lǐng)研究團(tuán)隊(duì),從土壤中上萬(wàn)種的微生物中找到了兩種能殺滅結(jié)核桿菌的放射菌,他將它命名為灰色鏈霉菌。一種是在泥土中找到的,另一種則是在實(shí)驗(yàn)室活禽培養(yǎng)部門的一只小雞的喉嚨中提取到的。這兩種鏈霉菌對(duì)許多革蘭氏陰性菌都有明顯的抵抗作用。革蘭氏陰性菌可以導(dǎo)致痢疾、輕度肺炎、波狀熱、百日咳、桿菌性痢疾、野兔病、禽傷寒等疾病。更重要的是,這兩種鏈霉菌都對(duì)肺結(jié)核菌有著明顯的治療效果。
瓦克斯曼博士和他的團(tuán)隊(duì),包括從二戰(zhàn)戰(zhàn)場(chǎng)剛剛回來的年輕科學(xué)家阿爾伯特?薩茲,開始不斷地培養(yǎng)這兩種細(xì)菌,并展開試驗(yàn)。在自己的地下實(shí)驗(yàn)室中,薩茲夜以繼日,實(shí)驗(yàn)室燒瓶咝咝冒著氣,瓶中液體泡沫涌動(dòng)。通過不懈努力,他終于成功地分離出了10克晶末,并把它提供給了美國(guó)梅奧醫(yī)學(xué)中心的威廉?費(fèi)爾德曼醫(yī)生,這就是鏈霉素的最早分離。
他讓蒸餾瓶24小時(shí)蒸餾,自己則睡在了實(shí)驗(yàn)室的地板上。他甚至和實(shí)驗(yàn)室的守夜人商量,如果守衛(wèi)發(fā)現(xiàn)他睡覺,而燒瓶中的液體已經(jīng)蒸發(fā)至瓶體紅色線以下,守衛(wèi)就要叫醒他。與這種曾經(jīng)殺死過數(shù)百萬(wàn)人的病菌打交道極其危險(xiǎn),甚至有生命危險(xiǎn)。薩茲采取了當(dāng)時(shí)所有可能的預(yù)防措施,據(jù)研究團(tuán)隊(duì)的另一名研究人員多麗絲?瓊斯回憶,薩茲在結(jié)束一天的工作后,甚至使用有消毒殺菌作用的消毒水漱口。工作的時(shí)候,他必須時(shí)刻與肺結(jié)核桿菌為伍,而那個(gè)時(shí)候并沒有任何的治療方法。
關(guān)于誰(shuí)應(yīng)該獲得“鏈霉素發(fā)現(xiàn)者”這個(gè)稱號(hào),學(xué)界存有爭(zhēng)議。毋庸置疑,瓦克斯曼是發(fā)現(xiàn)這一抗生素的團(tuán)隊(duì)的領(lǐng)導(dǎo)者,但是據(jù)薩茲的說法,瓦克斯曼從未踏入這個(gè)地下實(shí)驗(yàn)室一步,而且還親口告訴薩茲無(wú)論如何不要將菌體帶到樓上去。薩茲提取了足夠多的鏈霉素,并且將其中的10克送到了當(dāng)時(shí)的梅奧醫(yī)學(xué)中心。據(jù)薩茲的1943年8月23日的實(shí)驗(yàn)日志記載,“11號(hào)實(shí)驗(yàn), 拮抗性放線菌”,用這個(gè)詞描述這種從土壤中發(fā)現(xiàn)的線狀的、能產(chǎn)生抗生素的微生物,聽來有點(diǎn)怪異。接下去的幾頁(yè)日志詳細(xì)記載了有關(guān)的實(shí)驗(yàn),以及他發(fā)現(xiàn)的兩株灰綠色放線菌,他自己把他們命名為“灰色鏈霉菌”。每株菌體都產(chǎn)生出了一種抗生素,并能殺死一個(gè)皮氏培養(yǎng)皿中的大腸桿菌。而且,他還發(fā)現(xiàn),這種菌體產(chǎn)生的抗生素還能殺死結(jié)核細(xì)菌。按照這一日記的記載,發(fā)現(xiàn)鏈霉素的應(yīng)該是薩茲博士。
1944年1月,鏈霉素的發(fā)現(xiàn)被公之于眾。兩個(gè)月后,一批鏈霉素被送到了梅奧醫(yī)學(xué)中心,威廉?費(fèi)爾德曼和H.考文?欣紹醫(yī)生開始在白鼠身上使用鏈霉素的臨床試驗(yàn)。今天看來,這項(xiàng)試驗(yàn)具有影響跨時(shí)代的歷史意義。1944年底前,這兩位醫(yī)生通過臨床證明,這種抗生素對(duì)殺滅實(shí)驗(yàn)白鼠身上的結(jié)核菌有很好的效果。
到了1946年,美國(guó)國(guó)家研究委員會(huì)化學(xué)療法小組委員會(huì)了一項(xiàng)報(bào)告,報(bào)告了鏈霉素在最初1000個(gè)病人身上的臨床報(bào)告,而美國(guó)的醫(yī)藥公司此時(shí)已經(jīng)達(dá)到了年產(chǎn)鏈霉素兩噸的生產(chǎn)能力。鏈霉素治療革蘭氏陰性菌(如結(jié)核桿菌)的巨大成功打消了人們關(guān)于抗生素有效性的全部疑慮。青霉素可能引領(lǐng)人類進(jìn)入了抗生素時(shí)代,而鏈霉素的發(fā)現(xiàn)則刺激了全球范圍內(nèi)尋找由微生物產(chǎn)生的化學(xué)治療藥物的熱情。
廣譜抗生素
到了1950年代,科學(xué)家仍然孜孜不倦地尋找效果更好、威力更大的抗生素。其中就包括了新發(fā)現(xiàn)的金霉素,土霉素。這些抗生素殺菌效果特別好,因?yàn)楸绕鹬暗目股?,它們能有效殺滅更多種類的細(xì)菌。醫(yī)生和科學(xué)家把這些新型抗生素稱為廣譜抗生素。勞埃德?科諾菲爾是美國(guó)輝瑞制藥的一名化學(xué)家,他發(fā)現(xiàn)金霉素和土霉素的中心有著相同的分子結(jié)構(gòu)。他把這個(gè)中心分子結(jié)構(gòu)稱為四環(huán)素,而輝瑞制藥也于1955年申請(qǐng)了四環(huán)素的專利。這一發(fā)現(xiàn)又導(dǎo)致了一系列以四環(huán)素為中心分子結(jié)構(gòu)的全新抗生素族類的出現(xiàn)。
科學(xué)家們還發(fā)現(xiàn)青霉素也有一個(gè)中心分子結(jié)構(gòu),他們稱之為已內(nèi)酰胺。通過固定中間的已內(nèi)酰胺分子,并改變青霉素大分子的其他部分,他們生產(chǎn)出了全新的抗生素,如氨芐青霉素(氨芐西林)、羥氨芐青霉素(阿莫西林),這些新合成的青霉素能更好地治療更廣范圍的感染。緊隨青霉素之后,科學(xué)家又相繼發(fā)現(xiàn)了頭孢菌素類、碳青霉烯類和單環(huán)類青霉素。
事實(shí)上,頭孢菌素化合物是由意大利科學(xué)家博茲(Giuseppe Brotzu)于1940年現(xiàn)的,當(dāng)時(shí)他發(fā)現(xiàn)意大利撒丁島首府卡利亞里一個(gè)污水排水口附近的海水會(huì)周期性地潔凈。他推測(cè)是污水中的某種微生物產(chǎn)生了一種抑制性的化合物,從而潔凈了水體。他后來將這種微生物命名為頭孢菌素C,并證明它能生成一種抑制細(xì)菌生成的物質(zhì)。早期的頭孢菌素就是從這種菌體生成的物質(zhì)合成的。
抗生素的未來
毋庸置疑,抗生素的發(fā)現(xiàn)挽救了數(shù)百萬(wàn)人的生命,但是有個(gè)問題也隨之而來:當(dāng)抗生素面對(duì)產(chǎn)生抗藥性的細(xì)菌不再起作用的時(shí)候,人類怎么辦?一個(gè)讓人惶惶不安的事實(shí)是,目前人類不得不面對(duì)諸如耐甲氧西林金葡菌和對(duì)多種藥物產(chǎn)生抗藥性的腸桿菌科這類可怕的致病菌。這也提醒人類一個(gè)不得不面對(duì)的事實(shí),細(xì)菌非?!奥斆鳌?,并且能很快地適應(yīng)醫(yī)生開出的處方中給病人服用的抗生素藥物。醫(yī)生把現(xiàn)代醫(yī)學(xué)開發(fā)新藥試圖解決病菌越來越強(qiáng)大的抗藥性的努力比喻為“伸出一個(gè)手指堵住大堤上的一個(gè)漏洞,卻發(fā)現(xiàn)更大的洪水又從其他更大的漏洞沖了出來” 。
要解決越來越嚴(yán)重的抗藥性問題,方法無(wú)非有二,一是開發(fā)全新的抗生素,二是采取全新的方法應(yīng)對(duì)病菌感染問題。
科學(xué)家們當(dāng)然未放棄尋找新的治療藥物。從各類抗生素發(fā)現(xiàn)的情況看,除了甲氨芐啶,其他的主要抗生素的發(fā)現(xiàn)完全是運(yùn)氣使然:顯示發(fā)現(xiàn)藥物,然后才確定藥物作用的目標(biāo)細(xì)菌。很多的制藥公司在尋找新藥物方面仍然遵循著這一模式,并在公司內(nèi)保留著自然產(chǎn)品部門,并由該部門負(fù)責(zé)收集全球各地的土壤樣品,測(cè)試包括抗菌性的各類重要性狀。這種做法邏輯的前提是,至今為止,從自然界提取的抗生素,仍是人類制造出來的效果最好的抗生素藥物的基礎(chǔ)。
實(shí)驗(yàn)室管理水平尚有欠缺開放性實(shí)驗(yàn)室是一種全新實(shí)驗(yàn)室建設(shè)模式,其管理工作涉及的范圍更廣,要求更高。目前存在的主要問題是管理工作不夠到位、登記制度執(zhí)行力度不夠以及有關(guān)文檔和技術(shù)資料收集不完全等不足,導(dǎo)致對(duì)本科生缺乏有效的監(jiān)控管理。
實(shí)驗(yàn)室重要性認(rèn)識(shí)不足1.開放性實(shí)驗(yàn)室的重要性認(rèn)識(shí)不足。開放性實(shí)驗(yàn)室重要性的認(rèn)識(shí)主要存在兩個(gè)誤區(qū):一是認(rèn)為只要讓學(xué)生有場(chǎng)所進(jìn)行相關(guān)的測(cè)試與檢測(cè)就足夠了;二是開放后增加了許多管理工作量和設(shè)備維護(hù)數(shù)量,大大提高管理的難度和復(fù)雜性,實(shí)驗(yàn)中心教師存抵觸心理。2.學(xué)生及時(shí)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室開展研究的作用認(rèn)識(shí)不夠充分。預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)的畢業(yè)實(shí)習(xí)需要對(duì)具體樣品進(jìn)行檢測(cè)和分析,驗(yàn)證課題設(shè)計(jì)所提出的問題,并根據(jù)分析和研究的結(jié)果總結(jié)出畢業(yè)論文的基本觀點(diǎn),這需要一個(gè)具體的研究過程。學(xué)生依據(jù)自己所選的研究方向和指導(dǎo)老師的具體要求選擇是否進(jìn)入開放性實(shí)驗(yàn)室。目前,在畢業(yè)實(shí)習(xí)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣的情況,一方面專業(yè)指導(dǎo)教師有時(shí)會(huì)抱怨實(shí)驗(yàn)中心提供的實(shí)驗(yàn)條件不足;另一方面是學(xué)生不良的就業(yè)心態(tài),放松了對(duì)本科生畢業(yè)實(shí)習(xí)過程的重視,等臨近提交論文時(shí)間,學(xué)生草草應(yīng)付了事,甚至出現(xiàn)畢業(yè)論文不符合基本要求的現(xiàn)象。
以開放性實(shí)驗(yàn)室為平臺(tái)指導(dǎo)畢業(yè)實(shí)習(xí)的具體改進(jìn)措施
(一)提高實(shí)驗(yàn)教師的專業(yè)水平、服務(wù)意識(shí)以及管理能力,保證實(shí)驗(yàn)室的開放質(zhì)量實(shí)驗(yàn)室的開放不僅是一個(gè)時(shí)間和空間開放的問題,而是一種管理模式的改革與創(chuàng)新[4]。預(yù)防醫(yī)學(xué)開放性實(shí)驗(yàn)室建立后,對(duì)實(shí)驗(yàn)教師的思想素質(zhì)和業(yè)務(wù)水平提出了更高的要求,實(shí)驗(yàn)教師能否勝任關(guān)系到開放性實(shí)驗(yàn)室的具體工作是否能順利開展。開放性實(shí)驗(yàn)是學(xué)生以自身興趣和學(xué)習(xí)中的思考為出發(fā)點(diǎn)的自主實(shí)驗(yàn),進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)后再進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室開展具體實(shí)驗(yàn)。在開放性實(shí)驗(yàn)中,學(xué)生可能提出更廣泛更復(fù)雜的問題,學(xué)生操作儀器時(shí)會(huì)出現(xiàn)更多問題,使用的試劑種類和用量也會(huì)相應(yīng)的增加,這對(duì)指導(dǎo)教師和實(shí)驗(yàn)教師的管理能力、指導(dǎo)能力和知識(shí)儲(chǔ)備提出了更高的要求。因此,為了提高開放性實(shí)驗(yàn)室的教學(xué)和科研質(zhì)量,一方面需要提高實(shí)驗(yàn)教師的專業(yè)水平、服務(wù)意識(shí)和管理能力,另一方面學(xué)院應(yīng)制定相應(yīng)的激勵(lì)機(jī)制,以調(diào)動(dòng)實(shí)驗(yàn)教師的積極性和主動(dòng)性。
(二)健全開放性實(shí)驗(yàn)室的管理制度,保證其有效運(yùn)行實(shí)驗(yàn)室開放將會(huì)涉及許多新的管理問題,這就需要制定相關(guān)的管理制度對(duì)開放性實(shí)驗(yàn)室的日常運(yùn)行提供保障。例如:實(shí)驗(yàn)室開放后,實(shí)驗(yàn)試劑和耗材消耗就會(huì)增加,試劑和耗材領(lǐng)用與管理的問題;學(xué)生進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的治安、防火和安全檢查問題;儀器設(shè)備損壞賠償?shù)膯栴};大型精密儀器的管理和使用的問題等,都需要制定相關(guān)的規(guī)章制度來進(jìn)行合理規(guī)范,為實(shí)驗(yàn)室開放運(yùn)行提供制度保障。此外,遵守開放性實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度是管理的重點(diǎn),光有規(guī)章制度而不執(zhí)行,規(guī)章制度也就只是一個(gè)幌子。這就要求實(shí)驗(yàn)室管理人員必須嚴(yán)格執(zhí)行各項(xiàng)規(guī)章制度。
(三)充分挖掘?qū)嶒?yàn)室的潛力,滿足畢業(yè)實(shí)習(xí)的需求基于預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)的畢業(yè)實(shí)習(xí)階段的特點(diǎn)和具體要求,開放性實(shí)驗(yàn)室應(yīng)盡力從以下兩個(gè)方面配合畢業(yè)實(shí)習(xí)。1.開放性實(shí)驗(yàn)應(yīng)與本專業(yè)畢業(yè)實(shí)習(xí)內(nèi)容相結(jié)合。例如我院預(yù)防醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心近年來開設(shè)了“毒理學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)———化學(xué)物對(duì)機(jī)體毒性作用評(píng)價(jià)”、“鉛作業(yè)人群的健康監(jiān)護(hù)”及“常見食品的營(yíng)養(yǎng)與食品衛(wèi)生學(xué)測(cè)定”等8項(xiàng)綜合性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,綜合性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目中涉及到許多較為先進(jìn)的檢驗(yàn)方法,這些檢驗(yàn)方法可以在畢業(yè)實(shí)習(xí)中得以運(yùn)用。但并不是所有的檢驗(yàn)方法學(xué)生通過完成一次綜合性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目就能熟練掌握,開放性實(shí)驗(yàn)室的建立讓學(xué)生有機(jī)會(huì)再次進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,在實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員的指導(dǎo)下進(jìn)一步學(xué)習(xí)和掌握那些較為先進(jìn)的檢驗(yàn)方法。2.加強(qiáng)科學(xué)管理,提供全方位服務(wù)。預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)的畢業(yè)實(shí)習(xí)階段不但項(xiàng)目眾多而且周期較長(zhǎng),學(xué)生一旦選定實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,就需要實(shí)驗(yàn)室全天候?qū)ζ溟_放,從而給預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)本科生創(chuàng)造自由進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的條件。這就要求實(shí)驗(yàn)中心教師不僅要付出更多時(shí)間,而且要采取更加合理且有效的管理方式,以求達(dá)到較好的效果。
(四)實(shí)驗(yàn)教師與指導(dǎo)教師應(yīng)密切配合,強(qiáng)化畢業(yè)實(shí)習(xí)的過程監(jiān)督預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)本科畢業(yè)實(shí)習(xí)的質(zhì)量能否提高主要取決于實(shí)驗(yàn)教師與指導(dǎo)教師之間配合是否密切。對(duì)于指導(dǎo)教師來說,要主動(dòng)與實(shí)驗(yàn)中心聯(lián)系,確定畢業(yè)實(shí)習(xí)的項(xiàng)目和具體實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。對(duì)于實(shí)驗(yàn)管理和技術(shù)人員來說,發(fā)現(xiàn)實(shí)習(xí)過程中的問題,要及時(shí)與畢業(yè)生的指導(dǎo)教師聯(lián)系,有效溝通,商議解決問題的方式和方法。畢業(yè)實(shí)習(xí)階段必須建立例會(huì)制,構(gòu)建實(shí)習(xí)指導(dǎo)教師與實(shí)驗(yàn)教師良好的溝通渠道,要從思想上充分重視,合理安排時(shí)間,抓好各個(gè)教學(xué)環(huán)節(jié),對(duì)畢業(yè)論文選題、開題、設(shè)計(jì)、寫作、答辯等環(huán)節(jié)進(jìn)行全過程嚴(yán)格監(jiān)控[5],有效解決畢業(yè)實(shí)習(xí)中發(fā)現(xiàn)的相關(guān)問題。
以開放性實(shí)驗(yàn)室為平臺(tái)指導(dǎo)畢業(yè)實(shí)習(xí)的成效
(一)學(xué)生對(duì)科研實(shí)驗(yàn)和學(xué)習(xí)的興趣得到激發(fā)開放性實(shí)驗(yàn)室的建立,為本科生提供了發(fā)揮自身才能的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。對(duì)預(yù)防醫(yī)學(xué)專業(yè)而言,本科生可對(duì)自己學(xué)習(xí)過程以及日常生活中的疑惑和思考進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探索與求證,并由此確立自己的畢業(yè)論文選題,從而激發(fā)學(xué)生對(duì)本專業(yè)的學(xué)習(xí)熱情和科研實(shí)踐的興趣。通過對(duì)2008-2012年預(yù)防醫(yī)學(xué)本科畢業(yè)實(shí)習(xí)基本情況的歸類分析,得出2008-2012年實(shí)驗(yàn)研究占預(yù)防醫(yī)學(xué)本科畢業(yè)實(shí)習(xí)之比呈“U型”變化,結(jié)果見表1。產(chǎn)生上述“U型”變化的主因是我校預(yù)防醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心自2007年開始逐步搬遷至大學(xué)城新區(qū),本科生實(shí)驗(yàn)研究的條件受限,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)研究占畢業(yè)實(shí)習(xí)比逐年下降。2011年預(yù)防醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心實(shí)現(xiàn)整體搬遷后,開放性實(shí)驗(yàn)室條件得到明顯改善,實(shí)驗(yàn)研究占畢業(yè)實(shí)習(xí)比大幅提高,到2012年達(dá)到63.57%,體現(xiàn)了學(xué)生對(duì)科研實(shí)驗(yàn)的興趣加大,實(shí)現(xiàn)了興趣驅(qū)動(dòng)的目的。
The Understanding of Teaching Method Reform
about Medical Professional Courses
MAO Huajie, WANG Xiaochun
(Department of Laboratory Medicine,Xiangya Medical School, Central South University, Changsha, Hu'nan 410013)
Abstract Medical professional class has its particularity.We need to combine with clinical to reform teaching method according to its characteristics that fully mobilizing students' learning initiative and enthusiasm, encouraging students to think and analyze problems independently and enhancing students mastery of knowledge and self cognitive ability, so as to improve the teaching quality. It will receive twice the result with half the effort by adopting variety of teaching methods such as interactive, heuristic, experiential and autonomous learning method.
Key words medical; professional courses; teaching method
課堂教學(xué)是大學(xué)教學(xué)的主要組織形式,傳統(tǒng)的講授方式是老師要以教材為主“解惑授業(yè)”,因而大學(xué)課堂教學(xué)行為較單一,課堂氣氛較沉悶,只注重知識(shí)從老師向?qū)W生的傳授,忽視了對(duì)學(xué)生能力和素質(zhì)的培養(yǎng)。在社會(huì)環(huán)境迅速變化的大背景下,建立“以學(xué)生為中心”的教學(xué)理念并對(duì)課堂教學(xué)模式進(jìn)行改革,激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性,提高教學(xué)質(zhì)量,是大學(xué)教學(xué)改革的一個(gè)必然趨勢(shì)。
1 開展多種教學(xué)方法
針對(duì)學(xué)生開展多種教學(xué)方法綜合利用的學(xué)習(xí)過程,就是鼓勵(lì)學(xué)生主動(dòng)獲取知識(shí)并積極發(fā)散思維的過程,而不是單一的老師向?qū)W生的灌輸過程。多種教學(xué)方法的綜合開展目的就是要提高教學(xué)質(zhì)量,不僅培養(yǎng)學(xué)生具有扎實(shí)的專業(yè)知識(shí)和實(shí)踐技能,而且培養(yǎng)學(xué)生對(duì)社會(huì)各種問題的綜合判斷能力和解決問題的創(chuàng)造力,使他們成為身心健康的人才。因?yàn)閷W(xué)生在整個(gè)教學(xué)活動(dòng)占有主體地位,其課堂活躍程度將直接對(duì)教學(xué)效果產(chǎn)生影響,所以需要依據(jù)能否有效調(diào)動(dòng)學(xué)生的參與性與主動(dòng)性來選擇采取哪種教學(xué)方法。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)旨在培養(yǎng)品德高尚、基礎(chǔ)扎實(shí)、技能熟練、素質(zhì)全面的德、智、體、美全面發(fā)展的應(yīng)用型醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專門人才。要求掌握醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)基本知識(shí)、基本理論和基本技能,以及與之關(guān)聯(lián)的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)的相關(guān)知識(shí);掌握先進(jìn)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù),具備初步的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)能力。所以,在專業(yè)課教學(xué)中要突出與臨床緊密結(jié)合。
1.1 課堂教學(xué)
首先授課老師在課堂上按學(xué)科專業(yè)授課,在講授過程中采用多種教學(xué)方法聯(lián)合應(yīng)用,這其中包括互動(dòng)式教學(xué)法、啟發(fā)式教學(xué)法、研究性教學(xué)法、實(shí)踐性教學(xué)法等一些常常單一應(yīng)用的方法。在綜合運(yùn)用這些方法時(shí),教師應(yīng)首先對(duì)學(xué)生的基本學(xué)習(xí)情況進(jìn)行全面了解,采用難易度適中的內(nèi)容來激發(fā)學(xué)生的求知欲望,聯(lián)合多種教學(xué)方法使枯燥、抽象的專業(yè)課程的講授變?yōu)榻膛c學(xué)的雙向互動(dòng),不僅能夠鍛煉學(xué)生的自主學(xué)習(xí)和發(fā)散思維的能力,而且在一定程度上可以督促教師不斷進(jìn)行知識(shí)的更新,從而提高講授技能。
例如:臨床生物化學(xué)檢驗(yàn):按蛋白質(zhì)代謝、糖代謝、脂類代謝分類,然后按疾病的生物化學(xué)結(jié)合臨床檢測(cè)項(xiàng)目展開;臨床微生物學(xué)及檢驗(yàn):細(xì)菌感染的實(shí)驗(yàn)室診斷、細(xì)菌的生化反應(yīng)、醫(yī)院感染的監(jiān)測(cè)、細(xì)菌、病毒等內(nèi)容與臨床疾病及檢測(cè)相結(jié)合。教師需要激發(fā)學(xué)生的好奇心并調(diào)動(dòng)課堂氣氛,一般可以采用案例分析課與研討課的方式,學(xué)生可以高效地對(duì)教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行消化,學(xué)生通過課后進(jìn)一步的自學(xué)并閱讀相關(guān)文獻(xiàn)來完成學(xué)習(xí)內(nèi)容。沒有一個(gè)良好的課堂氛圍,授課內(nèi)容將難以實(shí)施,以學(xué)生感興趣的話題為基礎(chǔ),讓學(xué)生放松心情盡情表達(dá)、探討,更能激發(fā)和調(diào)動(dòng)他們的學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī),鞏固所學(xué)知識(shí)。教學(xué)過程遵循參與性和主動(dòng)性原則,教師的教學(xué)方法、教學(xué)資料都是圍繞怎么讓學(xué)生更好地理解掌握知識(shí)而設(shè)量采取的,在課堂上應(yīng)充分調(diào)動(dòng)學(xué)生學(xué)習(xí)的積極性,使學(xué)生養(yǎng)成獨(dú)立思考的習(xí)慣,鼓勵(lì)學(xué)生發(fā)表不同的見解,增強(qiáng)學(xué)生掌握知識(shí)的能力以及鍛煉自我認(rèn)知的能力。
1.2 留課后思考題或討論題
留課后思考題或討論題主要是針對(duì)專業(yè)課階段進(jìn)行的,所選題目是對(duì)所學(xué)課程的鞏固與深化。主要是讓學(xué)生與教師進(jìn)行討論,學(xué)生需要查閱大量相關(guān)資料,增加了學(xué)生的閱讀量及知識(shí)面。
1.3 討論課
討論課應(yīng)與課堂教學(xué)的大綱相關(guān)聯(lián),參加人數(shù)一般不超過30人,學(xué)生和教師自由地、直接地交流,其目的就是充分調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性、使學(xué)生養(yǎng)成自主學(xué)習(xí)的習(xí)慣、訓(xùn)練學(xué)生的口頭表達(dá)能力并增強(qiáng)學(xué)生的參與意識(shí)。形式可以是學(xué)生按照自己感興趣內(nèi)容制作PPT報(bào)告;可以是學(xué)生提問,老師與學(xué)生一起參與討論;也可以是老師給出病例,學(xué)生需要根據(jù)所給資料進(jìn)行分析,給出可能的診斷,還需要進(jìn)一步做哪些相關(guān)檢查等。通過開展討論課學(xué)生可以自由結(jié)合、充分討論、表現(xiàn)自我,獲得廣泛的知識(shí),并養(yǎng)成自主學(xué)習(xí)、綜合思考的能力。
2 “教學(xué)、實(shí)踐一體化”的教學(xué)模式
“教學(xué)、實(shí)踐一體化”教學(xué)模式是在著名教育學(xué)家陶行知先生的“教學(xué)做”教育理念的基礎(chǔ)上,結(jié)合了現(xiàn)代教學(xué)方法的一種新的教學(xué)模式,是一種更加有效的教學(xué)方法。專業(yè)性是醫(yī)學(xué)教育的一個(gè)重要特點(diǎn),醫(yī)學(xué)生既要學(xué)文化、理論知識(shí),更重要的是學(xué)習(xí)操作和技能,那么究竟我們應(yīng)將學(xué)生置于什么樣的教學(xué)環(huán)境之中,才有可能產(chǎn)生比較理想的教學(xué)效果?最明智且最有效的做法是盡可能地讓學(xué)生置身于所學(xué)專業(yè)的職業(yè)環(huán)境中去,接觸、了解、熟悉和掌握專業(yè)知識(shí)和技能。因此,教學(xué)與實(shí)踐一體化的教學(xué)模式正是營(yíng)造了這樣一種課堂氛圍,使學(xué)生經(jīng)歷了實(shí)踐、認(rèn)識(shí)到再實(shí)踐、再認(rèn)識(shí)內(nèi)在聯(lián)系密切螺旋式上升提高過程。所謂的一體化教學(xué)模式就是不再劃分理論課和實(shí)驗(yàn)課,而是變?yōu)槔碚摻虒W(xué)和實(shí)驗(yàn)教學(xué)融于一體的課程教學(xué),課程由同一教師主講,直接采用實(shí)驗(yàn)室教學(xué)或醫(yī)院教學(xué)的教學(xué)方式,以完成教學(xué)目標(biāo)和教學(xué)任務(wù)。這種教學(xué)方法能充分調(diào)動(dòng)和激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣并高效地培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手實(shí)驗(yàn)?zāi)芰蛯I(yè)技能。一體化教學(xué)要求教學(xué)單位必須具備與相關(guān)專業(yè)相適應(yīng)的硬件設(shè)備和實(shí)驗(yàn)環(huán)境。醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心應(yīng)具有足夠的設(shè)備,例如:筆記本電腦、多媒體投影儀、自動(dòng)生化分析儀、熒光及普通PCR儀,顯微鏡、無(wú)菌操作臺(tái),臨床基礎(chǔ)檢驗(yàn)和血液檢驗(yàn)的教學(xué)圖片等,從設(shè)備上為一體化的教學(xué)提供可能,為教師和學(xué)生的教學(xué)過程達(dá)到理論與實(shí)踐相交替提供保障,滿足一人一崗的要求。要實(shí)施一體化教學(xué),對(duì)教師的要求是比較高的,不僅要求教師具備檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)相關(guān)的理論功底,同時(shí)要求上課教師具備扎實(shí)的科研和實(shí)驗(yàn)操作能力,更重要的是教師應(yīng)具備將理論知識(shí)向?qū)嵺`轉(zhuǎn)化的能力。對(duì)教師的要求不僅是傳統(tǒng)意義上的具有教學(xué)能力和工作經(jīng)驗(yàn)的復(fù)合型人才,同時(shí)還要求教師具有創(chuàng)新綜合能力及科研能力,否則教師很難根據(jù)教學(xué)方案進(jìn)行擴(kuò)展,且難以控制教學(xué)過程,無(wú)法真正做到有問必答,融會(huì)貫通。為了增強(qiáng)教師的實(shí)驗(yàn)操作能力,教研室專門制定了相應(yīng)的教師培養(yǎng)計(jì)劃,定期組織教師參加各項(xiàng)培訓(xùn)。定期組織教師到各大三甲醫(yī)院檢驗(yàn)科進(jìn)行專業(yè)實(shí)踐技能的培訓(xùn)學(xué)習(xí),同時(shí)也采取了“請(qǐng)進(jìn)來”的模式,努力引進(jìn)醫(yī)院的優(yōu)秀技術(shù)員到學(xué)校做實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)課程指導(dǎo)教師,協(xié)助開展一體化教學(xué)的教師進(jìn)行相關(guān)技術(shù)實(shí)踐教學(xué)。通過一體化教學(xué),學(xué)生在檢驗(yàn)科實(shí)際工作中對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)相關(guān)知識(shí)的運(yùn)用及實(shí)驗(yàn)操作能力都得到了用人單位的一致好評(píng)。實(shí)踐證明,理論與實(shí)踐相結(jié)合的一體化教學(xué)是符合醫(yī)學(xué)教育的規(guī)律和特點(diǎn)的,是一種適應(yīng)醫(yī)學(xué)教育發(fā)展的較為成功的教學(xué)方法。
政府、社會(huì)、學(xué)校、醫(yī)院(企業(yè))等應(yīng)重視醫(yī)學(xué)教育發(fā)展中的重要作用,應(yīng)通過多種形式加大經(jīng)費(fèi)投入。如院系可以向?qū)W校提交申請(qǐng)書并就實(shí)驗(yàn)中心的基本情況進(jìn)行介紹,經(jīng)學(xué)校審核通過,專門給院系在購(gòu)置儀器設(shè)備的款項(xiàng)上撥款。另一方面,學(xué)校和醫(yī)院(企業(yè))可以通過建立深層次的校企合作長(zhǎng)效機(jī)制,實(shí)現(xiàn)資源共享,互利雙贏。如可利用學(xué)生在醫(yī)院檢驗(yàn)科見習(xí)的機(jī)會(huì)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)教學(xué);醫(yī)院檢驗(yàn)科在購(gòu)買新的儀器設(shè)備后可以捐獻(xiàn)一些不再用的檢驗(yàn)儀器設(shè)備給學(xué)校實(shí)驗(yàn)室。學(xué)生在教師的教學(xué)過程中,一邊學(xué)一邊做,真正實(shí)現(xiàn)了理論知識(shí)和實(shí)驗(yàn)操作的相互轉(zhuǎn)化。
3 教學(xué)活動(dòng)的探究性原則
教學(xué)活動(dòng)的探究性原則并不是什么新生事物,是由于傳統(tǒng)的“傳授型”教學(xué)方法使得其慢慢淡化了。所謂醫(yī)學(xué)專業(yè)的探究性教學(xué),是指從醫(yī)療大環(huán)境的實(shí)際情況出發(fā),根據(jù)相應(yīng)的培養(yǎng)計(jì)劃和開設(shè)的課程,選擇并確定相應(yīng)的教學(xué)方法,使學(xué)生在老師的指導(dǎo)下,充分發(fā)揮自己的潛能并富有創(chuàng)造性地主動(dòng)學(xué)習(xí)。在科技發(fā)展突飛猛進(jìn)的今天,培養(yǎng)創(chuàng)新型人才就顯的至關(guān)重要,教育工作者應(yīng)該重新認(rèn)識(shí)探究性原則的重要性。當(dāng)然,任何事物的發(fā)展都是有規(guī)律可循的,教學(xué)活動(dòng)的探究性原則重新得以重視并不是簡(jiǎn)單的重復(fù)歷史,這樣的變化反映了教育工作者對(duì)教育規(guī)律的研究是不斷深化的,充分體現(xiàn)了中與時(shí)俱進(jìn)的理論品質(zhì)。教學(xué)活動(dòng)的探究性包含了多個(gè)層面的內(nèi)容,包括觀察現(xiàn)象、找出問題、通過閱讀書籍或?yàn)g覽網(wǎng)上資源對(duì)已知的定論進(jìn)行全面了解,制定詳細(xì)的研究計(jì)劃,根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對(duì)現(xiàn)有的結(jié)論作出系統(tǒng)評(píng)價(jià),利用一些工具開對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行收集、分析和解釋,結(jié)合現(xiàn)有結(jié)論進(jìn)行預(yù)測(cè)并確定假設(shè),考慮是否有更加合適的解釋,定期進(jìn)行結(jié)果的交流。
中南大學(xué)自2012年開始規(guī)定上課教師必須是副教授以上職稱,這正是體現(xiàn)了探究性教學(xué)的要求,即要求我校的年輕教師不能再像從前一樣按照一成不變的教材來完成教學(xué)任務(wù),而是要求教師通過繼續(xù)學(xué)習(xí)和努力科研不斷地更新自己的知識(shí)結(jié)構(gòu),深刻了解相關(guān)學(xué)科的前沿發(fā)展水平,努力將自己的研究成果與教學(xué)有機(jī)地整合在一起,在向?qū)W生傳授專業(yè)知識(shí)的同時(shí),努力培養(yǎng)學(xué)生的科研能力和創(chuàng)新能力。加快推進(jìn)探究性教學(xué)模式,大力開展創(chuàng)新性教育,是當(dāng)前高等教育教學(xué)改革的一個(gè)方向。經(jīng)過這種教學(xué)模式的改革,一定會(huì)引起深刻的教育變革,特別是教育管理觀念的轉(zhuǎn)變,這種改變還會(huì)對(duì)教學(xué)領(lǐng)域以外的多個(gè)方面產(chǎn)生影響。因此我們有理由相信,只要教育工作者大膽地去改革和實(shí)踐,新的探究式教學(xué)模式必將在創(chuàng)新型人才的培養(yǎng)中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。
4 展望
【關(guān)鍵詞】 檢驗(yàn)科;感染;管理
檢驗(yàn)科是一個(gè)醫(yī)院工作運(yùn)行不可缺少的一個(gè)科室,工作人員在與患者接觸的同時(shí),更要與患者的血液、體液、分泌物、組織和排泄物等直接接觸,導(dǎo)致感染幾率的增加。因此,檢驗(yàn)科是個(gè)容易發(fā)生醫(yī)源性感染的科室,同時(shí)也是醫(yī)院應(yīng)該加強(qiáng)重點(diǎn)管理的科室,現(xiàn)在就這些醫(yī)源性問題進(jìn)行探討,分析其原因,目的在于提高檢驗(yàn)科預(yù)防醫(yī)源性感染的效能,預(yù)防醫(yī)源性感染事故的發(fā)生[1]。
1 檢驗(yàn)科感染的原因
1.1 醫(yī)院領(lǐng)導(dǎo)對(duì)于檢驗(yàn)科的重視不夠,醫(yī)務(wù)人員認(rèn)識(shí)不到位,醫(yī)院領(lǐng)導(dǎo)大多數(shù)有重檢輕防的思想,在日常的檢驗(yàn)工作中缺少必要的防御常識(shí),如很多醫(yī)務(wù)人員在工作中不佩戴口罩、帽子;在接觸感染性檢驗(yàn)標(biāo)本時(shí)不佩戴手套;清洗處理廢棄標(biāo)本時(shí)消毒處理不甚嚴(yán)格,造成二次傳播;在實(shí)驗(yàn)中,未經(jīng)清洗消毒手便接聽手機(jī),造成傳染性微生物的傳播;更有甚者在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)食、飲水等。
1.2 防護(hù)意識(shí)跟不上,防御措施不健全。醫(yī)院為追求利潤(rùn),過度重視檢驗(yàn)業(yè)務(wù)量,輕視了醫(yī)院的感染,既沒有做到切實(shí)有效的保護(hù)自己,也沒保護(hù)患者,造成醫(yī)源性感染幾率的增加。除此之外,醫(yī)院檢驗(yàn)科工作室在建筑設(shè)計(jì)方面存在衛(wèi)生學(xué)上的缺陷,增加了醫(yī)院感染的幾率。
1.3 醫(yī)院規(guī)章制度不健全,存在制度上的漏洞,可以從以下幾個(gè)方面看出:科室人員出入制度;標(biāo)本處理程序;消毒以及清洗制度等沒有明確而具體的規(guī)定,對(duì)于突發(fā)事件例如血液或體液的飛濺污染、細(xì)菌分離鑒定時(shí)的污染等沒有明確的消毒和監(jiān)測(cè)等處理制度。
1.4 實(shí)驗(yàn)室布局不合理,患者及家屬可隨便出入實(shí)驗(yàn)室,或者由于醫(yī)院房間分配不合理,造成作業(yè)流程極其不合理[2]。污染區(qū)、半污染區(qū)、清潔區(qū)不能明顯分開,增加了醫(yī)源性的感染的幾率,造成的危害很大。
1.5 檢驗(yàn)人員對(duì)于感染知識(shí)的學(xué)習(xí)甚少,很多在校學(xué)習(xí)時(shí)只注重專業(yè)知識(shí)的積累,而忽視了感染知識(shí)的學(xué)習(xí),特別是對(duì)于醫(yī)院的感染新知識(shí)、新動(dòng)態(tài)了解甚少,不夠重視,對(duì)于消毒滅菌的方法以及措施、消毒液的配制使用等常識(shí)性的知識(shí)掌握不夠。
2 管理對(duì)策
2.1 規(guī)范消毒滅菌工作 通過規(guī)范的消毒滅菌,切斷檢驗(yàn)科內(nèi)感染的傳播途徑,是控制整個(gè)醫(yī)院內(nèi)感染發(fā)生和傳播的重要措施[3]。同時(shí),對(duì)患者分泌物、排泄物及醫(yī)療廢棄物處理應(yīng)是用消毒液浸泡或高壓滅菌然后集中焚燒處理,根據(jù)細(xì)菌室反饋回來的空氣培養(yǎng)結(jié)果制定相應(yīng)的措施,做到空氣消毒、地面和物體表面消毒、醫(yī)療器械及用品、被服消毒等。將使用過的試管、離心管、加樣器滴頭等一次性檢驗(yàn)用品放入消毒桶內(nèi),經(jīng)過高溫高壓消毒后,再進(jìn)行廢棄處理。定期對(duì)加樣器、吸耳球、顯微鏡等進(jìn)行紫外線照射或者消毒液擦拭消毒。對(duì)計(jì)算機(jī)的鍵盤、鼠標(biāo)、電話等進(jìn)行消毒液擦拭消毒,采用計(jì)算機(jī)管理系統(tǒng),電腦打印檢驗(yàn)報(bào)告單,做到申請(qǐng)單和報(bào)告單分開,從根本上解決檢驗(yàn)報(bào)告單的消毒問題,切斷了傳播途徑。指定專門負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)生物安全的布置,檢查落實(shí),包括消毒用器的領(lǐng)取、配制、發(fā)放,并且對(duì)消毒液進(jìn)行定期更換檢查。每天對(duì)空氣、儀器設(shè)備的表面、試驗(yàn)臺(tái)表面和地面進(jìn)行消毒,并且定期檢測(cè)。
2.2 規(guī)范的無(wú)菌操作 在檢驗(yàn)過程中,必須嚴(yán)格的遵守?zé)o菌技術(shù)的操作章程,嚴(yán)格洗手、戴口罩、佩戴無(wú)菌手套。在科室每個(gè)洗手籠頭前需要放置醫(yī)用消毒皂或者洗手液以及消毒液。
2.3 強(qiáng)化知識(shí)培訓(xùn),提高專業(yè)水平 定期或不定期組織全科人員學(xué)習(xí)衛(wèi)生部《醫(yī)院感染管理規(guī)范(試行)》和《消毒技術(shù)規(guī)范》等文件及管理辦法,根據(jù)科室的性質(zhì)和特點(diǎn),制定出切實(shí)可行的相關(guān)制度,定期監(jiān)測(cè)、檢查,杜絕工作中存在的隨意性。由于醫(yī)院感染學(xué)是一門新興學(xué)科,檢驗(yàn)人員應(yīng)不斷吸取新知識(shí),而不能僅僅局限在舊的知識(shí)層次上。檢驗(yàn)科在醫(yī)院感染管理中并不是處于從屬地位,而是同臨床科室一樣。具有獨(dú)立的舉足輕重的醫(yī)學(xué)地位。
2.4 提高防護(hù)設(shè)備的質(zhì)量 醫(yī)院領(lǐng)導(dǎo)方面,應(yīng)當(dāng)加大對(duì)檢驗(yàn)科的資金投入,購(gòu)置一些必要的防護(hù)設(shè)備,領(lǐng)導(dǎo)需要清楚地認(rèn)識(shí)到檢驗(yàn)科的重要性。如:全科室安裝免提電話機(jī),與此同時(shí),也要對(duì)電話機(jī)進(jìn)行消毒,以免因?yàn)閷?duì)電話的污染造成醫(yī)源性感染。檢驗(yàn)人員在結(jié)束檢驗(yàn)操作后或者是檢驗(yàn)同類標(biāo)本后,在檢驗(yàn)另一標(biāo)本前應(yīng)該及時(shí)洗手。同時(shí),需要強(qiáng)調(diào)一點(diǎn),帶醫(yī)用手套不能取代洗手,所以即使佩戴手套也要做好洗手工作。在發(fā)生意外血清飛濺入眼睛時(shí),需要對(duì)眼部進(jìn)行及時(shí)的清洗,所以,醫(yī)院需要購(gòu)置安裝洗眼設(shè)備[4]。
2.5 認(rèn)真開展好醫(yī)院感染的監(jiān)測(cè)工作,監(jiān)測(cè)是基礎(chǔ),管理是手段,控制是目的。只有通過監(jiān)測(cè)才能取得第一手資料,才能發(fā)現(xiàn)醫(yī)院感染管理工作中的各種問題和薄弱環(huán)節(jié),為采取有效措施提供依據(jù),并通過監(jiān)測(cè)來評(píng)價(jià)各種措施的效果。
2.6 采用先進(jìn)的檢測(cè)技術(shù),協(xié)助查找傳染源,切斷傳播途徑,控制與降低醫(yī)院感染的發(fā)生 從不同感染患者同一時(shí)期分離出的同種病原菌,藥敏結(jié)果如有相同抗菌譜,初步判斷為同源性感染。利用分子生物學(xué)的理論和技術(shù)進(jìn)一步證實(shí),正確地追蹤傳染源。分子流行病學(xué)是以分子生物學(xué)地理論和技術(shù)研究流行病學(xué)的一個(gè)分支。利用的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室技術(shù),對(duì)院內(nèi)感染所分離到的病原體和通過采樣所得環(huán)境中相同的細(xì)菌,除進(jìn)行血清學(xué)、噬菌體、耐藥譜分型外,還進(jìn)行了基因分型:如質(zhì)粒圖譜、核酸內(nèi)切酶圖譜、核酸探針等。以保證更穩(wěn)定、準(zhǔn)確的追蹤傳染源,為院內(nèi)感染流行病學(xué)的分析提供有利的依據(jù)。發(fā)現(xiàn)“苗頭”及時(shí)采取措施,多次杜絕了院內(nèi)感染的發(fā)生。
醫(yī)院感染又稱醫(yī)院內(nèi)獲得性感染或醫(yī)院內(nèi)感染,是指住院患者發(fā)生的感染,包括入院時(shí)尚未發(fā)生此感染,也未處于此感染的潛伏期狀態(tài)。隨著醫(yī)院工業(yè)和醫(yī)院技術(shù)的發(fā)展,大量抗生素進(jìn)入臨床,各種侵入性操作和檢查增多,醫(yī)院感染問題也日益突出,已成為醫(yī)院急需解決的公共衛(wèi)生問題。檢驗(yàn)科作為一個(gè)單獨(dú)的科室,有舉足輕重的地位,因?yàn)樗粌H僅是為全院的臨床服務(wù),同時(shí)還要擔(dān)負(fù)起全院的微生物檢測(cè)工作。因此,檢驗(yàn)科作為預(yù)防醫(yī)院感染的一個(gè)重要組織部門,在控制院內(nèi)感染工作中,起著非常重要的作用,主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:檢驗(yàn)科應(yīng)當(dāng)成立自己的防染小組,負(fù)責(zé)監(jiān)測(cè)各實(shí)驗(yàn)室空氣消毒及無(wú)菌操作制度的落實(shí)情況,如:實(shí)驗(yàn)室管理、人員防護(hù)、檢驗(yàn)后的標(biāo)本處理等,只有加強(qiáng)自身防護(hù),個(gè)人自覺執(zhí)行,工作中認(rèn)真仔細(xì),才能有效地避免自身感染和院內(nèi)交叉感染的發(fā)生,防患于末然;重點(diǎn)加強(qiáng)微生物實(shí)驗(yàn)室的管理,微生物實(shí)驗(yàn)室作為一個(gè)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu),要有計(jì)劃地向廣大醫(yī)務(wù)人員提供有關(guān)部門的信息,有的放矢地使用抗生素,增強(qiáng)廣大醫(yī)務(wù)人員預(yù)防醫(yī)院感染的意識(shí),重視細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn),預(yù)防用藥,有根有據(jù),探索更有效地控制措施,預(yù)防醫(yī)院感染,所以,微生物實(shí)驗(yàn)室在降低醫(yī)院感染發(fā)病率過程中起到舉足輕重的作用。由此總結(jié),醫(yī)院感染的發(fā)生直接影響了患者家庭、社會(huì)以及國(guó)家的安全秩序。同時(shí),醫(yī)院感染的防治工作也有所進(jìn)展,但是仍存在許多不足,表現(xiàn)為:醫(yī)院感染教材較少;低年資住院醫(yī)師以及聘用護(hù)士的醫(yī)院感染整體知識(shí)水平較低;消毒滅菌重視不夠等。所以對(duì)醫(yī)院感染的預(yù)防和控制各級(jí)管理一定要重視,相信通過進(jìn)一步完善已有的醫(yī)院感染監(jiān)控與管理體系,切實(shí)加強(qiáng)醫(yī)院感染教育與再教育,通過廣大醫(yī)務(wù)人員堅(jiān)持不懈的努力,認(rèn)真做好醫(yī)院感染防治工作,一定能把感染控制到最低水平。
參考文獻(xiàn)
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